夏龙飞
- 作品数：31 被引量：107H指数：6
- 供职机构：河北医科大学第四医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金中国学位与研究生教育学会研究课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Toll样受体4增强β2糖蛋白1免疫小鼠B细胞的活化被引量：1
- 2015年
- 目的探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白Ⅰ(β2GP1)免疫的小鼠中,对B细胞活化过程的影响。方法将C3H/HeN(TLR4正常型)和C3H/HeJ(TLR4缺陷型)2种小鼠随机分为β2GP1免疫组和生理盐水对照组,分别注射β2GP1或等量的生理盐水进行免疫。采用皮下多点注射进行初次免疫,2次腹腔注射加强免疫,最后冲击免疫的方法免疫小鼠。采用间接ELISA检测小鼠血清中抗β2GP1抗体的效价;HE染色观察小鼠脾脏生发中心数量及大小的变化;免疫组织化学法观察脾脏生发中心内的CD40配体(CD40L)表达;流式细胞术检测小鼠脾脏B淋巴细胞中共刺激分子CD80和CD86的水平变化。结果经β2GP1免疫后,2种小鼠血清中均出现高效价的抗β2GP1抗体,且C3H/HeN血清效价高于C3H/HeJ小鼠。与生理盐水对照组相比,2种小鼠经β2GP1刺激后,CD40L、CD19+CD80+细胞和CD19+CD86+细胞的数量均显著增加;但C3H/He J小鼠CD40L,CD19+CD80+细胞和CD19+CD86+细胞的数量低于C3H/He N小鼠。经β2GP1刺激的小鼠脾脏生发中心,比生理盐水组更大更多,C3H/HeN小鼠的生发中心的数量多于C3H/HeJ小鼠。结论 TLR4增强β2GP1免疫小鼠B细胞的活化。
- 成思周红解鸿翔孔祥民谢娅超何超于尹婧夏龙飞
- 关键词：抗磷脂综合征B细胞生发中心TOLL样受体4
- 阻断TLR2结合降低β2GP1-抗β2GP1复合物刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的表达被引量：1
- 2016年
- 目的探讨β2糖蛋白1(β2GP1)-抗β2GP1复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)中Toll样受体2(TLR2)的作用。方法用β2GP1-抗β2GP1复合物、TLR2激动剂Pam3CSK4及TLR4激动剂脂多糖(LPS)、TLR2阻断剂抗小鼠TLR2-Ig G(m TLR2-Ig G)及TLR4阻断剂TAK-242对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞进行体外处理。用实时荧光定量PCR检测TNF-αmRNA水平,Western blot法及免疫荧光细胞化学方法检测TNF-α蛋白表达;采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2的水平。结果β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3CSK4及LPS均能够显著增加BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-αmRNA及蛋白水平,抗m TLR2-Ig G能够抑制上述刺激物促进细胞TNF-α表达的效应,但弱于TAK-242的抑制效应,抗m TLR2-Ig G与TAK-242联合使用未显示更强的抑制效应。流式细胞术结果显示,β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3CSK4及LPS均能增加小鼠腹腔巨噬细胞TLR2的表达,而抗m TLR2-Ig G、TAK-242以及二者联合使用均未显示对TLR2表达的抑制效应。结论TLR4、TLR2都增强β2GP1-抗β2GP1复合物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的刺激作用。
- 于尹婧周红夏龙飞孔祥民谢娅超解鸿翔何超成思
- 关键词：抗磷脂综合征TOLL样受体2小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子Α
- 螺旋CT对急性胃肠道穿孔的早期诊断价值被引量：10
- 2011年
- 胃肠道穿孔是临床常见的急腹症之一,既往多依赖腹部X线平片检查,但仍有部分患者平片未能显示膈下游离气体,尤其是在穿孔早期更是无法诊断。
- 陶云年张文奇王善军方金忠夏龙飞
- 关键词：胃肠道穿孔
- 手部高压油漆注射伤8例治疗体会被引量：1
- 2009年
- 随着舟山市船舶修造业的蓬勃发展，高压油漆喷射作业正被广泛应用，而由油漆高压喷射不慎引起的手部损伤也日渐增多。由于其皮肤伤口小，早期损伤轻．常被外科医生们忽视。若处理不当。容易预留不同程度的手部畸形及功能障碍。2005—2008年我院外科共收治8例手部高压油漆注射伤患者，现将诊治情况报告如下。
