夏娟
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
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- 胞质和核定位α-突触核蛋白过表达对人神经母细胞瘤细胞的影响被引量：3
- 2013年
- 探讨α-突触核蛋白在人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中定位过表达的影响.研究应用PLVU-SNCA-NES(NLS)-2A-EGFP重组慢病毒载体感染SH-SY5Y细胞,通过观察绿色荧光蛋白(EG-FP)检测目的基因在细胞中的表达情况.形态观察与MTT检测相结合,分析胞质和核定位α-突触核蛋白过表达对SH-SY5Y细胞增殖的影响,同时测定鱼藤酮、H2O2对胞质和核定位α-突触核蛋白过表达SH-SY5Y细胞活性的影响.MitoTracker染色法测定胞质和核定位α-突触核蛋白过表达的SH-SY5Y细胞中线粒体数目的变化.结果发现,α-突触核蛋白胞质定位过表达使得SH-SY5Y细胞培养96h时活性显著增强,24h、48h、96h时细胞中线粒体的数目显著增加,增长比率分别为91.18%、41.15%、50.21%;α-突触核蛋白核定位过表达的SH-SY5Y细胞相对正常细胞表现出较低的细胞活性,在培养48h、72h后细胞存活率显著下降.400nmol/L鱼藤酮损伤24h后,α突触核蛋白核定位过表达的SH-SY5Y细胞活性显著高于正常细胞鱼藤酮损伤组.50～800μmol/LH2O2处理条件下,α-突触核蛋白的定位过表达对SH-SY5Y细胞活性的影响并不显著.研究结果表明α-突触核蛋白胞质定位过表达表现出一定的神经保护作用,α-突触核蛋白核定位过表达也能使SH-SY5Y细胞的活性发生改变.
- 夏娟高静熊御云邱晶马瑞钱进军
- 关键词：Α-突触核蛋白核定位
- PCR方法扩增神经生长因子β亚基基因的条件优化被引量：1
- 2009年
- 研究了不同退火温度、dNTP浓度、Mg2+浓度下用PCR方法扩增小鼠神经生长因子β亚基(β-NGF)基因的效率。并将扩增所得β-NGF基因克隆到pUCAT4载体中,对得到的阳性克隆进行了测序证实,为下一步利用该基因表达重组β-NGF创造了前提条件。
- 闻崇炜李倩庄强夏娟文毅
- 关键词：神经生长因子PCR
- 丙戊酸钠对抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤的线粒体机制被引量：1
- 2012年
- 研究丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对抗鱼藤酮(Rotenone)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的作用及线粒体机制。以1,10μmol/L VPA预处理SH-SY5Y细胞3 h,再加入400 nmol/L Rotenone作用24 h。MTT法检测与相差显微镜观察相结合,分析VPA对抗Rotenone损伤的作用;JC-1染色法与Mito-Tracker染色法分析线粒体膜电位及线粒体数量的变化;Clark氧电极法检测细胞呼吸功能;DCFH-DA探针法检测细胞中ROS的含量;并在离体线粒体上观察VPA对Ca2+诱导的线粒体肿胀的影响。结果发现,1,10μmol/L VPA预处理SH-SY5Y细胞3 h可对抗400 nmol/L Rotenone引起的细胞损伤,并且可以提高损伤细胞中线粒体的膜电位,增加线粒体的数量,此外,还可以增强损伤细胞的呼吸功能,降低细胞中ROS的含量,但VPA并不能直接作用于离体的线粒体发挥神经保护作用。由此,VPA具有良好的神经保护作用,其机制与增强线粒体功能和数量、从而改善细胞功能有关,这为其应用于帕金森病的预防与治疗提供了实验依据。
- 邱晶高静熊御云夏娟马瑞钱进军
- 关键词：鱼藤酮丙戊酸钠线粒体帕金森病
- 胞质和核定位α-突触核蛋白过表达对人神经母细胞瘤细胞的影响
- 探讨α-突触核蛋白在人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中定位过表达的影响.研究应用PLVU-SNCA-NES(NLS)-2A-EGFP重组慢病毒载体感染SH-SY5Y细胞,通过观察绿色荧光蛋白(EGFP)检测目的基因在...
- 夏娟高静熊御云邱晶马瑞钱进军
- 关键词：人神经母细胞瘤Α-突触核蛋白
- 文献传递
- 靛玉红吲哚-3-取代物对肝癌HepG2细胞生物学行为的影响及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的:研究新合成的靛玉红衍生物吲哚-3-取代物A的体外抗肿瘤作用及可能机制。方法:以不同浓度的吲哚-3-取代物A作用于HepG2细胞,MTT法检测细胞活力;观察HepG2细胞的集落形成;DAPI染色观察细胞核的变化;Annexin-V/PI双染检测细胞凋亡率;分别采用JC-1和Fluo-3/AM染色检测HepG2细胞线粒体膜电位和胞内Ca2+含量;蛋白质印迹检测Bcl-2、Bax的表达和Caspase-3、9的活化。结果:吲哚-3-取代物A对HepG2细胞的抑制作用呈时间浓度依赖性,且可抑制HepG2细胞克隆集落的形成。吲哚-3-取代物A作用于HepG2细胞后,细胞表现出明显的核固缩、碎裂等凋亡特征,Annexin-V/PI双染结果显示HepG2细胞出现明显的凋亡,细胞凋亡相关的Caspase-3、9活化也明显增加。同时,吲哚-3-取代物A处理可降低Bcl-2的蛋白表达水平,提高Bax的蛋白表达水平,呈浓度依赖性。此外,吲哚-3-取代物A能降低线粒体膜电位并诱发细胞内钙离子超载。结论:吲哚-3-取代物A能够诱导HepG2细胞出现明显的细胞凋亡,其机制可能与损伤线粒体,活化线粒体介导的细胞凋亡通路密切相关。
- 谈德斐郭文洁夏娟管廷尉高静姚其正
- 关键词：线粒体
