吴旭 作品数:63 被引量:225 H指数:9 供职机构: 福建农林大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
过表达和干扰GDF9基因对番鸭颗粒细胞凋亡和周期的影响 2023年 实验旨在探究生长分化因子9(Growth Differentiation Factor,GDF9)基因对番鸭颗粒细胞的影响,本研究构建了GDF9过表达载体(pEX-2-GDF9)以及干扰GDF9小RNA (siRNA-GDF9-530、siRNAGDF9-978、siRNA-GDF9-1320),分别转染至原代番鸭颗粒细胞内,通过流式细胞术检测GDF9基因对细胞周期和凋亡的影响;荧光定量PCR技术检测转染后颗粒细胞周期和凋亡相关基因的表达量。结果显示,过表达GDF9基因将番鸭颗粒细胞阻滞在G0/G1期,S期细胞极显著减少,且Bax基因和Caspase-3基因表达量极显著(或显著)上调,说明过表达GDF9促进了颗粒细胞凋亡;干扰GDF9基因表达后,G0/G1期细胞极显著减少,S期细胞极显著增加,且CDK-2、Bcl-2、CCND1 mRNA极显著上调,CCNE1 mRNA显著上调。综上可知,GDF9基因表达促进颗粒细胞凋亡、抑制细胞周期进程。该结果可为番鸭的卵泡发育机制研究提供理论基础。 石雨竹 陈超 黄彩云 王梦诗 刘威 吴旭 李昂关键词:GDF9基因 番鸭 颗粒细胞 细胞凋亡 细胞周期 山麻鸭SCA-2基因克隆、生物信息学及组织表达谱分析 2022年 为了探究Struthiocalcin-2(SCA-2)基因在山麻鸭蛋壳形成过程中的作用,试验选择9只产蛋高峰期(30周龄)的健康山麻鸭,采用SMART-RACE方法对山麻鸭SCA-2基因cDNA序列进行克隆,运用生物信息学软件对SCA-2基因编码蛋白质的理化性质、二级和三级结构进行预测及分析,构建SCA-2基因系统进化树;采集试验山麻鸭心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸肌、肌胃、下丘脑、垂体、卵巢,以及输卵管的漏斗部、膨大部、峡部和子宫部共14个组织,每3只做一次混样处理,每个组织共3个重复,提取组织RNA,通过实时荧光定量PCR分析SCA-2基因mRNA在上述组织中的相对表达量。结果表明:SCA-2基因的cDNA全长为726 bp,该基因编码蛋白的分子式为C_(836)H_(1247)N_(229)O_(247)S_(8),属于不稳定蛋白,其中丝氨酸(12.6%)、亮氨酸(12.0%)、丙氨酸(10.2%)含量较高;蛋白质的二级结构中,α螺旋占23.35%、β折叠占13.77%、无规卷曲占62.87%,且包含信号肽序列,不含跨膜结构;山麻鸭与绿头鸭、凤头潜鸭和棕硬尾鸭的亲缘关系最近;SCA-2基因在山麻鸭14种组织中均有不同程度的表达,其中在输卵管子宫部和峡部组织中的表达量极显著高于卵巢(P<0.01),明显高于其他组织。说明本试验成功克隆到了SCA-2基因,该基因可能在山麻鸭蛋壳的形成过程中扮演着重要角色。 张迎燕 刘亚楠 江林 梅慧灵 郑定黔 田若宁 徐丽 李昂 吴旭关键词:山麻鸭 基因克隆 生物信息学 组织表达谱 人工养殖条件下暗纹东方鲀的生长发育特性 被引量:8 2009年 对连续3年人工养殖的暗纹东方鲀的体重、体长、肝重、肝体系数、性腺系数和肥满度等指标进行分析,并用体长、体重相关式W=aLb进行拟合,研究其生长、发育情况.结果表明:池养暗纹东方鲀体长与体重的相关式为W=0.0557L2.9029,性成熟前肝脏与体长的相关式为W=0.0033L3.1875,肥满度为0.05±0.01,明显高于野生暗纹东方鲀.通过对性腺系数和肝体系数的分析得出,池养暗纹东方鲀如果培育良好,性腺能较好地发育. 严美姣 吴旭 李钟杰关键词:暗纹东方鲀 肥满度 几种肉鸭亲缘关系的RAPD分析 用RAPD技术对几种肉鸭(RF系白番鸭、奥白星鸭、白改鸭、法国白番鸭L10、枫叶鸭、花边鸭、樱桃谷鸭)基因组DNA的多态性进行分析,并测定了各群体间的遗传相似系数和遗传距离.结果表明,经筛选22个多态性较好的引物扩增条带... 王光瑛 吴旭 李昂 肖天放 王长康 黄秀清关键词:肉鸭 亲缘关系 RAPD 文献传递 两种东方鲀的GH基因单核苷酸多态性分析 被引量:9 2008年 根据红鳍东方鲀生长激素基因全序列,设计13对引物,结合单链构象多态性(SSCP)技术和克隆测序技术对野生红鳍东方鲀、养殖红鳍东方鲀和养殖暗纹东方鲀群体进行了遗传多样性分析。结果表明:东方鲀整个生长激素基因的6个外显子中没有多态性,在其内含子2、内含子5以及3′侧翼区发现有多处序列变异位点,包括碱基的缺失、插入和一些单核苷酸突变。这些遗传多态性的存在为从分子水平上对东方鲀的鉴定提供了一定的依据。