付凡
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
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- 人生长素HGH基因在Bac-to-Bac/BmNPV家蚕杆状病毒表达系统中快速表达
- 长激素(Human growth Hormone，HGH)是由腺垂体分泌的一种在机体生长、发育及代谢中发挥重要作用的激素，具有广泛的生理功能。本实验采用Bac—to-Bac／BmNPV家蚕杆状病毒表达系统，以家蚕为宿主表...
- 付凡陈蔚唐顺明汪生鹏黄金山赵巧玲沈兴家
- 关键词：家蚕
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达瘦素基因
- (leptin)是肥胖基因编码、由脂肪组织分泌的多肽类激素，具有抑制摄食、调节脂肪沉积与能量代谢的功能。本实验利用bac-to-bac昆虫杆状病毒表达系统，将体外克隆的瘦素基因在家蚕体内表达，以获得融合的瘦素蛋白。
- 陈蔚付凡唐顺明汪生鹏黄金山赵巧玲沈兴家
- 关键词：家蚕瘦素基因
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人生长素被引量：2
- 2011年
- 人生长素是由腺垂体分泌的一种在人体生长、发育及代谢中发挥重要作用的激素,具有广泛的生理作用。利用家蚕核型多角体病毒(BmNPV)Bac-to-Bac表达系统,将人生长素基因(hgh)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,通过细菌转座子原理,转化BmDH10Bac细胞,获得重组穿梭载体质粒Bacmid-hgh,并将其转染家蚕BmN细胞,获得含有hgh的重组杆状病毒。将此重组病毒感染家蚕BmN细胞,收集重组病毒液并穿刺接种家蚕5龄起蚕,3 d后观察到家蚕感染了杆状病毒的症状,并通过SDS-PAGE和Western blotting方法在家蚕血液中检测到分子质量约20 kD的目的蛋白,表明人生长素通过Bac-to-Bac系统在家蚕体内获得了表达。
- 付凡陈蔚唐顺明汪生鹏黄金山赵巧玲沈兴家
- 关键词：家蚕核型多角体病毒家蚕
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人瘦素蛋白被引量：2
- 2011年
- 瘦素(leptin)蛋白由肥胖基因编码,对人体能量代谢等多种生理过程起着重要的调节作用。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人瘦素蛋白基因(lep)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,并转化E.coli DH10Bac,获得重组杆粒Bacmid-lep,然后转染家蚕BmN细胞,获得重组杆状病毒。用SDS-PAGE和Western blotting方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞检测到大小约22 kD的蛋白条带,与预期的人瘦素蛋白分子质量相符。给家蚕5龄起蚕注射重组病毒液后的4～5 d出现发病症状,RT-PCR检测发病家蚕的血液中有lep基因转录,并通过SDS-PAGE和Western blotting检测到大小为22 kD的人瘦素蛋白的表达。研究结果表明,利用Bac-to-Bac表达系统能够获得含有人瘦素蛋白基因的重组杆状病毒,并且目的蛋白能在家蚕细胞及幼虫体内表达。
- 陈蔚付凡唐顺明汪生鹏黄金山赵巧玲沈兴家
- 关键词：重组杆状病毒融合蛋白家蚕
- 家蚕幼虫正常个体与眠性变化个体大眠蜕皮前后血液蛋白质差异表达分析被引量：2
- 2011年
- 家蚕眠性既受染色体上主基因的控制,又受其它伴性成熟基因的调控,还受环境因素的影响。为了探讨环境因素改变家蚕眠性的分子机制,以四眠蚕品种898黄绿、D92黄绿和三眠蚕品种三眠A为材料,通过催青期或小蚕期温度、湿度、营养等因素的调控诱导眠性变化,利用双向电泳和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)技术,对这些家蚕正常个体和眠性变化个体大眠蜕皮前后的血液蛋白质表达差异进行分析鉴定。结果共获得转铁蛋白、胰凝乳蛋白酶抑制剂SCI-I、多聚腺苷酸结合蛋白2、27 kD糖蛋白前体、核糖体蛋白L20和线粒体核糖体蛋白L2等13个上调或下调的可能与家蚕眠性相关的差异表达蛋白,为进一步从蛋白质水平深入了解家蚕眠性变化的机制奠定了基础。
- 付凡赵巧玲裘智勇夏定国唐顺明沈兴家
- 关键词：家蚕眠性双向电泳
- 眠性变化家蚕的差异蛋白质组及DNA甲基化转移酶表达分析
- 家蚕的眠性由常染色体上的主基因决定,同时又受伴性成熟基因的调节。家蚕的眠性很容易受到外界环境如催青温度、幼虫的营养条件等的影响发生变化,此外,家蚕体内保幼激素和蜕皮激素浓度的变化也会改变家蚕的眠性。为了探讨环境因素改变家...
- 付凡
- 关键词：家蚕眠性双向电泳质谱荧光定量PCR
- 文献传递
