余琪琪
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金:湖南省自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人天然CD4^+CD25^+调节性T细胞的体外扩增培养及鉴定被引量:1
- 2014年
- 目的:建立有效的体外培养扩增人天然CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的体系,并检测扩增细胞的表型及体外免疫抑制功能,为Treg应用于临床免疫治疗提供实验基础。方法:免疫磁珠分离(MACS)方法从人外周血单个核细胞中分离CD4+CD25+Treg,加入抗CD3/CD28包被磁珠刺激扩增;用台盼蓝染色法测定新鲜分选的和扩增的Treg的数量和活性,用流式细胞法检测新鲜的和扩增的Treg主要表型标志和纯度,用混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)法检测扩增的Treg对羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酶(CFSE)标记的自体和异体的CD4+CD25–T细胞增殖的抑制作用。结果:扩增3周后Treg数目约为新鲜分选细胞数的2 000倍(由5.23×105±1.52×105扩增至1.02×109±0.20×109),活性>97%。扩增3周后的Treg与新鲜分选细胞保持了相似的表型特征:CD4+CD25+FoxP3+三阳细胞约占(94.22±2.12)%,与新鲜分选细胞相似。扩增3周后的Treg对自体和异体的CD4+CD25–T细胞的增殖均有明显的抑制作用,抑制率随着效靶比浓度的增高而增高(P<0.01),而且其各浓度梯度对自体和异体CD4+CD25–T细胞的抑制率无明显差异(P>0.05)。结论:创建的分离和体外扩增人CD4+CD25+Treg的方法,可以大量扩增出高纯度且保留其免疫抑制功能的Treg,解决了Treg数目少的问题,有利于进一步的免疫研究和治疗。
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- 关键词:体外扩增免疫抑制
- 胰升糖素样肽1类似物利拉鲁肽对正常人和1型糖尿病患者CD4+CD25-T细胞增殖的影响被引量:3
- 2013年
- 目的观察胰升糖素样肽1(GLP—1)类似物利拉鲁肽对正常人和新发1型糖尿病患者外周皿CD4+CD25-T细胞增殖的影响,评价利拉鲁肽对1型糖尿病可能的免疫调节作用。方法免疫磁珠法分离10名正常人和10例新发1型糖尿病患者的外周血CD4+CD25T细胞.用CD3/CD28单抗包被的T细胞扩增磁珠刺激增殖。以CFSE染色通过流式细胞术比较在不同浓度利拉鲁肽(0、25、50和100nmol/ml)干预后,对CD4+CD25+T细胞增殖的影响。结果(1)利拉鲁肽剂量依赖性抑制正常人和新发1型糖尿病患者的CD4+CD25+T细胞的增殖(各干预浓度组间P〈0.05);(2)在利拉鲁肽各干预浓度组,1型糖尿病患者的CD4+CD25T细胞的增殖作用显著强于正常人的CD4+CD25T细胞(P〈0.01):(3)利拉鲁肽对正常人和新发1型糖尿病患者的CD4+CD25T细胞增殖的抑制程度则无明显差别(P〉0.05)。结论1型糖尿病患者的CD4+CD25+T细胞的增殖作用显著增强,提示1型糖尿病患者存在细胞免疫紊乱。利拉鲁肽在体外对CD4+CD25-T细胞的增殖具有抑制作用,这种免疫负性调节作用使其在1型糖尿病治疗方面具有潜在的应用价值,
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- 关键词:胰升糖素样肽1利拉鲁肽CD4+CD25+T细胞免疫调节
- GLP-1类似物利拉鲁肽对正常人和1型糖尿病患者CD4+CD25-T细胞增殖的影响
- 目的:观察GLP-1类似物利拉鲁肽对正常人和新发1型糖尿病患者外周血CD4+CD25-T细胞增殖的影响,评价利拉鲁肽对1型糖尿病的免疫调节作用。方法:免疫磁珠法分离10例正常人和10例新发1型糖尿病患者的外周血CD4+C...
- 胡瑛苏欣刘灵佳向宇飞余琪琪易受南周智广