刘琪
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 多重耐药基因cfr在广东地区猪源肠球菌中的流行特点被引量：4
- 2014年
- 为调查多重耐药基因cfr在广东地区猪源肠球菌中的流行特点及分离株对临床常用药物的耐药情况,本研究通过对临床分离的8株携带cfr基因的肠球菌进行最小抑菌浓度(MIC)测定,脉冲凝胶电泳(PFGE)分型和southern杂交定位,确定分离株的耐药表型和cfr基因在肠球菌中的传播方式。研究表明,8株菌对氟苯尼考、庆大霉素和红霉素耐药率均为100%;对四环素、环丙沙星和利福平的耐药率高达75.0%以上。PFGE结果显示在同一猪场分离的28株cfr阳性肠球菌共有8种不同的PFGE谱型,表明cfr基因在同一猪场中存在克隆传播的现象。Southern杂交结果显示,cfr基因在6株菌中定位于20 kb^50 kb的质粒。本研究为临床制定合理措施控制cfr快速传播提供实验依据。
- 牟迪王秀梅初胜波刘琪张万江刘思国
- 关键词：脉冲凝胶电泳最小抑菌浓度SOUTHERN杂交肠球菌
- 中国东北地区奶牛源葡萄球菌耐药现状调查及用药指导
- 为调查东北地区奶牛源葡萄球菌耐药现状、耐药产生的分子机制和菌株流行情况，为东北地区奶牛养殖场做抗生素用药指导。本研究对从东北地区5个奶牛场分离的107株不同种属葡萄球菌进行耐药表型测定，并采用PCR方法检测分离株中携带的...
- 刘琪
- 关键词：葡萄球菌耐药现状耐药基因用药指导
- 文献传递
- 蜱及蜱传病的研究进展被引量：11
- 2013年
- 对蜱的种属、生物学特性和传播疾病及诊断方法进行了综述。针对蜱及常见蜱传病的特性,有助于找到切实有效的方法,从根本上消灭蜱所带来的危害。
- 刘琪王伟利孟庆峰
- 关键词：蜱媒传染病
- 维氏气单胞菌菌影疫苗的构建及其溶菌动力学研究被引量：5
- 2014年
- 细菌菌影(Bacterial ghosts)是通过诱导Phi X174噬菌体中裂解基因E在革兰氏阴性菌中的表达所获得的无细胞内容物的空细菌体。它保持了与活菌相同的膜蛋白成分、天然结构、细胞表面抗原等特性,是一种新型的死菌疫苗。为优化维氏气单胞菌(A.veronii)菌影制备条件,本实验将带有庆大抗性的裂解基因E转入A.veronii ATCC35624株中,通过温度变化对其进行溶菌动力学试验,每隔30 min对菌液OD600nm及其活菌数进行测定,当OD600nm稳定不再下降时,通过扫描电镜观察裂解后菌体的形态变化。结果显示,在诱导30 min后OD600nm值开始持续下降,当其下降到最低值时,活菌检测结果表明几乎无活菌存在。本研究利用菌影形成机制构建A.veronii菌影,为新型疫苗的制备提供依据。
- 徐展孟庆峰王伟利钱爱东刘琪崔洁
- 关键词：维氏气单胞菌疫苗
- 猪源肠球菌林克酰胺、截短侧耳素及链阳菌素A类耐药基因lsa(E)的检测及传播方式被引量：2
- 2014年
- 为研究lsa(E)在猪源肠球菌中的流行情况及传播方式,本研究从广西某猪场分离的56株肠球菌中检测到15株携带多重耐药外排泵基因lsa(E)的肠球菌,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对lsa(E)基因阳性的肠球菌进行亲缘关系分析,并对不同克隆型的菌株进行耐药表型和相关耐药基因型检测,通过Southern杂交定位lsa(E)基因在不同菌株中的位置。PFGE结果显示15株lsa(E)基因阳性的肠球菌共有7种不同的PFGE谱型,表明携带lsa(E)基因的肠球菌在同一猪场存在垂直传播的现象。药物敏感性试验结果显示,7株分离株除对红霉素、四环素、庆大霉素和环丙沙星100%耐药外,对利奈唑胺、氟苯尼考、利福平和左氧氟沙星也具有较高的耐药率,分别为57.1%、85.7%、71.4%和85.7%。耐药基因erm(B),aac(6')-Ie-aph(2'')-Ia和aph(3'')-IIIa的检出率分别为:100%、85.7%和72.4%;Southern杂交结果显示,lsa(E)基因在6株菌中定位于质粒22 kb^54 kb,而在1株菌中定位于染色体。本研究为临床制定合理措施控制lsa(E)快速传播提供依据。
- 初胜波王秀梅张万江刘琪牟迪刘思国
- 关键词：肠球菌耐药表型耐药基因
- 森林革蜱半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的构建及差异基因的分析
- 2014年
