余乐涵
- 作品数：54 被引量：234H指数：9
- 供职机构：南昌大学医学院更多>>
- 发文基金：江西省科技支撑计划项目江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学历史地理更多>>
- CpG岛靶向siRNA诱导P16沉默的甲基化分析
- 2013年
- 目的探讨RNA介导DNA甲基化(RdDM)是否参与哺乳动物细胞中P16基因的甲基化沉默。方法将靶向P16基因CpG岛不同位点(启动子区和外显子区)的小干扰RNA(siRNA),分别转染人胃癌细胞系BGC823,用RTPCR、免疫印迹检测P16基因的表达,用甲基化特异性PCR(MSP)和克隆测序等分析DNA甲基化。结果靶向P16基因启动子与外显子区域的siRNA均能诱导P16基因表达的降低,但两者都不能诱导同源序列DNA甲基化。结论在BGC823细胞系上,siRNA不能通过甲基化诱导方式调控P16基因的表达。
- 杨晓红黄孝天朱伟锋刘卓琦余乐涵李华王晟罗达亚
- 关键词：CPG岛SIRNAP16
- 牛磺酸对缺血-再灌注大鼠血浆心肌肌钙蛋白T及心肌GRP78、Caspase-12表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨牛磺酸(taurine,Tau)对心肌缺血-再灌注损伤时血浆心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cT-nT)及心肌葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、胱天蛋白酶(Caspases)-12表达的影响及其意义。方法将50只大鼠按随机数字表法分为5组:假手术组(对照组,Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和Tau保护1组(Tau 1组)、Tau保护2组(Tau 2组)、Tau保护3组(Tau 3组),每组10只。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支1h,随后再灌注24h以建立心肌缺血-再灌注损伤动物模型;Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组分别在结扎冠状动脉前1h腹腔注射Tau 100、200、300mg·kg-1,余操作同I/R组;Sham组大鼠冠状动脉左前降支仅穿线,不结扎。采用酶联免疫法测定血浆cTnT水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,RT-PCR法和免疫组织化学法分析心肌细胞GRP78、Caspase-12基因表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果与Sham组比较,I/R组大鼠血浆cTnT、心肌组织中GRP78、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均显著升高(均P<0.01);与I/R组比较,Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组大鼠血浆cTnT水平、心肌组织中GRP78mRNA、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均呈显著降低(均P<0.05)。结论 Tau可显著减轻心肌缺血-再灌注损伤,其作用机制可能是Tau能下调缺血-再灌注心肌中GRP78和Caspase-12过表达。
- 余乐涵万慧芳朱伟锋涂硕李华胡炜华曾昭建万福生
- 关键词：牛磺酸葡萄糖调节蛋白胱天蛋白酶心肌
- “教-赛-训-赛-改”模式促进本科实验教学持续改进的探索与实践被引量：7
- 2021年
- 加强实验实践教育力度,提高大学生创新创业能力,是一流本科人才培养的重要内容。为有效促进实验教学改革和本科生创新能力培养,本团队紧扣“教-赛-训-赛-改”五个环节,以校内“生物化学与分子生物学实验技能竞赛”来检验实验教学效果。选拔科研素质较高的一批本科生参加为期至少一年的科研训练,优秀的学生团队推荐参加全国性高水平竞赛。在此过程中,发掘一些好的科研训练课题转化为本科教学项目,促进实验教学改革。迄今为止,“生物化学与分子生物学实验技能竞赛”已经开展了十届,在校内营造了浓厚的学习氛围,形成了以赛促教、促学、促建和促改的良性循环。十年来,我校本科教学实验室建设、教学内容有了很大改善,学生在全国大赛上成绩突出。十年的改革实践表明,“教-赛-训-赛-改”,头尾相扣、相互促进,为我校生物化学与分子生物学实验教学改革和本科高素质人才培养注入了持续动力。
