孙金生
- 作品数：124 被引量：524H指数：13
- 供职机构：天津师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程政治法律更多>>
- 中华绒螯蟹眼柄MTXO细胞GABA受体通道研究被引量：5
- 2003年
- 采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)三种类型神经内分泌细胞对 0 0 1～ 5mmol/Lγ氨基丁酸 (γ aminobutyricacid ,GABA)的反应 ,并结合选择性拮抗剂和激动剂的使用进行了GABA受体研究 .在电流钳模式下 ,依据不同NernstCl-电位 ,三种类型细胞均对GABA产生去极化或超级化反应 .在电压钳模式下 ,GABA激活Cl-通道电流 (IGABA) .IGABA在灌流GABA后约12 0 0ms内激活 ,80 0ms内达到峰值 ,没有明显的脱敏反应 ,反转电位接近NernstCl-电位 .IGABA幅值呈浓度依赖性 ,激活阈值为 0 0 1mmol/L ,约在 0 5mmol/L达到饱和 .药理学实验结果表明 ,中华绒螯蟹眼柄神经内分泌细胞GABA受体是Cl-通道蛋白 ,对Cl-离子通道阻断剂Picrotoxin和Niflumicacid敏感 ,但是对GABAA 受体拮抗剂Bicuculline和GABAC 受体激动剂cis 4 aminocrotonicacid (CACA)和trans 4 aminocrotonic (TACA)均不敏感 .
- 孙金生高春蕾相建海
- 关键词：中华绒螯蟹眼柄GABA受体视神经节神经内分泌细胞
- 迟缓爱德华氏菌刺激对牙鲆转录组差异基因表达的影响
- 2018年
- 为了研究迟缓爱德华氏菌刺激下牙鲆基因表达作出的响应,采用高通量测序平台(Illumina HiSeq)分别对迟缓爱德华氏菌刺激的牙鲆和未受刺激牙鲆的肾脏进行转录组测序,并对差异基因进行生物信息学分析,包括GO(基因功能注释)、SNP(单核苷酸多态性)分析、SSR(简单重复序列)分析等.结果表明,用Trinity软件对clean reads进行拼接后,聚类得到222 980条转录本,总长200 234 420 bp,平均长度898 bp,N50为1 886 bp.对组装的序列进行基因功能注释后,有99 808条序列得到了注释.筛选出2 502个差异表达比较显著的基因,表达量上调的有1 280个,下调的有1 222个.GOseq结果显示差异基因显著富集在38个GO terms上,包括6个细胞组分、12个生物学过程和20个分子功能.差异基因共获得277个KEGG通路富集,627个差异基因显著富集到20条信号通路上,其中,8个与信号通路有关,3个与发育有关,9个与相关疾病有关.
- 周密郑津辉郑津辉耿绪云耿绪云潘宝平孙金生
- 关键词：牙鲆转录组迟缓爱德华氏菌高通量差异基因表达
- 调控T型钙通道Ca_v3.1电压依赖性失活的分子结构域(英文)被引量：1
- 2014年
- T型钙通道（Cav3）广泛分布于各类细胞,其显著的电生理学特点是低电位激活和快速的电压依赖性失活.失活在通道的生理功能调节中起十分重要的作用,但具体参与通道失活的分子基础目前并不完全清楚.为明确Cav3.1通道中调控电压依赖性失活的结构域,用Cav1.2通道（无电压依赖性失活）结构域Ⅰ和Ⅱ中的S1-S4、S5-S6区及Ⅰ和Ⅱ间的联系区替换Cav3.1中的相应区域,构建嵌合通道,并在卵母细胞中表达,用电压钳技术分析通道的电生理学特性.结果表明,替换Ⅰ中的S1-S4或S5-S6区可使Cav3.1的失活特性显著改变,但这种改变主要是由激活-失活偶联所致.Ⅱ的替换使通道的失活曲线参数发生显著改变,表明结构域Ⅱ,包括S1-S4和S5-S6均参与Cav3.1失活过程的调控.Ⅰ、Ⅱ间的联系区及Ⅰ中的S5-S6主要调控Cav3.1的失活速率,Ⅰ和Ⅱ中的S1-S4对通道失活速率无影响.综上所述,结构域Ⅱ是调控Cav3.1电压依赖性失活的关键因素,结构域Ⅰ不参与该通道失活过程的调控.Ⅰ、Ⅱ间的联系区及Ⅰ中的S5-S6主要调控Cav3.1通道的失活速率,Ⅰ、Ⅱ中的S1-S4对通道失活速率无影响.
- 贺秉军胡芬商学良韩丽鑫吴广彦李俊英孙金生
- 关键词：结构域电生理
- 养殖鲆鱼腹水病二联灭活菌苗及制备方法
- 本发明公开了一种养殖鲆鱼腹水病二联灭活菌苗及制备方法，养殖鲆鱼腹水病二联灭活菌苗用下述方法制成：(1)制备迟缓爱德华氏菌灭活菌苗；(2)制备溶藻弧菌灭活菌苗；(3)用生理盐水或pH＝7.2、0.1M的无菌磷酸盐缓冲液分别...
- 孙金生耿绪云王雪惠薛淑霞李翔董学旺
- 文献传递
- 渔用肠溶口服疫苗及其制备方法
- 本发明属于渔用口服疫苗领域。渔用肠溶口服疫苗，包括外周喷涂疫苗层的颗粒或微丸、在疫苗层外逐层包衣隔离层和肠溶层，用于疫苗喷涂及隔离层包衣的干粉组合物A的组分及重量比分别为：成膜剂选用羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇或聚乙烯吡咯...
