冯国兴
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
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- 山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体的构建
- 2012年
- 为了构建在哺乳动物细胞中表达的山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体,试验根据克隆到T载体上的山羊TLR2测序结果,设计1对不含终止子的引物,将山羊TLR2 PCR产物连接到pEGFP-N1载体上,用磷酸钙法转染293T细胞,并在荧光显微镜下观察。结果表明:重组质粒经酶切和测序鉴定正确,且在293T细胞中表达;融合蛋白发出绿色荧光,表明TLR2-EGFP主要分布在细胞膜上。说明试验成功地构建了pEGFP-TLR2-N1绿色荧光蛋白融合载体。
- 潘求真冯国兴李姗姗张弘韬崔玉东连正兴
- 关键词：山羊绿色荧光蛋白基因表达
- 外源Toll样受体2转基因绵羊的构建与鉴定被引量：3
- 2013年
- Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)是识别革兰氏阳性细菌如引起羊乳腺炎、炭疽病、破伤风等病原体的一种重要受体,而TLR2过表达转基因羊为研究TLR2在防卫细菌侵染中的作用提供了一个理想的模型。因此,研究首先通过显微注射TLR-2过表达载体3S-Loxp-TLR2的方法对绵羊进行外源基因TLR2整合,然后采用PCR和Southern blot方法对其进行鉴定、拷贝数验证和表达量分析。结果表明,注射148个受精卵,共产下15只小羊,其中8只小羊检测为阳性,转基因率为53.3%;Southern杂交结果发现转TLR2小羊的基因组中外源TLR2基因均为单拷贝;且转基因羊TLR2 mRNA表达高于对照。说明成功构建了转TLR2基因羊。
- 张弘韬潘求真冯国兴邓守龙连正兴
- 关键词：绵羊TLR-2转基因
- 山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体的构建
- 目的构建在哺乳动物细胞中表达的山羊TLR2绿色荧光蛋白融合表达载体。方法根据克隆到T载体上的山羊TLR2测序结果，设计一对不含终止子的引物，将山羊TLR2 PCR产物连接到pEGFP-NI载体上，用磷酸钙法转染293T细...
- 潘求真冯国兴李姗姗张弘韬崔玉东连正兴
- 关键词：山羊绿色荧光蛋白基因表达
- 利用多重PCR技术快速鉴定小鼠的性别被引量：2
- 2010年
- 为了快速鉴定小鼠的性别,试验根据GenBank及参考文献针对小鼠设计了2对引物IL3-1、IL3-2和SRY-1、SRY-2进行多重PCR,对15日龄小鼠胚胎进行了性别鉴定。结果表明:雄性样品扩增出了544 bp和402 bp 2条片段,而雌性样品只能扩增出1条544 bp的片段。
- 潘求真冯国兴郑晓亮马国达
- 关键词：多重PCR性别鉴定细胞小鼠
- 山羊Toll样受体2基因的克隆及过量表达
- Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是病原相关分子模式的识别受体,通过对病原微生物的识别来激活先天性免疫和获得性免疫。Toll样受体2(TLR2)是Toll样受体家族中识别配体种类最多的一种...
- 冯国兴
- 关键词：基因克隆基因表达融合蛋白
- 文献传递
- 优化克隆抗病绵羊胚胎技术的研究
- 体细胞介导的核移植技术是目前转基因动物研究者备受青睐的方法。以休细胞介导的核移植技术中，外源基因首先通过转染进入体细胞，然后通过药物筛选得到永久性地整合到细胞染色体组上的阳性细胞克隆。本研究旨在应用体细胞核移植技术生产抗...
- 邓守龙冯国兴连正兴
- 关键词：转基因动物体细胞核移植绵羊胚胎
- 文献传递
- 山羊Toll样受体2基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2011年
- 为了研究山羊Toll样受体2(TLR2)基因,试验采用RT-PCR技术,根据已发表的牛、猪、绵羊TLR2基因序列的保守区设计1对引物,扩增山羊TLR2基因的cDNA,连接T载体,克隆测序得到长度为2 355 bp的序列,提交至GenBank(序列号为GU984768.1),分析TLR2基因的核酸和氨基酸序列并与其他物种的TLR2基因序列比对。结果表明:所得序列与绵羊、印度大蓝羚、牛等序列的同源性大于95%,所得序列的二级结构经预测分析符合Toll样受体家族的特征。
- 冯国兴潘求真李姗姗崔玉东连正兴
- 关键词：RT-PCR
