刘燕
- 作品数：27 被引量：15H指数：2
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- 大鼠IP_3R1 miRNA慢病毒表达载体的构建及其沉默效应鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建大鼠IP3R1miRNA慢病毒表达载体,并利用PC12细胞株观察其对IP3R1基因的沉默效应。方法根据已公布的IP3R1基因序列(GenBankNo.NM_001007235),设计并合成4对miRNA的OligoDNA(miRNA1、miRNA2、miRNA3和miRNA4),退火形成双链DNA后,与载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR连接,构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-IP3R1表达载体;用Gateway技术将该表达载体先后与中间载体pDONRTM221、慢病毒载体pLenti6/V5-DEST连接,构建慢病毒表达载体pLenti6/V5-DEST-IP3R1,包装产生慢病毒,收集上清,感染PC12细胞株,用Real-timePCR和Western blotting技术检测慢病毒表达载体对PC12细胞内IP3R1表达的沉默效应。结果测序结果表明,4对pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-IP3R1表达载体序列与参考序列一致,将重组获得的慢病毒表达载体pLenti6/V5-DEST-IP3R1转染至PC12细胞株,48h后IP3R1的mRNA和蛋白表达下调,以miR-NA2和miRNA3的沉默效应最佳。结论成功构建了大鼠IP3R1慢病毒表达载体pLenti6/V5-DEST-IP3R1,其可使大鼠PC12细胞株IP3R1表达下调,为利用RNA干扰技术进一步研究细胞内钙释放通道的功能奠定了基础。
- 陈玉萍王树树高璀乡刘展刘燕彭聿平
- 关键词：微RNAS慢病毒感染
- 超净台用磁力底座漏斗、注射器架、灭菌托盘
- 本发明公开了一种超净台用磁力底座漏斗、注射器架、灭菌托盘，包括产生吸附磁力的磁性座，磁性座的侧面为将磁性底座吸附在超净台内铁质的垂直边板上的磁性座吸附面，磁性座底面与超净台内的底面接触，磁性座上表面固装立柱底盘，立柱底盘...
- 邱一华彭聿平陈不尤刘燕王小琴
- 文献传递
- 酪氨酸羟化酶重组质粒标准品构建被引量：1
- 2010年
- 目的:用T-A克隆法构建含酪氨酸羟化酶(TH)基因的重组质粒,并用实时定量PCR(RQPCR)方法制备标准品。方法:提取小鼠肾上腺髓质组织总RNA,逆转录为cDNA后进行RT-PCR,回收纯化电泳胶,T-A克隆与pGEM-T载体连接,转化Top-10感受态细菌,蓝白斑筛选出阳性菌落后,大量提取质粒,再进行RQPCR反应,最后制得含TH的重组质粒标准品。结果:肾上腺髓质TH的表达,PCR扩增,菌液PCR,测序鉴定均证实TH重组到pGEM-T载体上,经RQPCR定量后得到TH重组质粒标准品的标准曲线。结论:该方法能大量制备TH质粒标准品,并且可推广应用。
- 刘燕彭聿平黄彦黄慧伟邱一华
- 关键词：酪氨酸羟化酶实时定量聚合酶链反应
- 1、多巴胺受体在介导T淋巴细胞功能调节中的作用
- 目的：随着神经-内分泌-免疫相互作用研究的不断深入，目前己知在淋巴细胞上具有C-和β-肾上腺素受体，它们参与调节免疫细胞功能。然而，关于淋巴细胞多巴胺(DOPAMINE，DA)受体的表达及其免疫调节作用目前尚不十分清楚...
