代相鹏
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国科学院动物研究所更多>>
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- 卵母细胞老化对小鼠体细胞克隆胚发育的影响被引量：3
- 2007年
- 就小鼠卵母细胞的卵龄对克隆胚的体外发育能力的影响进行了检测,以确定最佳的取卵时间,以及取卵后进行核移植操作的可耐受的时间。采用PMSG和hCG超排B6D2F1雌鼠。在体内老化实验中,分别于注射hCG后13,15,17,20h取卵用于核移植操作;在体外老化实验中,所有的卵均于注射hCG后13h取出并培养,然后在13,15,17,20h进行核移植操作。每个时间点的核移植操作在1h内完成,重构的胚胎培养1h后进行激活。结果显示:在体内老化实验中,注射hCG后13h取卵,获得的克隆囊胚发育率最高,为56.0%,15h取卵仍维持了其支持胚胎体外发育的能力,但17h及更长时间后取的卵,重构后的囊胚发育率显著下降(18.1%)。注射hCG后15h取的卵孤雌发育率最高(囊胚发育率为90.1%),并在17h仍维持较高的孤雌发育能力,在20h显著下降。在体外老化试验中,于注射hCG后13h取卵,分别于13,15,17h重构,都获得了较高的囊胚发育率(分别为57.7%,52.2%,46.3%),而在注射hCG后20h重构,囊胚发育率显著下降(14.8%)。体外老化的孤雌胚在注射hCG后22h激活时囊胚发育率显著下降。结果表明:卵母细胞在体内和体外老化都影响克隆胚的体外发育,最佳取卵时间为注射hCG后13h,取卵后立即用于重构可获得最佳囊胚发育率;体内、外老化卵支持重构胚较好发育的时间间隔是不同的,体内老化卵支持重构胚发育能力从注射hCG后17h开始下降,体外老化卵则发生在20h。这些结果可以指导操作,有利于在应用核移植进行其他基础研究时降低操作引起的误差。
- 王二耀代相鹏焦丽红周琪王柳
- 关键词：小鼠核移植卵母细胞
- 一种提高体细胞重编程效率的方法
- 本发明提供一种提高体细胞重编程效率的方法，一种提高克隆胚胎的体外发育率的方法，一种提高克隆胚胎的到期发育率的方法，一种提高体外核移植非人类胚胎干细胞建系效率的方法，一种用于胚胎移植的重构胚的体外处理方法，这些方法都包括采...
- 周琪王柳代相鹏侯晓军范勇郝捷
- 文献传递
- 两性小鼠核移植胚胎干细胞系的建立及其在胚胎干细胞多能性评估中的研究
- 2008年
- 治疗性克隆的安全性与风险性是阻碍治疗性克隆发展的关键环节之一.由于受到社会伦理问题的限制,人胚胎干细胞的多能性检测只能通过畸胎瘤的方式鉴定,与传统的小鼠生殖系嵌合鉴定方式不同.但是两种多能性检测方式之间的区别还不清楚.本研究利用遗传突变两性小鼠心肌成纤维细胞作为核移植供体细胞,构建核移植胚胎,经过体外培养获得克隆囊胚,建立核移植胚胎干细胞系.对胚胎干细胞系的鉴定结果表明,两性小鼠核移植胚胎干细胞系表达所有小鼠胚胎干细胞系多能性及特异的分子标记,如碱性磷酸酶活性,Oct4,Nanog,SSEA-1等,干细胞注射到免疫缺陷小鼠(SCID)体内能够形成含有三胚层分化附属物的畸胎瘤组织,证明两性小鼠核移植胚胎干细胞系具有多能性.但通过囊胚注射的方式获得的二倍体嵌合小鼠经过交配不能获得生殖系嵌合的小鼠,因而两性小鼠核移植胚胎干细胞系并不具有全能性,说明体内形成三胚层分化附属物的畸胎瘤组织并不能替代传统的生殖系嵌合,提示在人治疗性克隆胚胎干细胞系多能性鉴定中,仍然需要更多、更严格的标准,进而最大程度地降低治疗性克隆临床应用的风险性.
- 范勇佟曼赵春丽丁晨晖郝捷吕卓代相鹏海棠李雪梅姚汝强于洋李赞东王柳ALICE Jouneau周琪
- 关键词：体细胞核移植胚胎干细胞治疗性克隆
- 通过改变表观遗传状态提高体细胞重编程效率
- 代相鹏
- 关键词：体细胞克隆EDTA
- 一种提高体细胞重编程效率的方法
- 本发明提供一种提高体细胞重编程效率的方法，一种提高克隆胚胎的体外发育率的方法，一种提高克隆胚胎的到期发育率的方法，一种提高体外核移植非人类胚胎干细胞建系效率的方法，一种用于胚胎移植的重构胚的体外处理方法，这些方法都包括采...
- 周琪王柳代相鹏侯晓军范勇郝捷
- 文献传递
