卢士英
- 作品数:141 被引量:409H指数:8
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 乳品中的酵母活菌数PMA-qPCR检测方法的建立及初步应用被引量:3
- 2018年
- 本实验旨在对乳品中酵母菌活菌总数进行准确的定量检测,深入研究PMA处理乳品中酵母热损伤菌的最佳工作条件,去除热损伤死菌DNA的影响。针对从乳品中分离的三株酵母菌26S rDNA D1/D2区域序列设计引物Y3和Y4,运用实时荧定定量PCR进行序列扩增,以重组质粒pMD-18T-26S拷贝数对数与扩增循环数(Ct)值为坐标轴建立标准曲线,建立PMA-qPCR检测方法,并对实际样品中的酵母菌活菌富集后进行数量检测。PMA-q PCR法可达到国标规定的食品中酵母菌最高限量值1×10~2CFU/mL的检测标准,对应Ct值为36.67±0.43,重复性良好,总耗时6~7 h,可对酵母菌数量进行准确和快速的定量分析,为乳品中腐败微生物的鉴定与监控提供有价值的借鉴。
- 李畅赵柯常江张嵩李萌关玉婷孟宪梅柳增善胡盼任洪林卢士英李岩松孙宇刘熙
- 关键词:乳品PMA
- 伏马菌素FB2间接竞争ELISA检测方法的建立被引量:7
- 2009年
- 用卵清白蛋白与伏马菌素B2的偶联物(OVA—FB2)做包被抗原,标准伏马菌素B2(FB2)做竞争抗原,初步建立了检测玉米粉中伏马菌素B2的间接竞争ELISA方法。优化后的ELISA检测方法.线性范围为7.81~250μg/L,最低检测限为6.09μg/L。曲线回归方程为y=7.038x+120.25,R^2=0.9835,批内平均变异系数为3.92%,批间平均变异系数为5.53%。对玉米粉加标样品测定结果表明,利用甲醇-EDTA法提取样品的平均加标回收率达到了96.11%。
- 李岩松柳增善周玉卢士英王哲李小兵
- 关键词:玉米粉间接竞争ELISA
- 促黑激素重组毒素在制备治疗结肠癌药物中的应用
- 本发明涉及一种促黑激素重组毒素在制备治疗结肠癌药物中的应用,属于医药领域。促黑激素重组毒素的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所述,促黑激素重组毒素能够以黑素皮质激素受体‑1为靶标,特异性捕获和杀死高表达该受体...
- 柳溪林崔树森胡盼柳增善卢士英任洪林张嵩李萌常江
- 文献传递
- 鼠源CD40L的原核表达及其对河豚毒素半抗原免疫增强效果分析
- 2019年
- 试验旨在通过大肠杆菌表达系统表达鼠源重组CD40L蛋白,探讨其对河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)人工完全抗原在免疫BALB/c小鼠过程中的免疫增强作用。用Trizol试剂提取BALB/c小鼠脾脏总RNA并反转录成cDNA,根据CD40L CDS区设计引物,PCR扩增目的基因,构建pGEX4T-1重组载体,进行原核表达,并纯化重组CD40L蛋白;根据曼尼希反应原理,用甲醛法制备TTX免疫原TTX-BSA和检测原TTX-OVA;以人工重组蛋白CD40L佐剂组为试验组,弗氏佐剂组作为对照组,免疫BALB/c小鼠,用ELISA方法结合SPSS 19.0软件分析各组免疫效果,探讨重组CD40L蛋白在TTX-BSA免疫过程中对免疫效果的影响。结果显示,本试验成功扩增了783 bp的CD40L目的基因,原核表达并纯化了融合GST标签的55 ku鼠源CD40L重组蛋白;与人工制备的TTX-BSA协同免疫小鼠试验结果显示,在免疫初期与弗氏佐剂相比,CD40L具有极显著的免疫增强效果(P<0.01)。综上所述,重组蛋白CD40L与TTX-BSA完全抗原协同免疫小鼠,在免疫初期CD40L具有增强机体对半抗原的应答强度的作用,为进一步开发适于小分子半抗原抗体高效制备的免疫增强佐剂奠定基础。
- 潘悦曹旗任洪林胡盼李岩松周玉柳增善卢士英
- 关键词:CD40L佐剂河豚毒素免疫效果
- 一种胃癌靶向重组毒素及其制备方法
- 本发明涉及一种胃癌靶向重组毒素及其制备方法,属于靶向重组毒素及其制备方法。利用人胃泌素G17与绿脓杆菌外毒素A衍生的重组毒素PE38KDEL连接形成的具有胃癌靶向的重组毒素,特别是利用原核表达系统表达的反向翻译的G17作...
- 柳增善宋杰任洪林卢士英李岩松周玉张茂林高世奇
- 文献传递
- 展青霉素人工抗原的制备与鉴定被引量:2
- 2014年
- 为探讨展青霉素(patulin,PAT)不同抗原合成方法对完全抗原制备及抗体产生的影响,本试验利用琥珀酸酐联合活泼酯法,分别制备免疫原PAT-BSA和包被原PAT-OVA。为提高PAT与偶联蛋白的结合率,尝试将BSA修饰为EDA-BSA后与PAT进行偶联,并对比2种偶联方法制备的完全抗原免疫动物后抗血清的效价水平。同时利用琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶渗透色谱多种方法分析鉴定偶联结果,为PAT单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立奠定了基础。
- 王欣然聂虹霞李岩松谭彩云胡盼冯小丽任洪林郭一平周玉柳增善卢士英
- 关键词:展青霉素偶联
- 一种海洋贝毒素单抗制备方法
- 本发明涉及一种海洋贝毒素单抗制备方法,其特征在于:制备小分子贝毒素单抗用于动物免疫和杂交瘤细胞筛选的抗原为同一偶联物,减少了常规小分子物质单抗制备方法中免疫原与检测原不同制备的麻烦与浪费;并采用了正筛法和负筛法相结合的筛...
- 卢士英任洪林李岩松柳增善周玉孟宪梅李兆辉于师宇林超闫东明王里奇李乐
- 文献传递
- 一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用
- 本发明涉及一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用,属于利用基因工程制备结肠靶向重组毒素。一种结肠靶向重组毒素,其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示,以pET28a为表达载体,BL21(DE3)为表达宿主,构建了BL21...
- 胡盼柳增善任洪林卢士英李岩松周玉张嵩柳溪林李萌常江
- 抗大田软海绵酸单克隆抗体的制备、纯化及其特性被引量:13
- 2006年
- 用大田软海绵酸与人IgG的偶联物OA-IgG作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过常规细胞融合技术将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0融合,用间接竞争ELISA方法对融合细胞所分泌抗体的特异性进行筛选。经过3次克隆,获得1株可稳定分泌抗OA的杂交瘤细胞株3C5,其染色体数为50±2,所分泌抗体属IgG1亚类,相对分子质量是159390,抗体亲和常数为9.8×108L/mol,滴度达2.56×106。
- 于光卢士英李岩松周玉任洪林谭建华柳增善
- 关键词:单克隆抗体纯化
- 一种基于PMA-qPCR技术的布鲁氏菌活菌计数方法
- 本发明提供了一种基于PMA‑qPCR技术的布鲁氏菌活菌计数方法,属于微生物计数技术领域。本发明优化PMA处理布鲁氏菌S2的处理浓度与曝光时间,再结合qPCR方法检测布鲁氏菌BCSP31基因,建立PMA‑qPCR定量检测布...
- 任洪林张士军胡盼卢士英柳增善王海波李岩松柳溪林张英
- 文献传递