群体遗传结构分析结果表明,红鳍东方鲀养殖群体的一些等位基因丧失,造成其遗传多样性显著下降,应及早加强对其种质的保护。 严美姣 吴旭 黄军关键词:红鳍东方鲀 暗纹东方鲀 GH基因 单核苷酸多态性 种群 连城白鸭GnRH基因与产蛋性能的关联分析 被引量:3 2011年 以连城白鸭为试验材料,GnRH基因为候选基因,采用PCR-SSCP技术分析GnRH基因5′端调控区在连城白鸭群体中的单核苷酸多态性(SNP),并探讨该基因与产蛋性状之间的相关性。结果表明:在连城白鸭中检测到AA、BB和AB3种基因型,基因型和产蛋性能的关联分析表明,不同基因型对连城白鸭300日龄产蛋数有显著影响(P﹤0.05),而对开产日龄没有显著影响(P﹥0.05)。由此推测,该基因型可作为一个筛选连城白鸭产蛋数的分子标记。 黄种彬 钟志新 刘丽平 秦国荣 吴旭 连森阳 王光瑛 李昂关键词:产蛋性能 暗纹东方鲀生长激素基因克隆与同源性分析 被引量:5 2010年 克隆获得暗纹东方鲀GH基因,该基因包含6个外显子和5个内含子,在此基础上获得其cDNA序列,共有591bp,编码196个氨基酸。将该cDNA序列转换成蛋白质序列后,结合NCBI数据库中得到的其它24种脊椎动物生长激素基因的蛋白质序列,运用MEGA3.1,以UPGMA法构建东方鲀等25种脊椎动物的生长激素基因进化树,14种鱼类中除了鳗鲡和鳝鱼外聚为一大类,其它动物中哺乳动物、反刍动物、家禽、爬行动物、人以及鳗鲡等聚为另一大类,暗纹东方鲀与红鳍东方鲀生长激素基因的氨基酸同源性达到100%,与斗鱼、杜父鱼、金鲈生长激素基因的氨基酸同源性达到70%以上,与人的生长激素基因的氨基酸同源性也达到40%;斑马鱼、草鱼、鲋鱼以及鲤鱼之间生长激素基因的氨基酸同源性在85%以上;哺乳动物、反刍动物、家禽的生长激素基因的氨基酸同源性在90%左右。从进化树的结果来看,与传统分类学研究结果基本一致,为进一步研究GH基因在胚胎发育及个体生长中的功能奠定基础。 严美姣 吴旭 李钟杰关键词:暗纹东方鲀 分子克隆 骡鸭最佳配套系的筛选与遗传变异的RAPD分析 为提高肉鸭的饲养效益,该研究通过4组骡鸭杂交组合生产性能的综合测试,拟为筛选最佳配套系提供依据,并采用RAPD技术对4组骡鸭亲本进行遗传变异分析,验证DNA分子标记技术(RAPD)与常规育种方法相结合是切实可行的.根据各... 吴旭关键词:肉鸭 杂交 肉用性能 RAPD 文献传递 番鸭就巢性状相关基因表达的cDNA-AFLP分析 2012年 【目的】寻找与番鸭就巢性状相关的表达基因,了解其就巢调控的分子机理。【方法】采用cDNA-AFLP(cDNA-amplified fragment length polymorphism)技术分析遗传背景相近的RF系白羽番鸭就巢个体和非就巢个体脑垂体基因表达差异。【结果】筛选到与就巢行为相关差异表达片段82条,选取其中15条进行测序。将测序结果在GenBank数据库进行BLAST比较和分析,发现8个片段(53.3%)与已知基因具有较高同源性,涉及与繁殖性能紧密相关的下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal,HPG)上的功能基因,如GnRH基因、FSH基因,同时也分离到位于GH/IGF轴上的功能基因,即GH基因;以及在功能上属于信号传导、转录调控、代谢的调节基因,如超氧化物歧化酶基因、角蛋白关联蛋白基因、硫氰酸酶释放硫基转移酶基因等。2个片段与未知功能的基因有同源性,5个与数据库中现有的基因没有明显的相似性。随机选择3个片段进行RT-PCR验证,检测片段的表达模式与cDNA-AFLP结果一致。【结论】揭示番鸭不同就巢性状基因表达调控模式,进一步阐明番鸭就巢的分子机理。 吴旭 严美姣 刘丽平 傅星源 连森阳 李昂关键词:番鸭 表达谱 肖四海湖野生和人工放流鳜群体遗传结构分析 被引量:12 2010年 采用微卫星标记研究天然封闭型水体肖四海内鳜放流群体与野生群体的遗传差异,试图从分子水平探讨人工增殖放流群体与野生群体遗传结构的差异。结果表明:鳜两个群体在10对微卫星座位共发现有50个等位基因。其中,放流群体发现有22个等位基因,野生群体发现37个等位基因;通过He和PIC统计发现,野生群体遗传多样性明显高于放流增殖鳜,野生鳜群体表现出更丰富的遗传多样性;由杂合度检验可以看出,两个群体都呈现杂合过剩现象,经哈代-温伯格平衡检验,显示两个群体均显著偏离哈代-温伯格平衡(P<0.001),属于连锁不平衡群体;群体间的FST检验,可以看出群体间的FST高于0.25,反映遗传变异主要存在于群体间,而不是群体内部,这充分反映近交及瓶颈效应会引起养殖群体遗传结构的改变,从而导致群体间的遗传分化。 吴旭 严美姣 李钟杰关键词:放流增殖 微卫星