卞尔保
- 作品数：19 被引量：46H指数：4
- 供职机构：安徽医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 局灶性脑缺血再灌注损伤对小鼠脑组织SUV39H1、H3K9及GFAP表达的影响被引量：3
- 2020年
- 目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤中病变区域组蛋白3赖氨酸9(H3K9)及其甲基化转移酶(SUV39H1)与星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的变化特点。方法选用C57BL/6小鼠作为实验对象,运用Koizumi法建立左侧大脑中动脉局灶性缺血再灌注小鼠模型(MCAO model),采用行为学、切片染色、qRT-PCR、相关分析、Western blot等方法,对比观察空白对照组、假手术组、脑缺血2 h再灌注24 h(实验组)小鼠大脑组织SUV39H1、H3K9及GFAP的表达情况。结果氯化三苯四氮唑(TTC)染色结果显示,与假手术组和空白对照组相比,实验组小鼠脑梗死面积明显增加、脑水肿明显。qRT-PCR及Western blot结果显示,与假手术组和空白对照组相比,实验组小鼠脑组织SUV39H1、H3K9及GFAP的表达明显增加(P<0.05)。结论局灶性脑缺血再灌注损伤的小鼠脑组织SUV39H1和H3K9的表达增加,同时GFAP的表达也显著增加,提示星形胶质细胞活化对局灶性缺血再灌注损伤的小鼠脑组织中SUV39H1和H3K9表达增加可能具有重要作用。
- 花向阳卞尔保张正伟赵兵
- 关键词：MCAO模型GFAP
- RNAi介导MeCP2基因沉默对HSC-T6细胞活化增殖的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨RNA干扰介导甲基CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2)基因沉默对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响。方法根据MeCP2的碱基序列设计并合成小干扰RNA(small interfering RNA,siR-NA),通过脂质体LipofectamineTM2000转染到HSC-T6细胞内,荧光倒置显微镜观察细胞的转染效率,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HSC-T6细胞增殖变化;Quantitative Real-Time PCR检测α-SMA、MeCP2 mRNA的表达;流式细胞术检测HSC-T6细胞周期的变化;Western blot检测α-SMA、MeCP2蛋白的表达。结果将MeCP2-siRNA转染进HSC-T6细胞内,MeCP2基因及蛋白水平明显降低;同时α-SMAmRNA及α-SMA蛋白的表达水平亦明显降低;靶向封闭MeCP2基因的表达可明显抑制HSC-T6细胞的活化增殖。结论靶向封闭MeCP2的表达可明显抑制HSC-T6细胞活化增殖,MeCP2可能是潜在的肝纤维化治疗靶点。
- 陶辉黄成杨晶晶马陶陶张磊卞尔保李政通章慧吕雄文李俊
- 关键词：肝星状细胞Α平滑肌肌动蛋白
- 重组组蛋白去乙酰化酶2-pEGFP-C2质粒的构建及表达
- 2014年
- 目的将组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因克隆入pEGFP-C2载体,探讨构建的质粒转染进非洲绿猴肾成纤维细胞COS-7株相关蛋白和mRNA的表达及蛋白分布部位的情况。方法从人肝癌细胞(HepG2)中获得组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的cDNA,采用Xho I和BamH I双酶切,用T4连接酶将该cDNA连接pEGFP-C2质粒,将构建成功的pEGFP-C2-HDAC2质粒经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后转染非洲绿猴肾成纤维细胞(COS-7),荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,RT-PCR和Western blot鉴定HDAC2的表达。结果双酶切鉴定可见HDAC2质粒片段,转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达,PCR结果可检测到HDAC2 mRNA表达,同时Western blot可检测HDAC2蛋白和GFP蛋白的表达。结论成功构建了重组pEGFP-C2-HDAC2表达质粒,HDAC2蛋白可与绿色荧光蛋白在COS-7细胞中融合表达。
- 章慧黄成卞尔保赵斌吴宝明刘昌伟陈小霞李俊
- 关键词：COS-7融合蛋白PEGFP-C2HEPG2绿色荧光蛋白
- 急性胰腺炎患者循环miR-29a水平升高且与疾病严重程度及预后差正相关被引量：10