- 邱一华黄彦刘燕黄慧伟彭聿平
- 文献传递网络资源链接
- CIPP模式评价PBL教学法联合模拟人在诊断学教学中效果
- 2013年
- 目的:应用CIPP模式评价PBL教学法,联合模拟人在诊断学心肺体征教学中的效果。方法:将临床医学专业本科生120名分为联合教学组60名和对照组60名,从背景、输入、过程和成果评价4个方面分析。结果:(1)问卷结果提示:教师认为现教材需改革86%,赞同PBL教学法73%,赞同引入模拟人98%;认为学生具备PBL教学资质自觉性67%;联合教学法为加强知识点记忆16%;提高学生动手能力32%;锻炼临床思维、提高诊断能力34%。(2)输入评价对PBL模拟人教案、教师资质及诊断学设施评估满意度分别是71%、82%及76%。(3)两组《技能评分表》结果比较:知识点、操作、总成绩联合教学组分别为85.93±0.65分,89.28±2.58分,87.61±0.60分。对照组分别为74.20±1.44分,64.73±1.98分,69.47±1.92分。两组3项指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:通过CIPP模式,建立课程评价体系,PBL联合模拟人教学法适合在诊断学教学中开展,且具有明显的优越性。
- 袁心露孙敏周国雄董志珍刘燕
- 关键词：诊断学教学模拟人
- 超净台用磁力底座漏斗、移液器架、灭菌托盘
- 本发明公开了一种超净台用磁力底座漏斗、移液器架、灭菌托盘，包括产生吸附磁力的磁性座，磁性座的侧面为将磁性底座吸附在超净台内铁质的垂直边板上的磁性座吸附面，磁性座底面与超净台内的底面接触，磁性座上表面固装立柱底盘，立柱底盘...
- 邱一华彭聿平王莹刘燕王小琴
- 文献传递
- 一种胶原诱导性关节炎动物模型的制备方法、应用及评价方法
- 本发明提供一种胶原诱导性关节炎动物模型的制备方法，选取6‑8周、雄性、DBA/1小鼠；将步骤（1）所选取的小鼠置于温度为20‑24℃，相对湿度50%‑60%，12小时明暗交替的清洁级动物房中饲养，自由摄食饮水，适应环境三...
- 马颂华陈罡王小琴刘燕
- 文献传递
- 超净台用磁力底座漏斗、移液器、注射器架
- 本发明公开了一种超净台用磁力底座漏斗、移液器、注射器架，包括产生吸附磁力的磁性座，磁性座的侧面为将磁性底座吸附在超净台内铁质的垂直边板上的磁性座吸附面，磁性座底面与超净台内的底面接触，磁性座上表面固装立柱底盘，立柱底盘上...
- 邱一华彭聿平王莹王小琴刘燕
- 文献传递
- 超净台用磁力底座吸管、移液器架、灭菌托盘
- 本发明公开了一种超净台用磁力底座吸管、移液器架、灭菌托盘，包括产生吸附磁力的磁性座，磁性座的侧面为将磁性底座吸附在超净台内铁质的垂直边板上的磁性座吸附面，磁性座底面与超净台内的底面接触，磁性座上表面固装立柱底盘，立柱底盘...
- 邱一华彭聿平蒋伟刘燕王小琴
- 文献传递
- miR-TH克隆及慢病毒载体的构建
- 2010年
- 目的:克隆microRNA-酪氨酸羟化酶(TH),构建慢病毒载体。方法:根据TH基因序列(NM_009377.1),设计并合成4对微小RNA(miRNA)的Oligo DNA,退火形成双链后与pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miRNA载体相连,用Gateway技术将构建好的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-TH载体先后与中间载体pDONRTM221、慢病毒载体pLenti6/V5-DEST连接,构建慢病毒表达载体pLenti6/V5-DEST-TH,用脂质体2000(lipofectamine 2000)将慢病毒载体以及包装质粒(pLP1,pLP2和pLP/VSVG)共转染HEK-293FT细胞,收集上清,感染293T细胞株进行滴度鉴定。结果:测序结果表明,4对pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR-TH表达载体序列与参考序列一致,构建出来的慢病毒载体在293FT细胞中包装成功,并通过293T细胞测得慢病毒滴度为5×106 TU/ml。结论:成功构建了TH的慢病毒干扰载体pLenti6/V5-DEST-TH,为利用RNA干扰技术进一步研究TH基因的功能和作用奠定了基础。
- 刘燕彭聿平黄彦黄慧伟邱一华
- 关键词：微小RNA慢病毒载体酪氨酸羟化酶
