夏钢
- 作品数：5 被引量：9H指数：1
- 供职机构：华东师范大学科学与技术跨学科高等研究院更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 鸦胆子化学成分及肿瘤细胞毒活性研究(英文)被引量：9
- 2013年
- 从鸦胆子(Brucea javanica)种子的甲醇提取物中分离和鉴别得到11个化合物,经波谱数据分析分别鉴定为鸦胆子内酯A(1),鸦胆子素D(2),鸦胆子苷A(3),C(4),F(5),G(6),L(7),3β-羟基-孕甾-5-烯-20-酮(8),3β-羟基-5α-孕甾-20-酮(9),3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(20R)-孕甾-5-烯-3β,20-二醇(10)和6,22-二烯-3β-羟基5,8-过氧麦角甾(11)。其中化合物8、9和11为首次从该植物中分离得到。鸦胆子内酯A(1)和鸦胆子素D(2)对人类癌细胞株BGC-823,Huh-7,KE-97和Jurkat具有很好的细胞毒作用。
- 王立军黄娴祝静静熊娟赵芸夏钢胡金锋
- 关键词：鸦胆子苦木科种子细胞毒活性
- 建立利用萤光素酶快速检测细胞活性的方法
- 2012年
- 运用PCR的方法,从萤火虫萤光素酶基因载体pGL4.26扩增萤火虫萤光素酶基因片段,将其插入连接于原核表达载体pET24a中,构建重组表达载体pET24a-Luc.经酶切鉴定及序列分析后,将重组载体转化到表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性重组菌BL21/pET24a-Luc.IPTG诱导蛋白高效表达并通过镍柱亲和层析纯化萤火虫萤光素酶.该目的蛋白活性用Bright-Glo^(TM)试剂进行验证并用于建立一种基于测量ATP含量的检测细胞生物活性的方法.与传统的细胞生物活性检测试剂盒MTT,CCK-8以及Alamar Blue比较,该方法具有反应迅速、活力高、灵敏度好、生产方便的优点,具有实际应用的潜力.
- 祝静静鲍秋颖王宇萌夏钢
- 关键词：蛋白表达蛋白纯化细胞活性
- 通过siRNA文库筛选发现与人胃癌细胞生长有重大关系的基因
- 胃癌作为一种较常见的恶性肿瘤,严重危害人类健康.相较传统的手术治疗及放化疗,基因治疗可能产生更好的治疗效果.实际上,也已经有一些胃癌相关基因被报道.而本研究的目的在于找寻其他对胃癌治疗有意义的基因.由于蛋白激酶在细胞生物...
- 黄娴曹磊夏钢
- 关键词：胃癌细胞生物学活性蛋白激酶基因
- 文献传递
- 脆蛇转录组序列的分析和系统发育定位(英文)
- 2014年
- 脆蛇是一种类似于蛇但是又具有蜥蜴的特征的爬行动物,这些矛盾的特性与脆蛇的系统发育分类学有密切的关系.脆蛇在传统中药中也有很多治疗作用.基于这些方面,本研究利用高通量测序方法对脆蛇胃肠道的转录组序列进行检测,组装和注释.最终获得4.6 Gbp高质量的数据,组装获得58 959个单一的基因,其中35 708(60.56%)个单一基因与数据库的基因相匹配.为了确定脆蛇与蛇和蜥蜴的同源进化关系,对同源基因家族和系统进化树进行了分析,结果显示脆蛇的转录组序列更接近于蛇而不是蜥蜴.除此之外还鉴定了10 613 cSSR标签,其中1 644个标签根据严格的标准能够用至少一个引物获得.本研究第一次揭示了脆蛇胃肠道的转录组序列,确定其在系统发育学上的定位.这些序列和标签为脆蛇的研究提供了重要的资源.
- 祝静静黎万顺高虹徐通鲍秋颖郑永祥周德敏夏钢
- 关键词：系统发育转录组
- α-N-乙酰半乳糖胺酶的表达及活性检测
- 2012年
- 为了建立新型α-N-乙酰半乳糖胺酶的筛选、检测方法,实验中提取脑膜金黄杆菌的基因组DNA,以此为模板PCR扩增出α-N-乙酰半乳糖胺酶(A4).将A4克隆至pET-24a载体,转化Bl21表达菌株进行蛋白表达.使用亲和层析方法纯化His-A4酶,选择显色底物验证酶活性.同时,改进了传统的ELISA方法,直接将红细胞膜包被于ELISA检测平板中,以红细胞膜表面抗原作为直接底物,用ELISA方法检测酶活性.此研究建立了新型ELISA实验方法,以此方法验证了A4酶的活性,证明了此酶能够有效降低红细胞表面抗原抗体反应,且具有浓度和时间依赖性.
- 林毅刚夏钢
- 关键词：重组蛋白蛋白纯化ELISA方法
