刘志科
- 作品数：40 被引量：108H指数：6
- 供职机构：河南科技学院动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程经济管理更多>>
- 兔脑炎原虫病快速诊断的临床病理学研究被引量：7
- 2013年
- 为了在临床上能快速检出兔脑炎原虫,尽快诊断兔脑炎原虫病,对病兔进行了尿沉渣涂片的特殊染色、尿沉渣透射电镜的负染色、肾触片的特殊染色和肾病理组织学切片的比较观察。就尿沉渣涂片和肾触片的特殊染色而言,经光学显微镜检查,可从涂片和触片上的肾小管上皮细胞内检出兔脑炎原虫及其假囊,据此可对兔脑炎原虫病做出快速诊断。而对尿沉渣透射电镜的负染色和肾病理组织切片的检查,可与尿沉渣涂片检查结果相互印证,使临床诊断更加准确。结果表明,尿沉渣涂片和肾触片的特殊染色是临床上用于诊断兔脑炎原虫病的一种快速、准确和简便的新方法。
- 潘耀谦刘兴友王选年银梅唐海蓉李瑞珍刘志科孙玉倩
- 关键词：兔脑炎原虫病临床病理学尿沉渣
- 鸡沙门氏菌病检测方法的建立及初步应用
- 鸡沙门氏菌病由一种或多种血清型沙门氏菌引起鸡最常见的一种传染病，根据抗原结构主要分为鸡白痢、鸡伤寒和鸡副伤寒，严重威胁着养禽业的发展。为此，针对该病研制出快速、特异、灵敏高的检测方法迫在眉睫。本课题主要开展的研究工作如下...
- 刘志科
- 关键词：鸡沙门氏菌病胶体金
- 一例典型病死的贵宾犬感染犬瘟热病毒的病理学诊断报告
- 刘志科张秋雨陈创夫
- 沙门菌LAMP可视化检测方法的建立与应用被引量：6
- 2018年
- 建立沙门菌病原体的一种可目视化环介导等温扩增技术(LAMP),实现对沙门菌的高效快捷检测。针对沙门菌的invA基因的高度保守区域,设计一套特异性引物,优化LAMP扩增反应体系和条件,并对该方法的特异性、灵敏性和人工污染样品以及临床样品分别进行检测。与传统的细菌分离与鉴定、PCR和real-time PCR方法进行敏感性比较。该方法优化后的最佳反应体系为内外引物浓度比例为3∶1,dNTPs为2.5μL,MgSO_4为1.5μL,2.5μL甜菜碱(10mol/L),1μL Bst 2.0DNA聚合酶,在62℃恒温条件下反应50min,可以特异性检出沙门菌,而对其他非沙门菌病原的检测结果为阴性。该方法的最低检测线为1.0×10~2 CFU/mL,灵敏度是常规PCR检测方法的1 000倍,与real-time PCR方法的灵敏度基本接近;针对人工污染沙门菌的鱼粉其检测灵敏度为5.0×10~2 CFU/mL;对临床样品的检出率为65.4%,与传统检测方法的检出率一致。本研究建立的LAMP检测沙门菌的方法特异性强、灵敏度高、操作简便、效能高和可视化,为基层监管部门和畜牧兽医工作者对于沙门菌病原的监控和初步筛选提供了技术保障。
- 刘志科张洁杨宁宁徐锦凤徐明国荆明龙吴文星曹旭东任艳石峰陈创夫
- 关键词：沙门菌环介导等温扩增技术
- 鸡白痢沙门氏菌胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制及初步应用被引量：19
- 2018年
- 为了建立一种适合基层现场的鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)抗体检测方法,以S.pullorum的基因组为模板,利用PCR方法扩增inv A基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化inv A融合蛋白,Western-blot和ELISA进行分析;采用30 nm的胶体金溶液标记山羊抗鸡Ig Y,并对金标抗体的质量浓度和p H值进行优化;在NC膜上分别包被inv A融合蛋白和鸡Ig Y作为检测线和质控线,评估其特异性、灵敏性和稳定性.用该方法对临床的195份血清进行检测,平板凝集试验验证其准确性.结果表明:构建的inv A重组蛋白质粒在大肠杆菌BL21中成功高效表达,获得的蛋白纯度较高,经Western-blot和ELISA方法证实具有良好的反应原性.该试纸条最佳胶体金标记的p H值为7.6,抗体质量浓度为1.3 mg/m L,方法的灵敏性与平板凝集试验的灵敏性一致,与其他病原菌无交叉反应.对195份临床样本进行检测,其结果与平板凝集试验的符合率为96.43%.研究建立的S.pullorum胶体金免疫层析检测试纸条具有方便、快捷、安全和灵敏度高等优势,可用于S.pullorum抗体的早期检测和流行病学筛查.