- 孙金生王守斌耿绪云韩超王雪惠董学旺李翔
- 文献传递
- 河蟹眼柄神经肽激素分泌的调控研究
- 眼柄X器官-窦腺复合体一直是甲壳动物内分泌研究的重点,钙离子内流是这一系统刺激-分泌偶联的关键,Cooke等人的实验结果证明流入细胞钙离子的多少与神经肽激素的分泌量呈正相关.作者在对河蟹眼柄X器官神经内分泌细胞进行离体培...
- 孙金生相建海刘安西
- 文献传递
- 凡纳滨对虾泛素交联酶E2基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2014年
- 首先在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)转录组测序的基础上,应用RT-PCR方法获得了凡纳滨对虾泛素交联酶E2(UE2)基因的开放阅读框序列。该序列长为447 bp,编码148个氨基酸,理论相对分子量为16.84 kD,等电点为4.90。同源性比对和系统进化分析显示,不同物种的UE2基因具有较高的同源性,其中凡纳滨对虾与中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的同源性最高并聚为一支。半定量RT-PCR分析表明,UE2基因在所检测的组织中均有表达;实时定量PCR分析表明,UE2基因在肝胰腺和肠中的表达量最高,在心脏、鳃、胃和肌肉组织中的表达量略低,在血淋巴中的表达量最低。原核表达分析结果显示,PCR?T7/NT-Topo TA-UE2表达载体在1.0 mmol/L IPTG、37℃诱导3 h条件下可获得纯度较高的分子量约17 kD的蛋白。利用亲和层析的方法将蛋白进行纯化用以制备抗体。研究结果将为深入研究UE2基因在对虾白斑综合症病毒侵染过程中的作用机制奠定基础。
- 李传香薛淑霞刘逸尘耿绪云孙金生
- 关键词：凡纳滨对虾原核表达
- 中华绒螯蟹血淋巴细胞钙激活钾通道研究被引量：1
- 2010年
- 利用膜片钳技术之内面向外式,对培养2～24h不同类型的中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)血淋巴细胞表达的钙激活钾(KCa)通道进行种类鉴别和特征研究。结果表明:在高对称钾溶液(200mmol/L)中,只有小颗粒细胞表达大电导钙激活钾(BKCa)通道和中电导钙激活钾(IKCa)通道。其中BKCa通道电导为396pS,通道的开放活动表现为矩形方波。同一钳制电压下,当浴液中[Ca^(2+)]在0.3～3.0 μmol/L范围内,通道开放概率和开放数目随Ca^(2+)浓度增加而增加,当浴液中[Ca^(2+)]达到100.0 μmol/L,通道开放受到抑制,表现明显的钙依赖性失活;当浴液中Ca^(2+)浓度为3.0 μmol/L,钳制电压分别为-40mV和-80mV时,通道平均开放时间分别为(0.03233±0.00741)s和(0.05585±0.01299)s(P<0.01),平均开放概率分别为0.596±0.125和0.961±0.012(P<0.01),说明通道开放具有电压依赖性。IKCa通道电导为88pS,开放活动也表现为矩形方波。当浴液中Ca^(2+)浓度为0.3、1.0μmol/L时,通道不开放;而Ca2+浓度为3.0μmol/L时通道开放,说明通道具有明显的钙依赖性,钳制电压分别为-40mV和-80mV时,通道平均开放时间分别为(0.01736±0.00403)s和(0.02262±0.01616)s(P>0.05),平均开放概率分别为0.699±0.065和0.790±0.114(P>0.05),说明通道开放不具有明显的电压依赖性。药理学研究结果表明,40mmol/L四乙铵(TEA)灌流15min能完全阻断KCa通道活动。这提示钙激活钾通道在甲壳动物细胞免疫中发挥重要作用。
- 段虎王雪惠孙金生
- 关键词：血淋巴细胞钙激活钾通道膜片钳
- 天津近海可培养细菌多样性的初步调查被引量：4
- 2009年
- 根据天津近海地理地貌特征设置了5个调查站位，分别采集不同水层的水样，进行了可培养细菌调查和多样性分析。调查结果表明，天津近海海水细菌总数为0．28×10^7～6．08×10^7cfu／L。划线培养获得的菌株经16SrDNA扩增后，用R5n Ⅰ、MspⅠ限制性内切酶酶切，共获得27种酶切谱型。对27种谱型的细菌进行16SrDNA克隆和序列分析表明，天津近海海水可培养细菌分属于3个分类单元，即变形细菌（18种）、厚壁菌（5种）、拟杆菌（4种）。对天津近海海水可培养细菌的可能代谢类型进行了比较分析，为今后开发利用海洋生物资源和修复天津近海生态环境提供了数据。
- 郭非耿绪云李翔魏俊利孙金生
- 关键词：可培养细菌细菌多样性RDNARFLP分析
- 甲壳动物眼柄神经肽类激素的分泌调控研究近况
- 本文介绍了甲壳动物眼柄神经肽类激素的分泌调控研究近况,研究发现,眼柄神经肽类激素的分泌受中枢神经系统多种胺类递质、非神经递质因子和外源激素等多方面的调控.胺类递质对眼柄神经肽类激素的分泌既有抑制也有促进,它们相互协调精确...
- 高春蕾孙金生相建海
- 关键词：甲壳动物
- 文献传递
