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刘燕: 作品数：127 被引量：223H指数：8; 供职机构：浙江省农业科学院更多>>; 发文基金：国家兔产业技术体系建设项目浙江省重点科技计划浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>

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一种兔波氏杆菌外膜蛋白及其制备方法和用途: 本发明公开了一种兔波氏杆菌外膜蛋白及其制备方法和用途，该外膜蛋白为外膜蛋白PPP或外膜蛋白PL，所述外膜蛋白PPP包含：如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，所述外膜蛋白PL包含：如SEQ ID NO.2所示的核苷酸...; 刘燕鲍国连韦强肖琛闻季权安黄叶娥李科; 文献传递

鸭疫里默氏杆菌PCR快速检测方法的建立被引量：5: 2012年; 鸭疫里默氏杆菌病对养鸭业危害严重,传统及常规检测方法均有不足,因此有必要建立起一种更加快速简捷、敏感实用的菌落PCR法。根据GenBank公布的鸭疫里默氏杆菌ATCC株OMPA基因序列,在基因保守区设计特异性引物,直接挑取单菌落作为模板,从分离鉴定的1,2,10,11型15株菌及1,2,10,11型4株参考菌株中均能扩增出大小为670 bp的特异性核酸片段,而对照的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性;将培养菌用TE作10倍梯度稀释,最低检出限量为80个鸭疫里默氏杆菌;建立的菌落PCR与常规PCR法比较,两种方法均能扩增出相同的特异性条带。结果表明,菌落PCR法具有较好的特异性和敏感性,与常规PCR法结果完全一致,且更加快速简捷,在临床应用上具有更好的实用价值。; 季权安刘燕肖琛闻韦强霍翠梅鲍国连; 关键词：菌落PCR 常规PCR 鸭疫里默氏杆菌

兔波氏杆菌免疫保护蛋白研究: 兔波氏杆菌病是由波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)引起的一种家兔慢性呼吸道传染病,给养兔业带来了严重的的经济损失,目前临床尚无有效防控疫苗。细菌外膜蛋白(Outer membrane p...; 刘燕陈辉韦强肖琛闻季权安鲍国连; 关键词：波氏杆菌保护效力亚单位疫苗; 文献传递

兔支气管败血性波氏杆菌fimN基因的原核表达被引量：2: 2011年; 应用PCR方法扩增兔支气管波氏杆菌(Bb)的菌毛蛋白基因(fimN),将fimN基因克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET28a-fimN。将此重组质粒转化受体菌BL21后,用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达蛋白分子量大小约为27 kD,与理论预期值相符。用Western-blot试验分析纯化的表达产物,结果表明,该重组蛋白能与Bb阳性血清发生特异性反应。; 章春桃刘燕韦强肖琛闻鲍国连季权安; 关键词：波氏杆菌纯化

不同血清型鸭疫里默杆菌外膜蛋白免疫原性分析: 鸭疫里默菌病是由鸭疫里默杆菌(Riemerella anatipestifer,Ra)引起的一种严重危害雏鸭和幼龄鸭的接触性传染病,5～7日龄即可发病,2～3周龄雏鸭大批死亡,对养鸭业危害极为严重。Ra的血清型目前报道的...; 刘燕韦强鲍国连季权安; 文献传递

兔支气管败血波氏杆菌外膜囊泡的制备及其蛋白质成分分析被引量：1: 2021年; 本研究旨在确立兔波氏杆菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)最佳制备工艺。以兔波氏杆菌毒力较强菌株FX-1为研究对象,筛选出制备OMVs的最优方法,并对培养时间、抗生素添加量及过滤方法进行逐一优化。采用透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)、纳米颗粒追踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)等方法分析OMVs的理化性质;采用考马斯亮蓝法(Bradford法)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)及液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测OMVs的蛋白质含量及组分。试验结果显示,超滤浓缩法是制备兔波氏杆菌OMVs的较适方法,采用该方法的最佳培养时间、头孢氨苄质量浓度和过滤方法分别为18 h、64μg/mL和0.45μm滤膜过滤一次。制得的OMVs呈纳米级球形囊泡,平均直径为127.83 nm±0.68 nm。蛋白质分析结果表明,OMVs上包含多种与兔波氏杆菌毒力和感染机制有关的蛋白质。该制备工艺能够显著提高兔波氏杆菌OMVs的产量,为其工业化生产提供了可能;对其结构和蛋白质成分的分析,为研发新型亚单位疫苗提供了科学依据。; 南黎黄叶娥肖琛闻王志鹏韦强季权安李科刘燕鲍国连; 关键词：支气管败血波氏杆菌