- 刘志科杨宁宁徐明国荆明龙曹旭东陈创夫
- 关键词：鸡白痢沙门氏菌
- 绵羊痘的诊断及综合防治措施被引量：5
- 2017年
- 绵羊痘是由绵羊痘病毒引起绵羊最为常见的一种急性热性接触性传染病,也是羊痘中危害最为严重的一种。临床上的典型特征为皮肤和黏膜出现明显的痘疹,又俗称“羊天花”。世界动物卫生组织（OIE）将此病列为A类动物疫病,而我国一直将其作为必须法定通报的一类动物传染病。羔羊和青年羊比成年羊易感,感染率和致死率也较高。1病原体绵羊痘病毒属于痘病毒科山羊痘病毒属的成员。
- 刘志科张秋雨陈创夫
- 关键词：绵羊痘病毒动物传染病成年羊痘疹痂皮
- 一例兔黏液瘤病的诊断报告
- 刘志科张秋雨陈创夫
- 鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
- 2017年
- 为了建立一种快速、高效和简便的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法,根据沙门菌侵袭蛋白基因invA的高度保守区域,利用Primmer 5.0软件设计2对特异性的套式引物,以提取的沙门菌DNA为模板克隆invA基因,将其连入T载体并计算拷贝数作为套式PCR的模板,在对反应条件进行优化的基础上,建立最佳的套式PCR反应条件,确定其上、下游引物用量分别为0.3μL,套式PCR的第1次退火温度为57.4℃,第2次为53.5℃。应用该方法对已构建好的不同浓度的标准阳性质粒作为模板进行检测,其灵敏度为102拷贝数/20μL,远高于常规PCR的106拷贝数/20μL。用建立的套式PCR方法对从新疆石河子某鸡场采集的25样品进行检测,与传统的诊断方法比较符合率达95.00%。建立的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法具有快速、可行、特异性强、准确率高等特点,为鸡沙门菌病的早期诊断和研究提供了技术支撑。
- 刘志科李村院张秋雨刘洋马亚茹王月丽陈创夫
- 关键词：鸡白痢沙门菌套式PCR常规PCR灵敏性
- 一种新的豆状囊尾蚴:无钩豆状囊尾蚴
- 观察相对静止的豆状囊尾蚴时,用眼科剪将囊泡剪破,放出囊液,再用眼科镊将粘附在囊壁上的头节、颈节和连体小心取下,经清洁处理后放入2.5％戊二醛溶液中固定.为了观察处于相对运动状的豆状囊尾蚴,先将发育良好的豆状囊尾蚴的囊泡放...
- 潘耀谦刘兴友李瑞珍刘志科孙玉倩
- 关键词：兽医学超微结构
- 一例绵羊肝片吸虫病的中西医结合疗法及体会被引量：2
- 2017年
- 肝片吸虫属于片形科片形属,其发育过程需要中间宿主椎实螺。羊肝片吸虫病是肝片吸虫寄生在羊的肝脏和胆管内引起的慢性或急性肝炎和胆管炎,并伴有发育障碍和全身性中毒的现象,是危害羊的最为严重的蠕虫病之一。其中羔羊和成年绵羊感染率最高,可引起大批死亡,对养羊业危害相当严重[1]。笔者在2015年遇到一例典型的绵羊肝片吸虫病,结合多年的工作经验,最后采用中医辅助西医的疗法进行治疗,效果显著,现将该病的诊治体会报道如下,
- 刘志科张秋雨陈创夫
- 关键词：中西医结合疗法肝片吸虫病绵羊中间宿主急性肝炎发育障碍
