孙亚洲
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金:“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人乳头瘤病毒16型E6-E7基因体外转化NIH3T3细胞被引量:1
- 1991年
- 把人乳头瘤病毒16型(HPV16)长控制区(LCR)及与其相连的E6—E7基因片段正向插入pSV2neo质粒,构建HPVl6 LCR E6-E7真核细胞表达质粒,转染NIH3T3细胞,用 G418作筛选药物。转化的细胞形态具有表型改变,出现非锚地依赖性生长及在裸鼠体内致肿瘤能力。Southern印迹杂交结果表明,重组质粒已整合于转化细胞的染色体上。
- 金顺钱孙亚洲张伟梁克明利华王晓宏王希霞梁肖侯芷瑛商铭
- 关键词:人乳头瘤病毒NIH3T3细胞
- 人乳头瘤病毒16型E6E7ORF转化作用的研究被引量:3
- 1994年
- 构建了含人乳头瘤病毒16型(HPV16)-E6E7ORFs(nt83-855)片段和HPV16长控制区(LCR)加E6E7ORFs片段(nt7007-7904/0-879)的逆转录病毒载体pH21和pH18质粒,利用Lipofectin分别将它们导入病毒包装细胞pA317中,经过筛选获得G418抗性的病毒包装细胞,产生的重组病毒H21和H18感染的NIH3T3细胞都具有恶性细胞的形态学特征,并能在裸鼠体内形成肿瘤。Southern杂交结果证明,上述两基因片段都整合到细胞基因组中。本实验结果说明HPV16-E6E7基因片段是HPV16转化NIH3T3细胞的关键早期区,其自身LCR区在该转化过程中没有显示出重要作用。
- 侯芷英孙亚洲商铭明利华
- 关键词:人乳头瘤病毒
- HPV16主要衣壳蛋白L1在昆虫细胞中的表达及免疫学活性分析
- 2002年
- 目的 在昆虫细胞中表达HPV16L1(m2 0 2 )蛋白 ,并分析其免疫学活性。方法 构建表达载体pFASTBACHTb L1(m2 0 2 ) ,用重组病毒感染sf9细胞表达HPV16L1(m2 0 2 )蛋白 ,SDS PAGE、western blot鉴定其表达 ,亲和层析和离子交换层析纯化后的产物经鼻腔免疫Balb/c小鼠 ,竞争抑制ELISA分析免疫血清的中和活性。结果 SDS PAGE、western blot结果证明HPV16L1(m2 0 2 )蛋白的表达 ,纯化复性后产率约为 17% ,免疫血清具有竞争抑制HPV中和单抗与HPV16L1(m2 0 2 )相结合的能力。结论 昆虫细胞表达的HPV16L1(m2 0 2 )
- 孙肖红周兰萍孙亚洲李楠
- 关键词:昆虫细胞HPV16感染疫苗