兔多杀性巴氏杆菌16S rRNA PCR检测方法的建立被引量：4: 2012年; 为建立一种快速准确检测兔多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的PCR方法,本研究以P.multocida的高度保守的16S rRNA为靶基因,参考已公布的P.multocida的16S rRNA基因设计1对特异性引物,优化PCR反应条件,建立了P.multocida PCR快速检测方法。该PCR方法的敏感性达到60 cfu/mL,采用该PCR方法扩增P.multocida标准株和分离株均能扩增出643 bp的目的片段,扩增兔大肠杆菌、支气管败血波氏杆菌结果为阴性,证明本实验所建立的P.multocida PCR检测方法快速、敏感、特异、可靠,可用于P.multocida的快速鉴定与诊断。同时用建立的PCR方法对临床疑似病兔的脏器分离菌进行扩增,可扩增出目的条带,与细菌的分离结果相一致。; 季权安刘燕庞安娜肖琛闻韦强鲍国连; 关键词：多杀性巴氏杆菌 PCR RRNA

支气管败血波氏杆菌外膜蛋白双向电泳图谱的建立: 2012年; 为建立支气管败血波氏杆菌(Bb)外膜蛋白(OMPs)双向电泳(2-DE)图谱,本研究利用碳酸钠法提取OMPs,并分别对裂解液、pH值、上样量、聚焦条件、染色方法等进行优化。2-DE结果表明,用裂解液5 MUrea、2 M Thiourea、2%CHAPS、2%SB3～10溶解蛋白,pH4～7的13 cm线性胶条考染上样量为750μg、银染上样量为75μg,聚焦条件为500 V,2 h,1 000 V,1 h,8 000 V,2∶30 h,8 000 V,4 h时,能获得聚焦良好、分离清晰的Bb OMPs图谱。本研究首次建立了Bb OMPs的2-DE图谱,为其蛋白质组学研究奠定了基础。; 秦风彦刘燕韦强肖琛闻鲍国连季权安姚火春; 关键词：波氏杆菌外膜蛋白双向电泳

包膜丁酸钠对肉鸭肠道黏膜形态和消化酶活性的影响被引量：8: 2014年; 以北京鸭为对象,研究了包膜丁酸钠对肠道黏膜形态和消化酶活性的影响。选用1日龄北京鸭240只,分别饲喂:基础日粮;基础日粮+500 g·t-1包膜丁酸钠;基础日粮+1 000 g·t-1包膜丁酸钠;基础日粮+40 g·t-1杆菌肽锌。分别在鸭21日龄和42日龄,每个重复分别取2只鸭的十二指肠、空肠和回肠制作石蜡切片,测量绒毛长度和隐窝深度,计算绒隐比(V/C),并对各组肉鸭十二指肠内容物中的消化酶活性进行测定。结果表明:与对照组和抗生素组相比,添加包膜丁酸钠对肉鸭十二指肠绒毛长度和隐窝深度改善效果明显,1 000 g·t-1包膜丁酸钠添加组显著增加了空肠的绒毛长度、降低了隐窝深度(P<0.05),1 000 g·t-1包膜丁酸钠添加组对肠道黏膜形态的改善作用优于500 g·t-1添加组。同时包膜丁酸钠显著提高了十二指肠中脂肪酶的活性(P<0.05)。日粮中添加包膜丁酸钠能有效改善肉鸭肠道黏膜的形态,提高脂肪酶活性,促进肉鸭肠道健康。; 贾凤刘燕韦强肖琛闻季权安李科鲍国连; 关键词：包膜丁酸钠肉鸭消化酶活性

兔皮肤真菌病流行病学调查及病原分离鉴定: 兔皮肤真菌病已成为当前危害养兔业最为严重的皮肤病,近年来在我省及全国各地流行,由于该病的传染性极强,兔场一旦感染便很快传遍整个兔场,电由于该病的顽固性,染病兔场很难根除,因此严重影响养兔业的发展和养殖者的经济效益。有许多...; 韦强肖琛闻季权安刘燕鲍国连; 文献传递

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