周建平
- 作品数：43 被引量：89H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：军队“十一五”科技攻关课题国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 截短型人睫状神经营养因子活性片段及其融合蛋白
- 本发明涉及一种蛋白转导肽融合截短型人睫状神经营养因子活性片段的蛋白以及含有编码所述截短型活性片段的核苷酸序列的核酸分子。本发明涉及含有上述核酸分子的表达载体。本发明还涉及所述蛋白或核酸分子用于制备治疗神经退行性疾病(包括...
- 曲恒燕周建平李前孙曼霁
- 文献传递
- PTD-BDNF高表达及其活性研究
- 目的:探讨PTD-BDNF对原代培养海马神经元及Alzheimer病模型小鼠的作用。方法:根据大肠杆菌遗传特点选择大肠杆菌偏爱密码于优化PTD-BDNF的基因结构。同时预测mRNA翻译起始区二级结构,利用计算机对PTD-...
- 周建平袁京孙曼霁
- 文献传递
- 重组人PTD-BDNF的制备及纯化策略研究
- 随着重组蛋白质技术的进步,人们可以利用基因工程的方法表达自然界稀少的,难以用传统方法提取到的蛋白质药物。脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)是神经营养因子家族...
- 袁晶周建平田亚平
- 关键词：神经营养因子蛋白纯化
- 文献传递
- Cav2.2e37a基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的构建针对Cav2.2e37a基因的RNAi慢病毒载体,为抑制Cav2.2e37a基因表达治疗神经痛的实验研究打下基础。方法针对已经筛选确定的Cav2.2e37a基因RNAi有效靶序列,构建pLL3.7-Cav2.2e37a干扰质粒,测序鉴定。pRsv-REV,pMDlg-pRRE,pMD2G,pLL3.7-Cav2.2e37a共转染293T细胞,Real-time PCR测定病毒转导滴度。结果成功构建Cav2.2e37a shRNA的慢病毒载体LVshCav2.2e37a。浓缩病毒悬液的滴度为1×109Tu/ml。结论成功构建了Cav2.2e37a基因的RNAi慢病毒载体。
- 王维冯泽国陈娜马涛周建平
- 关键词：RNA干扰慢病毒属
- 重组人心肌肌钙蛋白I纯化方法的对比
- 2014年
- 目的对比两种重组人心肌肌钙蛋白I(rhcTnI)纯化方法,获取稳定的rhcTnI,促进心肌肌钙蛋白(cTnI)诊断标准化的研究。方法超声破碎工程菌获取rhcTnI包涵体,经2%Tritonx-100,2mol/L脲洗涤后溶解在8mol/L脲中,分别经CMFF柱上复性和稀释复性纯化rhcTnI,对比两种方法纯化rhcTnI的获得率及其产物在4、-20、-80℃及冻干条件下的稳定性,确立高效获取稳定的cTnI的纯化方法。结果 0.1g湿重包涵体经CM-FF柱上复性和稀释复性的获得率分别为26.8%和18.9%。4、-20、-80℃及冻干条件下,CM-FF下柱上复性获得的rhcTnI稳定,并且柱上复性纯化周期短,效率高。结论 CMFF柱上复性要比稀释复性纯化rhcTnI高效、稳定。
- 郝庆钦周建平许秀丽刘培温新宇王玲田亚平
- 关键词：心肌肌钙蛋白I稀释复性纯化
- FK506的肾毒性机制的研究进展被引量：4
- 2003年
- FK5 0 6是一种新型强效免疫抑制剂 ,但是存在较大的肾毒性 ,主要表现在肾小球系膜细胞增生和基质增加、肾血管阻力增高、肾小管钙质沉积、肾小管萎缩和变性、肾小动脉硬化和间质纤维化。FK5 0 6致肾毒性除了与其免疫抑制机制有关外 ,核因子 κB对损伤也有着中心调控作用。一氧化氮也参与了FK5 0 6肾毒性的各个环节 ,转化生长因子 β是间质纤维化发生的关键。此外 ,细胞凋亡的发生和血管活性物质的产生在FK5 0
- 周建平袁本利
- 关键词：FK506肾毒性肾脏免疫抑制剂器官移植
