刘季芳
- 作品数:11 被引量:50H指数:4
- 供职机构:湖南师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 新型和改良多倍体鱼研究
- 刘少军刘筠周工健罗凯坤姚占州刘锦辉段巍郭新红刘季芳陶敏张纯覃钦博龙昱颜金鹏王静孙远东
- 该项目得到国家自然科学基金重点课题、面上课题(2项)、科技部农业科技成果转化基金等课题的资助。鱼类是脊椎动物中种类最多的动物,自然界中许多鱼的染色体数目呈现接近倍性分布。具有不同染色体数目的鱼是怎样形成的?这是值得研究的...
- 关键词:
- 关键词:遗传育种生物进化
- 异源四倍体鲫鲤Sox9a基因保守区序列的克隆及内含子剪接位点分析被引量:13
- 2004年
- 用特异于HMG box保守区的兼并引物扩增了异源四倍体鲫鲤及其原始亲本 (红鲫和鲤鱼 )的Sox基因 .异源四倍体鲫鲤的扩增产物共有 4条带 ,大小分别约为 2 0 0 ,6 0 0 ,90 0和1 90 0bp,而其原始亲本的扩增产物只有 3条带 ,且在雌雄个体中未发现性别特异扩增带 .回收雄性四倍体鱼 6 0 0bp扩增带 ,经亚克隆及测序分析得到一个新的编码 71个氨基酸残基的基因 .该基因与虹鳟鱼 (Oncorhynchusmykiss)、蟾蜍 (Xenopuslaevis)、鲤鱼 (Cyprinuscarpio)等的Sox9基因相似性达 97% ,据此命名为Atsox9a .通过计算机分析和RT PCR方法确定该基因含有内含子 ,并获得其内含子的序列和剪切位点 ,此内含子剪切位点在进化上是保守的 .
- 刘季芳刘少军张纯孙远东颜金鹏刘筠
- 关键词:异源四倍体鲫鲤克隆内含子性别决定
- 一种用于研究鱼类遗传关系的DNA分子标记方法
- 本发明涉及鱼类的DNA分子标记技术。本发明选择Sox基因族的HMG(High mobilitygroup)保守区域为分子克隆的目标,设计独特简并引物,应用PCR、琼脂糖凝胶电泳等方法获得在数目和种类上有差异的Sox基因的...
- 刘少军刘筠刘季芳李伟陶敏
- 文献传递
- 多倍体鲫鲤被引量:28
- 2003年
- 经过十多年的研究 ,在世界上首次研制出雌雄两性能育、遗传性状稳定的异源四倍体鲫鲤群体。两性可育四倍体鱼群体连续繁殖了 11代 (F3- F1 3) ,形成了一个染色体数目为 2 0 0的新鱼种。用四倍体鲫鲤群体为父本与二倍体鱼母本交配大规模生产了具有生长速度快、不育等优点的三倍体鱼。本文介绍四倍体、三倍体鱼的生物学特性、生物学意义和产生的影响。
- 刘筠刘少军孙远东张纯冯浩刘季芳郭新红周工健张轩杰
- 关键词:遗传性状染色体数目生物学特性
- 异源四倍体鲫鲤性别决定相关基因Sox9的克隆及表达研究
- 本文综合运用PCR亚克隆、RT-PCR以及Northern、Southern杂交等分子生物学技术,对异源四倍体鲫鲤性别决定相关基因Sox9进行了研究,主要结论如下:
/(1/)用特异于HMG-...
