吕慧贞
- 作品数:8 被引量:28H指数:3
- 供职机构:山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 鸭梨α-法尼烯合成酶基因双链RNAi表达载体的构建被引量:3
- 2007年
- 目的:为了在转基因鸭梨植株中有效抑制转录后α-法尼烯合成酶基因(PFS)的表达,研究了α-法尼烯合成酶基因双链RNAi载体的构建。方法:利用RT-PCR技术,从鸭梨的果皮中获得了来源于PFS编码区的2个基因片段,反向连接,构建成RNAi载体。结果:经PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,所构建的载体其序列与设计相一致。结论:克隆质粒pMD-L-S构建成功,为借助农杆菌介导法将PFS基因转化到鸭梨再生植株中奠定了基础。
- 陈新刘庆忠李杨昕吕慧贞梁雅芹张士刚邵建萍张元湖
- 关键词:鸭梨RNA干扰
- 法呢基焦磷酸(FPP)的生物合成及其分子调控被引量:16
- 2007年
- 法呢基焦磷酸合酶作为异戊二烯途径中的重要调节酶,是许多萜类物质的合成前体。FPS的cDNA克隆在许多生物体中也已得到了分离并进行了表达特性研究。从FPP的生物合成途径入手,对FPP生物学特性、FPS酶基因调控的相关信息进行了综述,同时对FPS在基因工程方面的应用进行了展望。
- 陈新李玲玲吕慧贞刘庆忠张元湖
- 关键词:生物学功能分子调控
- 苹果α-法尼烯合成酶基因双链RNAi载体的构建被引量:4
- 2007年
- RNA干扰属于转录后后基因基因沉默机制(PTGS),是一种新型的基因沉默手段,用于基因表达和功能的研究。以成熟苹果的果皮RNA为模板,经RT-PCR扩增并克隆α-Farnesene合成酶基因(AFS),设计特异引物从AFS基因中扩增515bp和396bp的反义和正义基因片段,将正义和反义基因片段串联,把构成的长为911bp的DNA插到PBI121表达载体中,构建成可表达α-Farnesene合成酶双链RNA载体PBI-AFS。
- 吕慧贞陈新穆清泉张士刚张元湖
- 关键词:苹果RNAI载体
- α-Farnesene合成酶基因转入烟草中的研究
- <正>α-Farnesene 合成酶(AFS)是调控α-Farnesene 合成的最直接的限速酶,它催化法尼基焦磷酸(FPP)转变为α-法尼烯。因此,研究该酶的基因表达及其功能有非常重要的意义。本文将构建含有α-Farn...
- 吕慧贞张士刚刘静张元湖
- 关键词:烟草转基因植株
- 文献传递
- 苹果α-法尼烯合成酶基因表达载体的构建及遗传转化
- 虎皮病是苹果、梨在低温贮藏中后期发生的最严重的生理病害之一,这种生理病害不仅影响果实的食用品质特别是外观品质,降低其商品价值,而且使果实抗病性降低,易感染病菌而腐烂,从而造成巨大的经济损失。实验证明α-法尼烯是诱导虎皮病...
- 吕慧贞
- 关键词:苹果虎皮病基因表达
- 文献传递
- 鸭梨中α-法尼烯合成酶基因分离与表达分析被引量:2
- 2009年
- 研究α-法尼烯合成酶基因的表达特性,了解鸭梨虎皮病发生的分子基础。应用高效液相色谱(HPLC)法检测鸭梨果皮中α-法尼烯含量;经过RT-PCR扩增首次得到了1824bp鸭梨α-法尼烯合成酶基因(GenBank注册号DQ364626),使用Northern杂交法检测了该基因的表达特性。PFS基因在鸭梨果皮中的表达量最高,叶中的次之,茎、花、根中的表达量相对较低;二苯胺(DPA)推迟而1-甲基环丙烯(1-MCP)抑制了低温冷藏的鸭梨果皮中PFS基因的表达和α-法尼烯的释放。α-法尼烯的积累量与PFS基因的表达量之间存在很高的协同性。
- 张建朋陈新吕慧贞张元湖
- 关键词:虎皮病基因表达
- 一种改进的鸭梨总RNA提取方法被引量:2
- 2007年
- 本文介绍了一种适应于鸭梨RNA提取的方法。该方法是在常规CTAB法的基础上,在植物匀浆中缓缓加入100%的乙醇2.5 ml,消除了梨皮中DNA、多糖、多酚和其它次生代谢物的污染,提取得到了高纯度、完整性较好的RNA,得到的RNA量大约是改进前的2倍,且上样孔无糖类物质干扰。该方法适合于富含多糖、多酚的植物RNA的提取,试剂简单经济,实验结果稳定。
- 吕慧贞张建朋陈新刘静张元湖
- 关键词:鸭梨RNA
- 梨α-法尼烯合成酶基因的克隆及其序列分析被引量:1
- 2007年
- 利用RT-PCR技术从鸭梨的果皮中获得了一个全长为1824bp的α-法尼烯合成酶基因(α-Farnesene Synthase,PFS)克隆,该cDNA包含一个由1728个核苷酸组成的开放阅读框架,编码分子量约66kDa的576个氨基酸残基的蛋白质。序列相似性分析结果表明,它与苹果中克隆到的AFS1基因具有很高的同源性,核苷酸序列一致性为97.34%,且具有典型的萜类合成酶基因保守结构域。与来源于黄瓜、杉树、松树的α-法尼烯合成酶基因的同源性较低。
- 陈新刘庆忠张建鹏吕慧贞张元湖李玲玲李萌
- 关键词:鸭梨基因克隆