孙丹
- 作品数：21 被引量：111H指数：5
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学化学工程环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 芽孢杆菌L_4菌株角蛋白酶的酶学性质研究
- 2009年
- 采用室内实验方法,对芽胞杆菌L4菌株产生的角蛋白酶进行了系列的酶学性质研究。结果表明,以角蛋白溶液为底物时该酶的最适酶促反应温度为40℃,最适酶促反应pH为7.0,其Km值为1.88mmol·L-1,Vmax为2.72×10-2mmol·L-·1s-1。利用不同的蛋白酶抑制剂进行酶活性抑制实验,发现该酶受邻啡罗啉和EDTA的抑制,推测该酶可能是一种含Zn2+的金属蛋白酶。微量元素对该酶活力的影响显著,Ca2+和Mg2+对酶活力有促进作用,高浓度的Fe2+和Cu2+明显抑制角蛋白活力。
- 张奇孙丹杨文博刘茜白芳
- 关键词：角蛋白酶酶学性质酶活力
- 中成药中甘草成份的免疫学检测方法的研究(英文)
- 2002年
- 通过 ELISA和免疫印迹法分析确定了甘草蛋白 ( GRP)的特异性 ,并建立 GRP的竞争型含量分析 ELISA法 .该 ELISA法显示了良好的特异性、再现性 ( c.v.=3.9% )和检测限 ( 4 μg· L- 1 ) ,证明 GRP为甘草的特异性成分 .用该法测定 GRP同 HPLC法测定甘草甜素在三种中成药中的含量相比呈现良好的相关性 .该法简便精确快速并可同时进行大样本分析 ,为中成药中甘草成份的分析提供一种新方法 .
- 白钢杨文博曹学琳杨先芹孙丹藤原邦雄北川常广
- 关键词：中成药免疫学检测方法ELISA免疫印迹法甘草甜素
- 化学物质对卤虫产卵量和产仔数的影响
- 本文研究了碳酸铵、氯化铵、尿素、氨水和柠檬酸铁对中华卤虫(Artemiasinica)产卵总数和产仔总数的影响.结果表明,氯化铵、尿素和柠檬酸铁对中华卤虫产仔总数没有显著影响,而碳酸铵和氨水对中华卤虫产仔总数具有极显著影...
- 刘凤岐许国顺纪炳纯孙丹刘安西
- 关键词：卤虫产卵量产仔数化学物质
- 文献传递
- 酶法生产L-半胱氨酸培养基的响应面分析优化被引量：23
- 2004年
- 利用 SAS软件的 Plackett-Burman设计法对微生物酶法生产 L-半胱氨酸的培养基组成进行筛选 ,筛选出 4个影响较大的重要因素 ,即葡萄糖、玉米浆、尿素、DL-2 -氨基 -Δ2 -噻唑啉 -4-羧酸 ( DL-2 -mino-Δ2 -Thiazo-line-4-Carboxylic Acid,缩写为 DL-ATC) ,并且用 SAS软件二次响应面分析法进行回归分析 ,得到了各因素的最佳水平值 ,经五批培养验证 ,预测值与验证试验平均值接近 .5 L发酵罐培养试验表明 ,在优化条件细胞酶活力提高 2 5 .4% .
- 刘忠杨文博孙丹白钢金永杰
- 关键词：L-半胱氨酸酶法转化
- 不同尾矿含量盆栽小麦生长结实和重金属富集状况被引量：4
- 2007年
- 采用盆栽试验方法,研究了不同尾矿含量对小麦生产结实及重金属富集的影响。结果表明,当尾矿含量达到30%～45%时,小麦的营养生长(根、茎、叶)和生殖生长(穗长、盆组产量、单株产量、百粒重)都显著降低;小麦根系、茎杆和种子中Ni和Co的含量都随土壤中Ni和Co含量增大而增大,而Cu的富集有选择性,当尾矿Cu含量达到30%以后小麦器官中Cu的含量不再增加;无论是Ni和Co还是Cu含量,总的分布趋势是小麦根部累积量最大,其次是茎叶部,种子中含量最少。进一步分析表明,当土壤中尾矿含量达到30%～45%后,小麦种子中Ni、Co、Cu含量就严重超过食用标准,因此,受尾矿污染的农地不应采用农作复垦。
- 孙丹丛培芳丛自立
- 关键词：小麦尾矿重金属营养生长生殖生长
- 松材线虫鉴定方法的研究与比较被引量：5
- 2008年
- 通过形态学观察,同工酶分析,ITS-RFLP以及RAPD分析等方法分别对来自于不同国家和地区的40个线虫群体进行鉴定,并对四种分析方法进行比较.形态学观察可以初步区分松材线虫和拟松材线虫;通过谷草转氨酶的同工酶分析,可以准确地区分上述两种线虫;基于分子生物学的ITS-RFLP分析除了可以准确地鉴定两种线虫外,还可以对拟松材线虫的地域特征作出判断,划分为亚洲型和欧洲型;而RAPD分析不仅能准确地鉴定两种线虫,还可以描述各种松材线虫和拟松材线虫种内以及种间的遗传进化关系.
