周秀红
- 作品数：30 被引量：93H指数：7
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省优秀青年科技基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 禽防御素在雏鸡抗鸡白痢沙门菌感染中的表达及其分子设计被引量：2
- 2014年
- 为了探寻有效防治雏鸡感染鸡白痢沙门菌的新型防御素生物制剂,建立雏鸡感染鸡白痢沙门菌（S.Pullorum）的模型,感染3～24 h后检测十二指肠组织禽防御素（AvBDs）抗感染的防御性表达水平,分析AvBDs的理论等电点,选择活性强且结构稳定的AvBD,对其进行分子设计,以期构建出理论生物活性更强且结构更稳定的改型防御素.结果表明,与对照组相比,雏鸡感染鸡白痢沙门菌3～24 h后十二指肠AvBD-6的表达水平明显上升,差异显著（P＜0.05）,结合理论等电点分析,选择AvBD-6做设计出发肽,用天冬氨酸替换AvBD-6原有的中性氨基酸,并在C端增加抗菌肽BF2衍生物的α螺旋,成功构建了改型防御素AvBD6-BF2,其理论生物活性与结构稳定性均强于AvBD6出发肽.本研究将为AvBDs生物制剂用于防治鸡白痢沙门菌病的可行性提供参考.
- 涂健王斌祁克宗温俊柳周秀红汪雪雁刘红梅
- 关键词：雏鸡分子设计
- 禽源大肠杆菌耶尔森氏菌强毒力岛核心基因的检测及其irp2和int基因同源性被引量：7
- 2013年
- 【目的】为了提高禽源大肠杆菌中耶尔森氏菌强毒力岛(HPI)的检测效率,了解高分子量铁调节蛋白2基因(irp2)和整合酶基因(int)在不同株禽源HPI+大肠杆菌间的同源性,进一步揭示禽源大肠杆菌HPI的转移规律。【方法】利用L16(44)正交试验设计,建立针对HPI核心基因irp2和fyuA的双重PCR,运用双重PCR方法检测禽源大肠杆菌临床分离株,并对检出的7株HPI阳性(HPI+)大肠杆菌进行irp2和int基因测序及同源性分析,同时结合这7株大肠杆菌的ERIC-PCR分析结果,对比分析int基因的分布特点。【结果】结果显示,新建立的双重PCR能特异性扩增出HPI核心基因;ERIC-PCR分析显示,HPI+大肠杆菌间差异均大于5%;HPI+大肠杆菌irp2基因高度保守(同源性大于99%),而int基因虽然都位于asn-tRNA位点,但基因序列在部分菌株间存在较大差异。【结论】建立了一种可以用于HPI的流行病学调查和实验室诊断的双重PCR方法,并推测区域外同源重组可能是HPI基因在大肠杆菌间水平转移的主要方式。
- 冀辉邵长胜涂健黄博言邵颖周秀红汪雪雁祁克宗
- 关键词：禽源大肠杆菌整合酶基因同源性分析
- phoP/Q双组分系统对禽致病性大肠杆菌的毒力调控作用被引量：5
- 2016年
- phoP/Q作为一种外在环境感受器,参与调节细菌对外部环境的适应性。本研究拟探讨phoP/Q双组分系统对禽致病性大肠杆菌(APEC)的生长、定植、毒力等生物学特性的影响。利用Red重组系统构建APEC AE 17株的phoP/Q双组分调控系统缺失株,并构建phoP/Q双组分调控系统回复质粒,转化缺失株,构建回复株。通过生长运动性试验、黏附入侵CEF细胞试验、毒力基因转录水平检测以及半数致死量(LD50)等试验比较野生株、缺失株、回复株的生物特性。与野生株相比,phoP-phoQ缺失不改变其生长特性;运动性较野生株下降63%;黏附与入侵CEF细胞能力分别降低69.83%(P<0.01)和62.17%(P<0.05);LD50显示毒力减弱13.3倍;polA、tsh基因转录水平分别上调41%、54%;sodA、iss分别下调64%和98%。phoP/Q双组分系统参与对APEC致病性的调控,该系统的缺失会降低APEC的致病性。
- 李春晓张宇曦祁克宗韩先干涂健薛挺周秀红
- 关键词：禽致病性大肠杆菌荧光定量PCR
- 现代生物实验技术综合性实验教学改革探索与实践被引量：9
- 2011年
- 在现代生物实验技术课程基础上，开设综合性实验，进行综合性实验教学改革探索与实践。通过对现代生物实验技术综合性教学内容、教学方法的改革实践，探索综合性、开放式、研究性实验教学的新模式，将理论、实验教学与科学研究结合起来，培养学生的动手能力、分析和解决问题的能力，提高教学效果。
- 薛秀恒王菊花祁克宗汪雪雁周秀红梅林
- 关键词：综合性实验教学教学改革
- 鸡β-防御素9酵母工程菌制备及其表达方法
- 本发明公开了鸡β-防御素9酵母工程菌制备及表达方法，属于生物技术及基因工程制药技术领域。首先利用毕赤酵母惯用密码子优化鸡β-防御素9基因，在其前端添加Kex2酶切位点编码序列并人工合成该基因，然后将合成的β-防御素9基因...