- 涂硕余乐涵揭克敏罗达亚谢彩凤朱伟锋胡晓鹃杨晓红黄春洪
- 关键词：实验教学创新创业
- 先天性弓形虫病产前监测程序的研究被引量：7
- 1998年
- 目的为减少官内感染和先天畸形，我们设计了弓形虫病的产前监测程序。方法采用ELISA法作为血清筛查的基本方法，绒毛、羊水和脐血用ELISA、PCR或小白鼠接种法进行监测。结果筛查出1192例监测对象，除271例拒绝监测外，无症状组509例，有先兆流产组113例，羊膜穿刺组299例。结论本研究结果提示，只要按程序监测，先天性弓形虫病是可以控制的。但卫生宣教也是需要的。
- 丁贞英曾小军金寒莹闵玉梅杨光余乐涵熊辉杨蓉谢惠群刘莉
- 关键词：先天性弓形体病产前监测
- 川芎嗪对大鼠肾缺血再灌注损伤的拮抗作用被引量：4
- 2011年
- 目的观察川芎嗪(TMP)对大鼠肾缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法将Wistar大鼠30只随机分为Sham组I、/R组和I/R+TMP组。用夹闭双侧肾蒂45 min再灌注24 h方法制备肾I/R模型。I/R+TMP组在手术前1 h按20 mg/kg腹腔注射TMP液,余操作同I/R组。检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr);光镜和电镜观察肾小管组织结构变化,免疫组化检测GRP78、Caspase-12、Caspase-3蛋白表达。结果与Sham组比较I,/R组大鼠血BUN,Cr水平显著增高,肾组织结构损伤严重,GRP78、Caspase-12、Caspase-3蛋白表达显著增高(P<0.01);与I/R组比较I,/R+TMP组血BUN,Cr水平及GRP78、Caspase-12、Caspase-3蛋白表达均有显著性下降(P<0.01),肾组织结构损伤明显较轻。结论川芎嗪对大鼠肾I/R损伤有较好的拮抗作用,其机制可能是下调内质网应激相关蛋白表达及其活性。
- 王美凤万慧芳龚慧涂硕余乐涵万福生
- 关键词：川芎嗪缺血再灌注损伤内质网应激
- 川芎嗪对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响被引量：3
- 2007年
- 目的观察川芎嗪对缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡的保护及初步机制。方法采用在体结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血再灌注模型。以TUNEL法检测心肌凋亡细胞,免疫组化法分析心肌细胞Fas/FasL、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达变化。荧光分析法测定Caspase-3活性。结果凋亡组(心肌缺血1h,再灌注24h)心肌细胞凋亡指数为16.3±4.52,较对照组(0.43±0.04)有显著性升高,Fas/FasL及Caspase-3蛋白水平也均显著高于正常对照组(P<0.05)。川芎嗪保护组的心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL、Caspase-3蛋白水平及Caspase-3活性均显著性低于凋亡组。结论川芎嗪对缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡有较好的保护作用,其机制可能与降低Fas死亡受体通路中相关蛋白酶水平及其活性有关。
- 章洁刘丽乔余乐涵赵小曼李华万福生
- 关键词：川芎嗪细胞凋亡基因表达信号转导心肌
- 碱裂解法快速提取口腔拭子DNA对CHRNA3基因多态性的研究被引量：3
- 2012年
- 目的建立一种快速的从口腔拭子中提取DNA的方法,研究其在尼古丁乙酰胆碱受体α3(CHRNA3)基因多态性分析中的应用。方法以NaOH和乙二胺四乙酸(EDTA)配制碱裂解液,以三羟甲基氨基甲烷-EDTA(TE)为中和液,经加热裂解和中和两步提取口腔拭子DNA。以提取的DNA为模板,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析对CHRNA3基因的rs6495309进行分型。对不同基因型的样本测序验证。结果 PCR扩增和酶切的靶带清晰,无非特异性条带。酶切结果与测序结果吻合。结论碱裂解法提取口腔拭子DNA具有快速、简便、经济、可靠的特点,可以用于CHRNA3基因多态性的分析。
- 朱伟锋刘卓琦吴金兰余乐涵万福生
- 关键词：碱裂解
- 白英水提物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究被引量：6