- 张奇孙丹张楚菁李海燕马洪周熊惠龙王金成马以贵杨文博白钢
- 关键词：松材线虫同工酶分析RAPD分析
- 地衣芽孢杆菌NK-27菌株β-甘露糖苷酶的产酶条件及粗酶性质被引量：28
- 2002年
- 地衣芽孢杆菌 NK-2 7菌株可以产生胞外β-甘露聚糖酶和胞内β-甘露糖苷酶 .β-甘露糖苷酶活力主要集中于细胞匀浆液中 .以 2 .0 %魔芋粉、1 .0 % ( NH4) 2 SO4为碳、氮源地衣芽孢杆菌 NK-2 7菌株经 30℃振荡培养 2 0～2 4 h产生 β-甘露糖苷酶酶活力最高 .该酶于 30～ 4 0℃、p H6 .0时酶活力最高 ,在 30～ 4 0℃、p H5 .4～ 7.
- 杨先芹孙丹杨文博白钢
- 百日咳毒素对抗性及敏感棉铃虫神经细胞L型钙通道的调制作用
- 2006年
- 通过催化抑制性G蛋白α亚基(Gαi／o)的ADP核糖基化,百日咳毒素(PTX)使Gαi／o不能活化,继而抑制Gαi／o-腺苷酸环化酶(AC)-cAMP-蛋白激酶A(PKA)-L型电压门控钙(Ca(L)2+)通道．Ca(L)2+通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标．本实验观察了PTX对三氟氯氰菊酯(Cy)抗性及敏感棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道的影响, 以期从Ca(L)2+通道动力学的角度探讨棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机制．急性分离并经12-16 h无菌培养3-4龄棉铃虫神经细胞．实验分4组:①Cy敏感组(Cy-S组);②Cy抗性组(Cy-R组);③Cy-S-PTX组; ④Cy-R-PTX组．400 ng／mL PTX加入培养基中．采用全细胞膜片钳技术记录各组,ICa(L)．结果显示:(1)各组 Ca(L)2+通道的激活电压均是-35--30 mV,最大激活电压是0 mV,但Cy-S-PTX组的最大激活电压是 -10 mV;(2)分别与Cy-S组和Cy-R-PTX组峰值电流密度相比,Cy-S-PTX组峰值电流密度分别增高52．06 ％和44．81％(P<0．01),提示Cy-S-PTX组Ca(L)2+通道电导可能增大．Cy-S组和Cy-R组间的峰值电流密度无统计学差异;(3)与Cy-S组相比,Cy-S-PTX组神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压向超极化方向移动5．1 mV (P<0．05),半数失活电压向超极化方向移动5．93 mV(P<0．05),提示PTX使敏感组神经细胞的Ca(L)2+通道更容易激活和失活;(4)与Cy-R组相比,Cy-R-PTX神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压几乎未变,半数失活电压向去极化方向移动2．42 mV(P>0．05),提示PTX对抗性组神经细胞的影响不明显;(5)Cy-R组与Cy-S组神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压和半数失活电压无显著性差异．结果提示:(1)棉铃虫神经细胞存在(Gαi／o)-AC- cAMP-PKA-Ca(L)2+通道信号传导途径;(2)PTX敏感的抑制性Gi／o蛋白的基础活性对棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道有影响;(3)PTX对敏感虫神经细胞的Ca(L)2+通道的影响较对抗性棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道的影响明显,提示抗性棉铃虫对拟除虫菊酯类�
- 赵强王勇孙丹刘燕强范贤林贺秉军刘安西
- 关键词：百日咳毒素L型钙通道全细胞膜片钳技术
- 假单胞菌TS-1138 L-半胱氨酸脱巯基酶的纯化和性质研究被引量：5
- 2004年
- 假单胞菌TS-1138L-半胱氨酸脱巯基酶经DEAECellulose-52阶段洗脱、SephadexG-100柱层析被纯化了80.3倍,SDS-PAGE鉴定为单一条带,该酶的相对分子质量为53.0kDa;酶反应的最适pH为7.5,最适反应温度为35℃,该酶的米氏常数为2.37μmol/L,最大反应速度为0.11μmol/mL·min·Pb2+对该酶有很强的激活作用,Zn2+对该酶有较强的抑制作用,羟胺为该酶特异性的抑制剂.
- 金永杰杨文博刘忠白钢孙丹
- 关键词：L-半胱氨酸脱巯基酶假单胞菌酶纯化酶性质
- 假单胞菌TS1138 L-半胱氨酸脱巯基酶基因的克隆与表达被引量：2
- 2006年
- 提取假单胞菌TS1138染色体基因,以自行设计的引物通过PCR方法扩增得到L-半胱氨酸脱巯基酶基因(cds),将其克隆至克隆载体pBluescript SKⅡ,并转化入大肠杆菌DH5α,测定了含有脱巯基酶基因(cds)的1．2 kb DNA片段的序列；同时,将其克隆至表达载体pETH,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,重组蛋白量占菌体总蛋白的36．8%,经Ni-NTA柱亲合层析后,重组蛋白纯化率达88%以上．用非变性PAGE方法对基因表达的脱巯基酶进行了鉴定．
- 白钢李洋余养盛杨文博游松刘忠孙丹
- 关键词：L-半胱氨酸脱巯基酶假单胞菌基因克隆
