乾义柯
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 供职机构：新疆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家质检公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
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- 葡萄金黄化植原体16SrDNA检测与RFLP分析被引量：4
- 2010年
- 【目的】对多种植原体16SrDNA基因序列进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析比较,以期区分葡萄金黄化植原体不同亚种,从而为葡萄金黄化植原体的鉴定提供新依据。【方法】用植原体通用引物R16mF2/R16mR1扩增7种不同植原体16SrDNA基因序列,得到约1.5 kb的DNA片段,将此片段克隆到PGM-T载体,并通过酶切鉴定,对重组阳性克隆进行核酸序列测定及同源性分析,利用限制性内切酶XmnⅠ、XspⅠ、TaqⅠ和RsaⅠ对目的片段进行酶切电泳分析。【结果】所扩增2个不同亚种的葡萄金黄化植原体D型和C型序列同源性最高,达99.72%,但利用限制性内切酶可以将上述2个亚种从植原体榆树黄化组中区分。【结论】利用限制性内切酶分析通用引物R16mF2/R16mR1所扩增的基因片段,可以将葡萄金黄化植原体区分。
- 乾义柯张祥林马春春王翀
- 关键词：限制性片段长度多态性
- 两种植原体的PCR检测及其体系优化被引量：1
- 2009年
- 用已报道的植原体通用引物对葡萄黄化病和枣疯病植原体进行常规PCR及巢式PCR检测,并对PCR反应体系进行优化。结果表明:常规PCR扩增出了1.5kb的特异片段,所需PCR模板DNA用量为20ng/μL;在PCR基础上的巢式PCR扩增出1.2kb的特异片段,所需PCR模板DNA用量为2pg/μL。检测灵敏度提高约10000倍。优化试验表明:25μL反应体系中,MgCl2用量对扩增效果影响最大。最终最佳反应体系确立为:25mM MgCl21.7μL,2.5mM dNTP1.8μL,5U/μL Taq酶可选用0.2μL,10mM引物对各0.2μL,最佳退火温度为45.0℃。
- 马春春张祥林乾义柯王羽中
- 关键词：植原体PCR巢式PCR
- 进境向日葵检疫性病原菌快速检测及检疫处理技术研究
- 张祥林吴品珊陈卫民廖芳赵冰梅王翀张伟杜洪忠罗家凤王文正张江国刘彬陈燕刘跃庭刘绪斌乾义柯
- 该项目对进境向日葵有害生物进行了风险分析，确定了危害向日葵的有害生物367种，通过风险评估，确定风险较高的向日葵检疫性有害生物7种，通过实施一系列风险管理措施，将进口向日葵种子的风险降至可接受的水平.该项目对向日葵白锈病...
- 关键词：
- 关键词：向日葵杀菌剂
- 不同营养和培养条件对向日葵黑茎病菌生长特性的影响被引量：2
- 2011年
- 【目的】对向日葵黑茎病菌Phoma helianthi Taberosi生态适应性中的营养和培养条件进行研究,以期建立常规生物学检测方法,以便采取有效检疫处理措施。【方法】不同营养和培养条件下(包括培养基、碳源、氮源、温度、酸碱度、光照),对该菌培养7 d,测量其菌落直径大小和观察其生长状况。并用SPSS 12.0软件进行相应的计算处理、统计分析。【结果】向日葵黑茎病菌在PDA、HLA培养基上生长较好,在WA培养基上生长较慢。该病菌能充分利用可溶性淀粉和硝酸钾。在温度4～32℃均能生长,最适生长温度为24～28℃,适宜生长的pH 4.0～8.0,最适pH 5.0～7.0;在全光照培养条件下有助于菌丝的生长。【结论】通过不同营养和培养条件下的生长情况,可知该病菌的最适生长条件,有助于对该病菌进行有效的检疫处理。
- 刘彬张祥林王翀罗明乾义柯陈燕
- 关键词：营养
- 葡萄金黄化植原体16Sr DNA检测与PCR-RFLP分析
- [目的]对多种植原体16SrDNA基因序列进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析比较，以期区分葡萄金黄化植原体不同亚种，从而为葡萄金黄化植原体的鉴定提供新依据.[方法]用植原体通用引物R16mF2/R16mR1扩增7种...
- 张祥林乾义柯马春春王翀
- 关键词：限制性片段长度多态性
- 向日葵黑茎病菌分离鉴定及其RFLP分析被引量：15
- 2011年
- 【目的】对新疆近期发生的向日葵黑茎病进行病原菌分离鉴定,并对该菌进行RFLP分析。【方法】用常规分离培养法从田间采集的向日葵黑茎病病株获得致病菌,观察该菌的形态学特征;用PCR法对该菌ITS区进行扩增和测序,并与向日葵茎点霉黑茎病菌进行分子比对,明确二者的同源性;选取10种限制性内切酶对该菌的ITS区PCR产物进行RFLP分析。【结果】该菌的形态学特征为茎点霉属真菌,与向日葵茎点霉黑茎病菌的同源性达到99%以上,说明该致病菌为向日葵茎点霉黑茎病菌Phoma helianthi Taberosi。通过RFLP分析确定了该病菌的酶切位点。【结论】该致病菌的形态学和分子生物学鉴定结果表明,向日葵黑茎病由向日葵茎点霉黑茎病菌引起。
- 张祥林刘彬王翀乾义柯罗明陈燕
- 关键词：向日葵黑茎病RFLPPCR
- 葡萄金黄化植原体16Sr DNA检测与PCR-RFLP分析
- [目的]对多种植原体16SrDNA基因序列进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析比较,以期区分葡萄金黄化植原体不同亚种,从而为葡萄金黄化植原体的鉴定提供新依据。[方法]用植原体通用引物R16mF2/R16mR1扩增7种...
- 张祥林乾义柯马春春王翀
- 关键词：限制性片段长度多态性
- 文献传递
- 向日葵白锈病菌巢式PCR检测方法的研究被引量：6
- 2011年
- 【目的】建立向日葵白锈病菌(Albugo tragopogi (Persoon) Schruter var helianthi Novotlenova)的巢式PCR检测方法。【方法】用通用引物NL1/NL4对采自伊犁的向日葵白锈病菌进行PCR扩增、克隆、酶切和测序,设计该病菌的特异性引物,用巢式PCR法检测供试样品。【结果】序列测定和比对结果表明,该病菌的核酸序列与GeneBank公布的向日葵白锈病菌核酸序列同源率为97%。针对该段基因设计向日葵白锈病菌的特异性引物ATHP3/ATHP4,用巢式PCR法对供试样品进行扩增,扩增片段为370 bp。【结论】成功建立了向日葵白锈病菌巢式PCR检测方法。
- 刘彬张祥林王羽中乾义柯陈燕
- 关键词：向日葵巢式PCR
- 葡萄金黄化植原体基因芯片检测技术及RFLP分析的研究
- 本研究通过对植原体15个组主要代表种的16SrDNA序列比对分析，设计植原体基因芯片引物及探针，以期为葡萄金黄化植原体（Flavescence dorée，FD）的检测及植原体各亚型的鉴定提供一种快速、灵敏、高通量的检测...
- 乾义柯
- 关键词：基因芯片PCR限制性片段长度多态性