- 2009年
- 目的观察白英水提物(SLT)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法常规法制备白英水提物;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5,25和50 mg/ml。MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察SGC-7901细胞凋亡及形态变化,半定量RT-PCR分析基因bcl-xl,bid,caspase-9和caspase-3 mRNA表达。结果与正常对照组比较,3个剂量白英处理组SGC-7901细胞增殖抑制均有显著性增加,且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡呈显著性增多(P<0.05),表现细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;基因bcl-xl mRNA表达显著性下降(P<0.05),bid、caspase-9和caspase-3 mRNA表达有显著性升高(P<0.05),并随白英浓度增加而加强。结论白英能剂量依赖性的抑制SGC-7901细胞增殖和诱导凋亡,其作用可能与调控bcl-xl、bid、caspase-9和caspase-3 mRNA表达相关。
- 吴剑李华涂硕余乐涵万福生
- 关键词：SGC-7901细胞凋亡基因表达
- 运动对1型糖尿病大鼠心肌肌浆网钙调控蛋白表达的影响
- 2008年
- 目的观察运动对1型糖尿病大鼠心肌肌浆网钙调控蛋白表达的影响，并探讨其机制。方法选用健康Sprague—Dawley大鼠，随机分为正常对照组、运动对照组、糖尿病组和糖尿病＋运动组，每组10只。用腹腔注射链脲佐菌素（55mg／kg）法复制糖尿病模型，糖尿病＋运动组大鼠在糖尿病模型建成后第4天开始跑台运动，于运动第4周末心脏采血，制备血清。采用放射免疫法测定血清胰岛素水平，采用RT—PCR法检测肌浆网Ca^2＋-ATP酶（SERCA）、磷酸受纳蛋白（PLB）和Ryanodine受体-2（RyR2）mRNA的表达，采用Western—blotting法检测SERCA2、PLB蛋白的表达。结果与正常对照组相比，糖尿病组血糖、糖化血清蛋白及低密度脂蛋白水平升高，胰岛素和高密度脂蛋白水平降低，心肌SERCA2、PLB、RyR2mRNA和SERCA2、PLB蛋白表达差异无统计学意义；糖尿病＋运动组血糖水平升高，胰岛素水平降低，心肌SERCA2、PLB和RyR2的mRNA表达水平提高，SERCA2、PLB蛋白表达量增加，差异有统计学意义（P〈0．01）。与糖尿病组相比，糖尿病＋运动组大鼠糖化血清蛋白及低密度脂蛋白水平显著降低（P〈0．01），SERCA2、PLB、RyR2mRNA及SERCA2、PLB蛋白表达显著升高（P〈0．01）。结论运动对1型糖尿病大鼠心肌损伤有防治作用，其机制可能与运动上调SERCA2、PLB和RyR2的表达有关。
- 江卫华罗达亚余乐涵段荣万福生
- 关键词：糖尿病钙调控蛋白肌浆网磷酸受纳蛋白
- Fas系统参与介导烧伤后心肌细胞凋亡及牛磺酸的影响被引量：1
- 2005年
- 目的观察Fas系统在烧伤后心肌细胞凋亡中的作用及牛磺酸的影响。方法选健康Wistar大鼠,随机分成对照组(Sham)、烧伤组(造成40%TBSAⅢ度烧伤)和牛磺酸保护组(烫伤后即刻腹腔注射牛磺酸400 mg/kg)。用原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞,RT-PCR检测Fas mRNA表达,免疫组化检测Fas/FasL和Caspase-8/3蛋白表达和荧光法分析Caspase-3活性。结果烧伤组大鼠伤后6 h和24 h心肌细胞凋亡指数分别为8.96±2.10和18.67±2.48,较对照组(0.92±0.34)有显著性升高,Fas蛋白阳性表达指数分别为13.51±1.56和14.55±1.89,也显著性高于对照组(2.46±0.75);Caspase-3活性分别为1.38±0.16和1.96±0.71,较对照组(0.35±0.06)有显著性差异。烧伤组凋亡指数与Fas表达之间有良好的相关性(r=0.86)。牛磺酸保护组细胞凋亡指数为2.14±0.68,Fas蛋白表达为3.71±0.82,Fas mRNA表达为0.17±0.03,Caspase-3活性为0.88±0.16,较烧伤组均有显著性降低。结论Fas系统参与了介导烧伤后心肌细胞凋亡,牛磺酸对烧伤后心肌细胞Fas表达及其信号转导有较好的拮抗作用。
- 万福生龚文华赵小曼余乐涵李华李国辉
- 关键词：FAS细胞凋亡心肌牛磺酸烧伤