- 祁克宗涂健张永正彭开松周秀红汪雪雁刘红梅张明陈玎玎付瑞燕薛秀恒
- 文献传递
- 禽致病性大肠杆菌PhoP蛋白调控宿主菌DNA检测方法的建立与应用
- 2015年
- [目的]建立检测禽致病性大肠杆菌phoP蛋白调控宿主菌DNA的方法,为进一步研究phoP蛋白的调控因子奠定基础。[方法]将pho P基因克隆至p MD19-T载体,序列鉴定正确后转至表达载体pET32a,将重组质粒pET32a-phoP导入感受态细菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白的大小,用Ni-NTA亲和层析柱纯化重组phoP蛋白。通过生物信息学分析法对phoP蛋白与DNA的结合基序进行预测,利用凝胶迁移试验(EMSA)鉴定该蛋白的结合活性。[结果]酶切及测序结果表明原核表达质粒构建正确;SDS-PAGE结果表明目的基因得到表达;重组目的蛋白相对分子质量约为42.9×103;用Ni-NTA亲和层析柱成功纯化获得了纯度大于90%的目的蛋白;凝胶迁移试验结果表明phoP蛋白能够结合血清毒力基因iss和溶血基因hly F启动子区。[结论]禽致病性大肠杆菌phoP重组蛋白成功表达且有结合iss和hly F基因启动子区的功能活性,说明phoP蛋白能够调控iss和hly F的表达。
- 王曼祁克宗涂健周秀红刘红梅王惠珂尹磊
- 关键词：禽致病性大肠杆菌
- 2株鹅细小病毒全基因组特征分析被引量：8
- 2013年
- 为明确中国安徽省鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)Y株(番鸭源)和E株(鹅源)的全基因组信息,并进而为研究安徽省GPV的遗传演化、抗原性差异和致病性等提供参考依据。笔者应用PCR方法获得GPV Y株和E株的全基因组核苷酸序列,并与GenBank收录的全部GPV与番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MD-PV)FM株进行核苷酸比较。结果表明2株GPV的全基因组核苷酸序列均与中国台湾82-0321株和06-0329株的相似性最高,Y株全基因组为5 106bp,E株为5 125bp,E株与Y株相比稍有不同,即在ITR区缺失1个碱基,在VP3阅读框之后,Poly A信号之前的4646—4668nt处多出1段22bp的核苷酸;通过比较各国GPV的VP3基因,发现GPV主要分属欧洲株(Ⅰ亚群)和中国株(Ⅱ亚群),中国大陆大多数GPV株属于Ⅱb亚群,但Y株和E株属于中国台湾Ⅱa亚群,再次表明安徽E株和Y株与中国台湾各毒株较为接近;以标准强毒B株为参考,通过分析VP区糖基化位点的差异发现Y株和E株均缺失703—705NRT糖基化位点,推测结构蛋白糖基化位点的改变有可能影响病毒的毒力,甚至使病毒形成免疫逃逸。
- 王浩田先举张烁周秀红刘红梅潘玲祁克宗
- 关键词：鹅细小病毒全基因VP基因分子特征
- 杀菌性/通透性增加蛋白的生物学功能及其应用被引量：4
- 2005年
- 杀菌性/通透性增加(BPI)蛋白是哺乳动物中性粒细胞中存在的一种碱性蛋白,它能与革兰氏阴性菌脂多糖结合,增加外膜对抗菌药的通透性,具有中和内毒素和杀灭细菌的生物学作用,在革兰氏阴性菌感染的治疗方面有良好的发展前景。文章主要从分子生物学和病理学角度出发,对 BPI 蛋白的生物学杀菌活性和作用机理进行了综述,并展望了其应用前景。
- 程玉磊祁克宗潘玲周秀红
- 关键词：中性粒细胞内毒素禽类
- 鸡β-防御素2在大肠杆菌中的串联表达及抗菌活性分析被引量：4
- 2016年
- 利用基因串联技术表达鸡β-防御素2(AvBD2)重组蛋白,分析其生物结构活性以及蛋白表达量变化。构建了重组串联表达载体p ET-28a-AvBD2op-AvBD2,并将其转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达融合蛋白,经镍柱纯化后进行Western-blot检测、Tricine-SDS-PAGE分析和MALDI-TOF-MS质谱分析。结果显示,单表达工程菌和串联表达工程菌均在9500 u处有特异性条带;采用BCA法测得的单、串联表达工程菌纯化后的蛋白质量浓度分别为0.258和0.769 mg/m L;通过凝胶成像系统分析,单表达工程菌中目标蛋白的表达量约占上清总蛋白的10.3%,而串联表达的约占上清总蛋白的18.3%;MALDI-TOF-MS质谱分析结果表明,单、串联表达蛋白产物的分子质量分别为4 300、7 811 u;琼脂孔穴扩散抑菌法检测证明纯化蛋白对多种微生物具有不同的抗菌活性。
- 石水琴魏海婷祁克宗涂健吕小龙刘红梅薛挺周秀红
- 关键词：抑菌活性质谱分析
- 《动物病理学》精品课程建设的探索与实践被引量：2
- 2014年
- 为加深精品课程内涵的深刻认识,加强对精品课程的指导与建设,有效促进课程体系及教学内容、教学方法和教学手段的改革,以安徽农业大学《动物病理学》国家精品课程的建设为例,从提高教学团队素质、提升教学资源建设、推进课程教学改革等方面总结该门精品课程的建设经验和心得体会。
- 涂健祁克宗刘红梅彭开松张丽霞周秀红
- 关键词：精品课程教学团队教学资源课程改革