- 刘季芳
- 文献传递
- 不同倍性鲫鲤鱼Dmc1基因cDNA的克隆及其表达分析被引量:5
- 2007年
- 酵母菌Dmc1(disrupted meioticc DNA)基因是一个在减数分裂前期Ⅰ表达的特异基因,其产物是减数分裂同源染色体配对所必需的.根据酵母菌、小鼠以及人的DMC1中保守氨基酸序列合成简并引物,分别克隆了二倍体红鲫(Carassius auratus red var.)、湘江野鲤(Cyprinus carpioL.)、日本白鲫(Carassius cuvieri)、三倍体湘云鲫和异源四倍体鲫鲤Dmc1基因部分cDNA序列.通过cDNA末端快速分离法(RACE)进一步获得了以上5种鱼Dmc1的cDNA全长,其中红鲫Dmc1、湘江野鲤Dmc1和日本白鲫Dmc1全长均为1375bp,三倍体湘云鲫Dmc1全长1383bp,异源四倍体鲫鲤Dmc1全长1379bp,这5种鱼各自都编码342个氨基酸.结果表明,红鲫、湘江野鲤和日本白鲫的DMC1蛋白的氨基酸同源性高达97.3%,说明DMC1蛋白在这3种鱼里具有高度保守性;而三者与已知序列的人、小鼠和斑马鱼(Danio rerio)DMC1蛋白的氨基酸同源性分别为86%,86%和95%.以分离得到的不同倍性鱼Dmc1基因编码区中完全相同的序列设计特异引物进行表达分析.RT-PCR结果表明,Dmc1只在性腺中表达,在其他组织中不表达;通过实时荧光定量PCR(real-time PCR),对Dmc1基因在繁殖季节的二倍体红鲫,三倍体湘云鲫,四倍体鲫鲤性腺中的表达进行分析,发现Dmc1在不同倍性鱼的性腺表达有差异,在卵巢和精巢均表现为:三倍体表达最高,二倍体次之,四倍体的表达最弱,特别是在三倍体卵巢的表达远高于在二倍体和四倍体的表达.同时,对这3种鱼的性腺进行组织切片分析,发现二倍体和四倍体鱼的性腺发育良好,且四倍体成熟度高于二倍体,而三倍体鱼性腺发育缓慢未达到性成熟,特别是卵巢的发育相当不好.由此可见,在不同倍性鲫鲤鱼中Dmc1基因也是减数分裂特异的基因,其表达与倍性无显著的相关性,而与性成熟相关;并且在三倍体卵巢中的过量表达可能与其减数分裂异常及其不育有关.
- 陶敏刘少军龙昱曾琛刘季芳刘良国张纯段巍刘筠
- 关键词:二倍体三倍体四倍体性腺发育
- 异源四倍体鲫鲤及其原始亲本Sox9基因HMG保守区内含子遗传变异性分析被引量:2
- 2007年
- 参照不同物种中Sox基因HMG保守区序列设计简并引物,扩增了异源四倍体鲫鲤及其原始亲本红鲫(Carassius carassiusred var.)和鲤鱼(Cyprinus carpioL.)的Sox基因.对不同片段大小的Sox基因测序,结果表明,四倍体鱼中存在两个Sox9基因(Atsox9a和Atsox9b),红鲫和鲤鱼中只发现一个Sox9基因(Rcsox9a和Ccsox9b).这4个Sox9基因在HMG盒中均含有内含子,大小分别为413bp,703bp,401bp和714bp,其插入位点遵守GT-AG法则.其中Atsox9a与Rcsox9a,Atsox9b与Ccsox9b的内含子序列都具有很高的一致性,分别为94.4%和97.8%,这表明内含子序列变异率较低.有趣的是,根据它们的外显子所推导的氨基酸序列一致性均为100%.因此,四倍体鱼及其原始亲本Sox9基因HMG基序内含子不仅具有长度多态性,而且内含子之间存在遗传变异性,这为进一步探讨异源四倍体鲫鲤的起源和进化提供了重要的分子生物学证据,同时也为正确掌握内含子的位置信息,功能和进化起源有着十分重要的作用.
- 刘季芳刘少军陶敏李伟刘筠
- 关键词:SOX9内含子系统发育
- 异源四倍体鲫鲤Sox基因及黄鳝类固醇激素合成酶研究
- Sox基因家族是在动物中发现的一类新的编码转录因子的基因家族,其产物具有一个HMG基序保守区,参与诸如性别决定、骨组织的发育、血细胞生成、神经系统的发育、晶状体的发育等多种早期胚胎发育过程。世界上首次培育成功的两性可育异...
- 刘季芳
- 关键词:异源四倍体鲫鲤黄鳝SOX基因转录因子
- 文献传递
- 一种用于研究鱼类遗传关系的DNA分子标记方法
- 本发明涉及鱼类的DNA分子标记技术。本发明选择Sox基因族的HMG(High mobilitygroup)保守区域为分子克隆的目标,设计独特简并引物,应用PCR、琼脂糖凝胶电泳等方法获得在数目和种类上有差异的Sox基因的...
- 刘少军刘筠刘季芳李伟陶敏
- 文献传递
- 不同倍性鱼cdc2基因cDNA部分序列的克隆及其在卵巢中的表达分析被引量:5
- 2006年
- 利用3-’RACE的方法分别从异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫、二倍体红鲫的卵巢中克隆了cdc2基因cDNA的部分序列.选取这3种鱼cdc2 cDNA中一段长为157 bp的保守片段设计特异引物,通过Real-time PCR检测cdc2 mRNA在这3种不同倍性鱼卵巢中的表达水平,结果表明cdc2转录量随着倍性的递增而相应升高.
- 曾琛陶敏刘少军刘季芳
- 关键词:异源四倍体鲫鲤三倍体湘云鲫红鲫CDC2