- 夏龙飞刘玉君齐志伟舒科平
- 关键词：手部损伤注射外科医生皮肤伤口
- Toll样受体4在抗β_2GPⅠ抗体诱导小鼠血管表达黏附分子及组织因子中的作用被引量：2
- 2015年
- 目的探讨Toll样受体4(TLR4)在抗β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)抗体诱导小鼠动脉血管黏附分子及组织因子(TF)表达中的作用。方法腹腔注射抗β2GPⅠ抗体,分别刺激C3H/He N(TLR4正常)与C3H/He J(TLR4点突变)小鼠72 h,用免疫组织化学法观察血管内膜组织中细胞黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及E-选择素的蛋白质表达水平,用实时荧光定量PCR和western blot方法分别检测血管组织匀浆中ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平,用实时荧光定量PCR和TF活性检测试剂盒分别检测血管组织匀浆中TF mRNA表达水平及其活性。结果免疫组化结果示抗β2GPⅠ抗体刺激后的C3H/He N小鼠血管内膜中ICAM-1、VCAM-1及E-selectin蛋白均表达增强。与生理盐水对照组相比,C3H/He N小鼠和C3H/He J小鼠经抗β2GPⅠ抗体刺激后,其血管组织匀浆中ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平均显著增加(P均<0.05);但C3H/He J小鼠的ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平均明显低于C3H/He N小鼠(P均<0.05)。经抗β2GPⅠ抗体刺激的C3H/He J小鼠血管匀浆中TF mRNA表达及生物学活性明显低于C3H/He N小鼠(P<0.05)。结论 TLR4与抗β2GPⅠ抗体刺激上调小鼠动脉血管组织表达活性分子ICAM-1、VCAM-1、E-选择素及TF密切相关,其分子机制及其在抗磷脂综合征(APS)血栓形成中的病理机制有待深入研究。
- 谢娅超周红解鸿翔孔祥民何超成思于尹婧夏龙飞
- 关键词：抗磷脂综合征TOLL样受体4黏附分子
- 稽留流产患者抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白I抗体的检测及临床意义被引量：5
- 2016年
- 目的探讨抗心磷脂抗体（aCL）和抗β2糖蛋白I抗体（anti-β2GPI）与稽留流产之间的关系。方法选取14例稽留流产患者为试验组，20例自愿终止妊娠的正常早孕患者为对照组，采用化学发光免疫分析法（CLIA）定量检测两组患者血清IgG／IgM抗心磷脂抗体和IgG／IgM抗β2糖蛋白I抗体水平。结果试验组血清IgMaCL中位水平及血清IgManti-β2GPI中位水平与对照组比较差异均有统计学意义[IgMaCL中位水平：21．3（2．2～39．4）KU／L与6．0（1．5～10．7）KU／L，IgManti-β2GPI中位水平：11．9（1．2～25．4）KU／L与1．9（1．1—4．0）KU／L；U值分别为2．031、2．912，P均〈0．05]。两组血清IgGaCL水平及血清IgGanti-β2GPI水平比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论IgM抗心磷脂抗体和IgM抗β2糖蛋白I抗体与稽留流产有相关性，提示育龄期妇女，早期和动态检测抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白I抗体对降低稽留流产的发生率有一定临床意义。
- 陈芳方杰王婷夏龙飞马小艳施卫东眭建
- 关键词：稽留流产抗心磷脂抗体抗Β2糖蛋白I抗体
- β_2糖蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备与鉴定被引量：5
- 2013年
- 目的:制备β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)单克隆抗体(MAbs),并鉴定抗体的特性。方法:以纯化的人血浆β2GPⅠ免疫BALB/c小鼠,采用PEG融合技术,间接ELISA法和有限稀释法,制备和筛选杂交瘤细胞。杂交瘤细胞继续扩大培养后注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,经硫酸铵沉淀及Protein G纯化MAbs。秋水仙素阻抑法鉴定杂交瘤细胞株染色体数目,ELISA测定滴度,Ig亚类试剂盒鉴定Ig亚类,Western blot鉴定特异性。结果:获得1株稳定分泌MAbs的杂交瘤细胞株β2,该杂交瘤细胞株的染色体数为99～108。进一步研究发现,其培养液和腹水滴度为1∶29和1∶215,其MAbs分类为IgG1/κ,Western blot显示纯化的MAbs及标准anti-β2GPⅠ与β2GPⅠ均有反应条带,具有较好的特异性。结论:成功获得并纯化β2GPⅠ单克隆抗体,为进一步研究β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ复合物在抗磷脂综合征中的作用奠定了基础。