- 2018年
- 目的明确循环miR-29a在急性胰腺炎(AP)的诊断与监控预后中的应用价值。方法募集轻度急性胰腺炎(MAP30例、中度重症胰腺炎与重度急性胰腺炎(M-SAP)共30例,30例健康成人为对照组。比较一般临床指标,采用实时定量PCR检测外周血miR-29a水平并分析与临床评分的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-29a对AP的诊断价值。以脱氧胆酸(DCA)处理AR42J细胞建立AP细胞模型,Western blot法检测miR-29a及胱天蛋白酶3(caspase-3)表达量,采用慢病毒载体转入miR-29a模拟物或抑制物,Western blot法检测miR-29a及DCA处理后caspase-3的蛋白水平。结果 MAP组与M-SAP组急性期循环miR-29a相对表达量显著升高且M-SAP组高于MAP组,同组内恢复期miR-29a表达量低于急性期,且miR-29a表达量与Ranson评分及APACHEⅡ评分呈正相关。miR-29a用以诊断MAP的受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0. 961 (95%CI:0. 921～1. 002),截断点(cut-off)值为1. 460;用以诊断M-SAP的AUC为0. 972 (95%CI:0. 939～1. 004),cut-off值为1. 340。AP细胞模型中,miR-29a与caspase-3水平升高;与空载体对照组相比,过表达miR-29a后caspase-3表达量升高,抑制miR-29a后则caspase-3水平降低。结论 MAP与M-SAP患者循环miR-29a水平明显升高,miR-29a高表达可能与胰腺腺泡细胞凋亡有关,该指标对于AP的诊断与预后监测具有较高的应用价值。
- 高明卞尔保李贺葛魏巍尹纯林汪海平孙远松
- 关键词：急性胰腺炎生物学标志物
- 长链非编码RNA SPRY4-IT1促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭
- 卞尔保赵兵贺小军马春春
- DNMT1抑制剂DC517对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响被引量：7
- 2019年
- 目的:研究DNA甲基转移酶1(DNMT1)抑制剂DC_517对人胶质瘤LN18细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:用不同浓度的DC_517对胶质瘤细胞系处理不同时间,采用CCK8法检测胶质瘤细胞增殖;Transwell实验检测胶质瘤细胞迁移和侵袭;采用Western blot法检测肿瘤细胞增殖、侵袭相关蛋白表达。结果:结果显示,与对照组比较,1μmol/L的DC_517处理LN18细胞48 h后显著抑制细胞增殖、迁移侵袭(P<0.05);用不同浓度DC_517处理LN18细胞48 h后,与对照组比较,DC_517对细胞增殖、迁移侵袭能力的抑制呈现浓度依赖性(P<0.01);此外,与对照组比较,1μmol/L的DC_517处理LN18细胞48 h后显著抑制增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)和G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)及迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-9(MMP9)的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05);用不同浓度DC_517处理LN18细胞48 h后,与对照组比较,DC_517对PCNA、Cyclin D1和MMP9蛋白表达的抑制呈现浓度依赖性(P<0.01)。结论:DC_517通过调控增殖及侵袭相关蛋白的表达抑制胶质瘤细胞系LN18细胞的增殖和侵袭。
- 徐雅娣赵兵卞尔保纪兴虎杨志豪汤锋万经海
- 关键词：胶质瘤增殖
- 靶向抑制DNMT1对人脑胶质瘤细胞增殖的影响
- 2015年
- 目的应用靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因的小干扰RNA(siRNA)重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞,观察其对胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法实验组予以siRNA-DNMT1序列进行转染,对照组仅予以siRNA-阴性对照序列。应用qRT-PCR分析DNMT1基因表达变化,Western blot法分析DNMT1、PCNA和Cyclin D1蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖生长能力,细胞克隆法分析细胞增殖克隆形成能力。结果与对照组比较,qRT-PCR结果表明实验组DNMT1 mRNA表达明显减少(P<0.01);Western blot法表明实验组DNMT1、PCNA和Cyclin D1蛋白表达水平明显降低(P<0.01);MTT法检测表明实验组中活细胞数明显低于对照组(P<0.05);细胞克隆法表明实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组(P<0.01)。结论靶向DNMT1基因的siRNA重组质粒可减少人脑胶质瘤细胞内DNMT1基因的表达,从而抑制胶质瘤细胞的增殖。