- 目的构建森林革蜱（Dermacentor silvarum）半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库,分析差异基因。方法以森林革蜱半饱血雄蜱为实验组（tester）,未吸血雄蜱为对照组（driver）,分别提取总RNA,SMARTER PCR合成双链cDNA,RsaⅠ酶切后连接接头并进行抑制消减杂交。巢式PCR扩增杂交产物,经柱纯化后连接至PMD-18T中,转化大肠埃希菌DH5α感受态细胞,进行蓝白斑筛选,并计算文库滴度和重组率。随机挑选阳性克隆,反向Northern杂交（Northern blotting）和RT-PCR法检测抑制消减杂交cDNA文库的消减效率。随机选取差异基因阳性克隆送测序,利用Blastn和Blastx对测序结果进行核酸种类同源性分析和蛋白种类同源性的比对和功能预测。结果电泳结果显示,森林革蜱半饱血雄蜱和未吸血雄蜱的ds cDNA均呈弥散拖影,大小在500bp以上,经RsaⅠ酶切后,大小在100～1000 bp;接头连接效率大于25%。巢式PCR结果显示,消减的ds cDNA呈聚集条带,大小在250～500 bp。构建的森林革蜱半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的滴度为700 000 pfu/ml,重组率为88.5%（239/270）。反向Northern blotting检测结果显示,当以森林革蜱半饱血雄蜱单链cDNA为探针时,消减文库信号较强;以未吸血雄蜱单链cDNA为探针时,消减文库信号较弱。RT-PCR结果显示,随机选取的8个阳性克隆中,有5个在半饱血状态下表达上扬,抑制消减杂交cDNA文库消减效果较好。115个阳性克隆测序得到87个差异表达序列标签（ESTs）,大小为200～800 bp。Blastn分析结果显示,87个序列中,与其他蜱基因有同源性的53个,同源性为70%～98%,与库蚊、甲虫和果蝇等其他昆虫基因有同源性的34个,同源性为32%～65%。Blastx预测结果显示,序列中片段表达的蛋白包括参与吸血和血液消化的不同酶类,主要功能为能量代谢、信号传导和转录调节等。结论建立了森林革蜱半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库,差异基因
- 刘琪王伟琳孟庆峰徐展崔洁刘新欣王伟利
- 关键词：抑制消减杂交CDNA文库差异基因
- 森林革蜱半饱血雄蜱抑制性消减cDNA文库的构建及功能性基因的筛选
- 森林革蜱(Dermacentor silvarum)存在于中国北部、俄罗斯和蒙古地区，是一种专性吸血节肢动物，也是一种蜱传播的疾病携带介质，可以传播多种疾病，如森林脑炎病毒、贝氏立克次体、西伯利亚立克次氏体和布鲁士杆菌等...
- 刘琪
- 文献传递
- 抑制消减杂交技术(SSH)及其在兽医领域的应用被引量：1
- 2013年
- 基因的差异表达是生命活动的核心机制,在不同发育时期和不同生理阶段中不同细胞或同类细胞在表达上不同,这为研究生命活动过程提供重要的信息。抑制消减杂交技术(SSH)是近年来新兴的用于分离差异表达基因的手段之一,此技术结合了消减杂交和抑制性PCR的优点,广泛应用于兽医领域。文章对SSH原理、方法和特点进行了阐述,对其在微生物、动物疾病、动物生育和寄生虫学中的应用做了相应的概括介绍。
- 孟庆峰刘琪王伟利
- 东北地区奶牛源葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研究被引量：4
- 2014年
- 为调查东北三省地区奶牛源葡萄球菌耐药现状、耐药产生的分子机制和菌株流行情况,本研究对东北三省4个不同奶牛厂分离的107株不同种属葡萄球菌进行耐药表型测定,并采用PCR方法检测分离株中携带的相关耐药基因;通过脉冲凝胶电泳(PFGE)对分离株的亲缘关系进行分析,同时对金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST)。研究结果表明,同一奶牛场葡萄球菌克隆传播现象严重,PFGE分析后仅获得8株不同克隆的葡萄球菌。8株分离菌株对氨苄西林、克林霉素、红霉素、卡那霉素、和环丙沙星的耐药率分别为87.5%、87.5%、62.5%、50%和25%,对其余受试的6种药物(苯唑西林、四环素、氟苯尼考、利福平、万古霉素和利奈唑胺)均敏感。耐药基因检测结果显示,耐药基因blaZ/femB,lnuA/lnuB,erm(B),accA-aphD和gyrA基因Ser84(TCA)-I1e(TTA)的突变及grlA基因Ser80(CTC)-Phe(CTT)的突变是造成葡萄球菌对氨苄西林、克林霉素、红霉素、卡那霉素和环丙沙星耐药的主要原因。
- 刘琪张万江牟迪初胜波王秀梅刘思国
- 关键词：葡萄球菌脉冲凝胶电泳耐药基因
