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转录抑制因子GCF2促进肝癌细胞BEL-7404迁移相关靶基因的初步鉴定被引量：4: 2015年; GCF2是转录抑制因子,为了研究GCF2蛋白在肝癌细胞BEL-7404迁移中的作用,并根据芯片结果验证GCF2调控参与迁移的靶基因,我们采用siR NA沉默GCF2蛋白表达,然后通过transwell实验检测GCF2沉默前后BEL-7404细胞迁移的变化,最后荧光定量RT-PCR和Western blot验证芯片结果中与迁移相关基因的表达。研究结果显示siR NA干扰GCF2成功后进行迁移实验,si RNA-GCF2组,FAM-siR NA-NC组,脂质体组,和未处理野生型BEL-7404组24 h后细胞穿过8滋m微孔滤膜的数目(x±s)分别为41.66±1.52、41.66±1.15、41.33±1.5、18.66±0.577,差异均有统计学意义(p约0.01)。QRT-PCR验证9个候选基因中,MyD 88在si RNA-GCF2组内表达显著高于其余三组(p约0.05)。Western blot检测siR NA干扰GCF2后肝癌细胞BEL-7404的MyD 88的蛋白表达显著高于其余三组(p约0.05)。结果表明si RNA沉默转录因子GCF2蛋白表达可抑制肿瘤细胞BEL-7404迁移,推测GCF2作为转录因子可能通过抑制靶基因MyD 88的表达参与细胞的迁移。; 吴博晁耐霞赵飞兰李金平陈力陈德凤黄天明莫发荣张琪惠罗国容; 关键词：原发性肝细胞肝癌细胞迁移小干扰RNA MYD88

肿瘤相关抗原GC结合因子2 shRNA表达载体的构建及鉴定: 2013年; GC结合因子2（GC-binding factor 2, GCF2）是一种转录抑制因子, 因为能与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）基因启动子上富含GC的序列结合而得名。研究表明, GCF2可通过多种途径参与细胞增殖、细胞周期调控及细胞凋亡等进程。GCF2广泛地高表达于肺癌A549细胞、胃腺瘤AGS细胞及白血病K562细胞等人类多种肿瘤细胞, 并且发现GCF2在这些细胞中的高表达与肿瘤细胞增殖、侵袭及肿瘤耐药等密切相关。RNA干扰（RNA interence, RNAi）可特异性地阻断靶基因表达, 是研究基因功能的有效技术。我们的前期研究表明, GCF2是一种肿瘤相关抗原, 在HepG2等肝癌细胞株中高表达[8]。本实验设计针对GCF2 mRNA的干扰序列, 并且与真核表达载体pGPU6/GFP/Neo重组而构建重组质粒pGPU6/GFP/Neo-GCF2, 经酶切和测序鉴定后, 将该重组质粒转染肝癌细胞株HepG2, 以实现对GCF2表达的抑制, 为进一步研究GCF2对肝癌细胞生物学行为的影响及可能的作用机制奠定基础。; 李金平晁耐霞蒋日婷马平陈德凤陈力吴博黄天明莫发荣罗国容; 关键词：肝细胞癌质粒

肿瘤相关抗原GCF2对肝癌细胞株HepG2细胞生物学行为的影响: 本实验旨在观察肿瘤相关抗原GCF2对肝癌细胞株HepG2细胞周期、增殖和凋亡等生物学行为的影响。针对GCF2基因特点设计并筛选有效的靶向CGCF2表达的siRNA,将后者瞬时转染肝癌细胞株HepG2,利用PI染色法、CC...; 李金平罗国容蒋日婷晁耐霞陈德凤陈力马平吴博黄天明莫发荣