- 胥亚许国莹周红解鸿翔夏龙飞刘敬敬张晓蕾
- 关键词：杂交瘤细胞株单克隆抗体抗磷脂综合征
- β_2GPI/抗β_2GPI抗体复合物激活THP-1细胞内TRIF途径被引量：5
- 2011年
- 目的:观察β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能否激活单核细胞株THP-1的TRIF途径,以探讨TRIF依赖途径在抗磷脂综合征(APS)发病机制中的作用。方法:采用一定剂量β2GPI/抗β2GPI抗体复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞TRIF mRNA水平,Western blot检测细胞TRIF蛋白表达情况;进一步观察TLR4途径抑制剂-TAK-242是否干预β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对TRIF的诱导表达以及相关细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α的表达。结果:β2GPI/抗β2GPI抗体复合物(100 mg/L)能够诱导THP-1细胞表达TRIF(mRNA及蛋白),并显示时间效应,分别于刺激1 h和2 h时TRIF mRNA及蛋白表达至高峰。TAK-242(5μmol/L)能够明显抑制β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对THP-1细胞TRIF的诱导表达,同时抑制IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子的表达。结论:TRIF依赖的TLR4途径参与了β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对THP-1细胞的激活,提示其在抗磷脂综合征的病理机制中发挥一定作用。
- 解鸿翔周红王海波陈东东王婷张先梅夏龙飞穆原
- 关键词：抗磷脂综合征TRIF炎症因子
- 抗β2GPI抗体促进载脂蛋白E缺陷小鼠血管炎症及血栓相关分子的表达被引量：10
- 2017年
- 目的探讨抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体在载脂蛋白E缺陷(ApoE^(-/-))小鼠表达动脉粥样硬化相关炎症因子和血栓相关分子过程中的作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠实施颈动脉套环手术后,随机分为生理盐水组、100μg抗β2GPI抗体组、100μg同源对照抗体(兔IgG)组以及100μgβ2GPI/抗β2GPI抗体复合物组。各组均给以高脂饮食,且每7 d腹腔注射1次相应刺激剂,6周后处死小鼠。采用HE染色观察套环侧颈动脉阻塞情况,并以免疫组织化学染色检测套环侧颈动脉TLR4、组织因子(TF)和冯·维勒布兰德因子(vWF)的表达。采用实时荧光定量PCR检测主动脉的白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平。结果 HE染色结果显示抗体组阻塞最为明显,免疫组织化学染色结果显示抗体组套环侧颈动脉TLR4、TF和vWF表达上调,抗体组主动脉IL-1β和TNF-α的mRNA水平明显高于其他3组。结论抗β2GPI抗体通过上调小鼠动脉血管表达炎症因子IL-1β和TNF-α,血栓相关分子TF和vWF以及TLR4的表达,促进动脉粥样斑块形成。
- 朱晓洁周红王晓燕蔡谦谦何超夏龙飞张贵婷欧阳航
- 关键词：动脉粥样硬化炎症
- EGCG干预抗β_2GPI/β_2GPI复合物对THP-1细胞的诱导活化作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检测细胞组织因子(TF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达;发色底物法检测TF活性;ELISA测定TNF-α蛋白的表达。结果 50 mg/L EGCG能抑制抗β2GPI/β2GPI复合物刺激的THP-1细胞TF mRNA和活性的表达(t值为6.97、3.89,P均<0.05),同时下调该复合物诱导的THP-1细胞TNF-αmRNA和蛋白质的表达水平(t值为3.23、4.65,P均<0.05)。结论 EGCG可干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞TF及TNF-α的表达,抑制THP-1细胞活化。
- 王婷周红解鸿翔夏龙飞穆原
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯肿瘤坏死因子-Α