- PTD-BDNF跨血脑屏障作用及神经营养活性研究
- 2007年
- 目的：探讨PTD-BDNF对原代培养海马神经元及Alzheimer病模型小鼠的作用。方法：根据大肠杆菌遗传特点选择大肠杆菌偏爱密码子优化PTD-BDNF的基因结构。同时预测mRNA翻译起始区二级结构，利用计算机对PTD-BDNF进行预测和分析；原代培养大鼠海马神经元，凋亡细胞计数法和MTT法观察PTD-BDNF对Aβ（22-35）致海马神经元损伤的保护作用；静脉给予小鼠PTD-BDNF，用免疫组织化学检测PTD-BDNF在脑内分布。用ELISA法检测PTD-BDNF在脑内随时间的变化；Morris迷宫检测PTD-BDNF对Aβ（2235）所致AD模型小鼠学习记忆的影响。结果：经优化设计的PBv-PTD-BDNF表达量占总蛋白含量的40％左右，较未优化的原基因表达量显著增高，1L菌纯化后能得到PTD-BDNF蛋白为2．8mg左右；凋亡细胞计数显示，对照组、BDNF组和PTD-BDNF组凋亡细胞少见，凋亡率变化不大，而Aβ25-35处理的模型组细胞凋亡明显增多，达41．6±9．5（％），随着PTD-BDNF和BDNF浓度增大，凋亡率减少，与模型组比较，凋亡率均显著减少（P〈0．01）。MTT检测结果显示，随着PTD-BDNF和BDNF浓度增高，细胞存活率逐渐增高，与Aβ25-35模型组比较，细胞存活率显著增高（P〈0．01）。经尾静脉注射PTD-BDNF和BDNF5mg／kg体重，ELISA分析表明静脉注射PTD-BDNF后，与BDNF组和对照组比较，小鼠海马组织中BDNF含量在约1h后明显升高（P〈0．01），至第8小时降至初始水平。血清中PTD-BDNF组在1～4h下降速度慢于BDNF组。Morris水迷宫测试显示PTD-BDNF明显缩短AD模型小鼠的游泳时间和路程。结论：PTD-BDNF具有神经营养活性，对聚集态的Aβ25-35致海马神经元损伤的保护作用。经尾静脉注射PTD-BDNF后能穿过血脑屏障进入脑组织。可明显提高AD的立体空间学习记忆能力。
- 周建平李前孙曼霁
- 关键词：信使核糖核酸海马神经元ELISA法
- PTD-BDNF跨血脑屏障作用及神经营养活性研究
- 目的:探讨PTD-BDNF对原代培养海马神经元及Alzheimer病模型小鼠的作用。方法:根据大肠杆菌遗传特点选择大肠杆菌偏爱密码子优化PTD-BDNF的基因结构。同时预测mRNA翻译起始区二级结构,利用计算机对PTD-...
- 周建平李前孙曼霁
- 文献传递
- 跨血脑屏障的重组人PTD-BDNF的制备及生物学作用
- 脑源性神经营养因子/(brain-derived neurotrophic factor，BDNF/)，属神经营养素家族。人BDNF基因位于11号染色体，基因全长744bp，成熟段基因全长为360bp。BDNF前体蛋白由...
- 周建平
- 关键词：脑源性神经营养因子血脑屏障阿尔茨海默病蛋白转导结构域
- 文献传递
- 腺苷同型半胱氨酸水解酶的表达纯化及活性测定方法建立
- 2013年
- 目的获得高纯度的重组S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH),并建立其活性测定方法。方法运用基因工程技术,在大肠杆菌系统中原核表达重组SAHH,经过镍亲和层析和Sephadex G15两步纯化,得到目的蛋白对其进行理化性质鉴定,并通过优化活性测定条件,确定SAHH活性测定方法。结果终产物SAHH纯度为95%,相对分子质量为49000,比活性为1615U/mg。在37℃、pH7.5的HEPES缓冲液中反应20min为酶活性测定最佳条件,抑制剂可有效抑制酶活性。结论通过基因重组技术可获得高纯度的SAHH,产物理化性质良好,活性测定方法成功建立,为循环酶法测定同型半胱氨酸工艺稳定放大提供可循依据,并且为SAHH抑制剂科学研究提供一种可靠的方法。
- 许秀丽周建平刘培郝庆钦温新宇王玲田亚平
- 关键词：生物活性