GCF2选择性剪接区在肝癌组织及细胞株中的表达及意义被引量：1: 2014年; 目的：研究肿瘤相关抗原GCF2选择性剪接区在人肝癌细胞株、肝癌组织、癌旁组织及正常成人肝细胞及组织中的表达及意义.方法：采用RT PCR检测GCF2 5个选择性剪接区（D1～D5）在人肝癌细胞株、43例肝癌组织、相对应的癌旁组织,以及正常成人肝细胞株及9例肝组织中的表达.结果：GCF2 4个选择性剪接区（D1～D4）在所检测的细胞株、肝癌组织、癌旁组织和正常成人肝组织中均未检测到表达;GCF2选择性剪接区D5仅在人肝癌细胞株检测到阳性表达;在43例肝癌组织及相应的癌旁组织中,有41例肝癌组织GCF2选择性剪接区D5呈阳性表达,阳性表达率为95.35％（41/43）,而9例正常肝组织均未检测到GCF2选择性剪接区D5表达.结论：GCF2 D5选择性剪接区在肝癌组织中有较高阳性表达,GCF2选择性剪接区D5可能与肝癌的发生发展有关.; 陈力李金平晁耐霞吴博陈德凤黄天明罗国容; 关键词：肝癌

利用显微技术对体外诱导巨噬细胞与肾结石晶体相互作用的形态学研究: 目的:研究体外细胞培养体系中人巨噬细胞U937与肾结石晶体的相互作用，观察细胞与晶体反应的形态学改变，并探讨巨噬细胞在肾结石形成中的可能作用。　　方法:体外利用PMA(Phorbol-12-myristate-13-ac...; 吴博; 关键词：肾结石巨噬细胞显微技术钙盐沉积; 文献传递

GCF2在肝癌细胞迁移侵袭中的作用研究: 目的:　　检测GCF2对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响，明确GCF2调控的与肝癌细胞迁移侵袭相关靶基因，为进一步研究肝癌转移的可能机制提供理论基础。　　方法:　　(1)以高表达GCF2的肝癌细胞株HepG2、BEL-7404...; 吴博; 关键词：肝细胞性肝癌发病机制细胞迁移

GC结合因子2在肝细胞癌中的表达和意义被引量：2: 2013年; 目的:探讨转录因子GC结合因子2(GC binding factor 2,GCF2)蛋白的表达与肝细胞癌的关系。方法:用免疫组化方法检测21例正常肝组织,58例肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)及其对应癌旁组织(n=58)中GCF2的表达情况。结果:GCF2在HCC组织中的阳性表达率(31.0%,18/58)显著低于癌旁(84.5%,49/58)和正常肝组织(90.5%,19/21)(P<0.05),GCF2在HCC组织中的表达量亦显著低于癌旁和正常肝组织(P<0.05);GCF2的阳性表达与HCC患者的性别、年龄、肿瘤大小、临床分期、有无肝硬化基础、AFP及HBsAg情况之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GCF2在HCC中的表达下降与HCC的发生可能有一定关系。; 马平晁耐霞潘复泽陈力吴博李金平陈德凤夏冬梅王琳琳罗国容; 关键词：肝细胞癌肿瘤相关抗原免疫组化

siRNA沉默GC结合因子2表达对BEL-7404细胞增殖和凋亡的影响被引量：6: 2013年; 目的 GC结合因子2(GC binding factor 2,GCF2)是一种转录抑制因子,能抑制富含GC序列启动子的基因转录。GCF2在BEL-7404等肝癌细胞株的高表达可能与肝癌的发生及发展有关。文中通过靶向GCF2的GCF2-siRNA序列沉默GCF2表达,观察GCF2对人肝癌细胞株BEL-7404增殖及凋亡的影响。方法将实验细胞分为GCF2 siRNA转染组(转染GCF2-siRNA)、阴性对照组(转染无关序列)、脂质体对照组(只加Lipofectamine 2000)、常规培养对照组(不加转染试剂和siRNA序列)共4组。使用Lipofectamine 2000将GCF2-siRNA转染BEL-7404细胞,Western blot检测转染后48 h GCF2蛋白表达水平,用细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK)-8和AnnexinV/PI-FITC双染流式细胞术检测细胞增殖和凋亡变化。结果 GCF2-siRNA可有效下调GCF2表达、抑制BEL-7404细胞的增殖,细胞凋亡率增加。与各对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 GCF2可促进肝癌细胞株BEL-7404的增殖,抑制该细胞凋亡,提示GCF2通过对肝癌细胞增殖和凋亡的影响参与肝癌的发生、发展。; 李金平蒋日婷晁耐霞马平陈德凤陈力吴博莫发荣罗国容; 关键词：肝细胞癌肿瘤相关抗原增殖凋亡

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吴博