- 李佳卞尔保贺小军马春春宗钢王洪亮赵兵
- 关键词：胶质瘤转染细胞增殖
- 沉默Ska2基因对人胶质瘤细胞增殖的影响
- 2016年
- 目的采用siRNA沉默Ska2基因,探讨其对人胶质瘤细胞生长的影响及其潜在的分子机制。方法对照组人胶质瘤细胞予以siRNA阴性序列转染,实验组予以siRNASka2序列转染。每组细胞转染48 h后应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析Ska2 mRNA表达情况。Western blot法分析Ska2、PCNA和Cyclin D1蛋白表达情况,MTT法及细胞克隆实验分析Ska2对A172细胞增殖及克隆形成能力的影响。结果 qRT-PCR结果显示实验组Ska2mRNA表达较对照组显著减少(P<0.01),Western blot结果显示实验组Ska2、PCNA和Cyclin D1蛋白表达水平亦较对照组显著降低(P<0.01),MTT实验显示实验组中活细胞数明显低于对照组(P<0.05);细胞克隆法显示实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组(P<0.01)。结论沉默Ska2基因、减少人胶质瘤细胞Ska2基因的表达能够抑制胶质瘤细胞的增殖。
- 贺小军马春春卞尔保王洪亮宗钢赵兵
- 关键词：胶质瘤细胞增殖
- miR-155及SOCS1蛋白在酒精性脂肪肝小鼠肝脏中的表达被引量：6
- 2017年
- 目的探讨Lieber-DeCarli液体饮食诱导的酒精性脂肪肝模型小鼠肝组织中miR-155及细胞因子信号转导抑制物1(SOCS1)蛋白的表达变化。方法选取C56BL/6雄性小鼠,随机分为对照组及模型组。采用Lieber-DeCarli液体饮食诱导小鼠酒精性脂肪肝模型。试剂盒检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)水平。HE染色、油红染色观察小鼠肝损伤变化。qRT-PCR法检测小鼠肝组织中miR-155的表达量。Western blot法检测小鼠肝组织中SOCS1蛋白的表达变化。采用Pearson检验分析miR-155与SOCS1蛋白表达的相关性。结果病理结果及血清ALT、AST水平证实酒精性脂肪肝小鼠模型建立成功。qRT-PCR结果显示模型组小鼠肝组织中miR-155表达量明显高于对照组(P<0.001)。Western blot结果显示模型组小鼠肝组织中SOCS1蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。Pearson相关检验结果显示miR-155与SOCS1蛋白表达呈负相关性(r=-0.916,P<0.05)。结论 miR-155及SOCS1蛋白可能在酒精性脂肪肝发病过程中起着重要作用,确切机制有待进一步研究。
- 王媛媛杨扬梅金玉卞尔保李俊鲁超
- 关键词：酒精性脂肪肝MIR-155SOCS1
- 长链非编码RNA FAS-AS1对胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭的影响被引量：3
- 2021年
- 目的探讨长链非编码RNA FAS-AS1在胶质瘤细胞中的表达及其对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法使用qRT-PCR分别检测临床标本、胶质瘤细胞系中FAS-AS1表达丰度。采用FAS-AS1质粒转染人脑胶质瘤细胞系U251、SF126细胞,qRT-PCR检测转染效率,通过MTT形成实验及克隆实验检测FAS-AS1对细胞增殖能力的影响;通过Transwell实验检测FAS-AS1对细胞迁移影响;通过基质胶构建生物膜结合Transwell实验检测FAS-AS1对胶质瘤细胞侵袭的影响。结果胶质瘤组织及人脑胶质瘤细胞系中FAS-AS1的表达下调;FAS-AS1质粒转染成功构建过表达FAS-AS1胶质瘤细胞模型,FAS-AS1过表达抑制胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭。结论FAS-AS1在胶质瘤中表达下调并能抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭。
- 孙立波卞尔保程梦张正伟黄克兵陈杰岳小宇赵兵
- 关键词：胶质瘤迁移
