丁红晖
- 作品数：26 被引量：49H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 四种肝细胞系天然免疫相关分子的表达及HBV对其表达的影响
- 2011年
- 目的探讨四种肝细胞系Huh7、HepG2、HepG2.2.15和L02天然免疫相关分子的表达情况及HBV对其表达的影响。方法提取Huh7、HepG2、HepG2.2.15和L02四种肝细胞及转染后Huh7、HepG2和HepG2.2.15细胞mRNA,逆转录合成cDNA,采用PCR法检测天然免疫相关分子的表达情况。结果四种细胞均能表达TLRs家族的TLR1、TLR3、TLR4、TLR9,NLRs家族的NOD1和RLRs家族的RIG1等天然免疫相关分子;HepG2和Huh7转染HBV可复制性克隆后出现MDA5和A20的表达下调。结论四种肝细胞系均能表达一系列天然免疫相关分子,不同肝细胞系间表达存在一定的差异。HBV瞬时转染和稳定表达能不同程度地影响这些天然免疫相关分子的表达水平。
- 刘敏郝友华丁红晖喻涛吴珺徐春利陆蒙吉杨东亮
- 关键词：肝细胞系乙型肝炎病毒
- sH-2K^d-HBc四聚体的构建及其初步的检测应用
- 2010年
- 目的:sH-2Kd-HBc复合物四聚体的构建与检测,为进一步检测抗原特异性T细胞,探讨免疫发病机制奠定基础。方法:将四个生物素化的可溶性复合物单体与荧光标记的亲和素结合形成四聚体。采用HBcAg真核表达质粒(pcDNA3-C)通过不同的途径免疫小鼠,获得针对核心抗原的特异性CTL,与制备的四聚体共孵育,结合流式细胞仪术进行检测。结果:三种免疫方法所得到的细胞中,抗原特异性CTL频数较对照组都有明显提高(0.24%,0.26%,0.36%vs 0.07%,P≤0.05)。显示制备的四聚体能与抗原特异性T细胞结合,具有检测功能。三种不同的免疫途径所引起的抗原特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答强度各有不同。与传统的肌肉注射组相比,基因枪免疫组的体液免疫应答水平较弱而细胞免疫应答水平较强。高压水注射(HDI)组的体液免疫应答和细胞免疫应答水平都要明显高于肌肉注射组结论:获得了功能性的sH-2Kd-HBc复合物四聚体,为进一步检测抗原特异性T细胞奠定基础。
- 宋娜郝友华杨新星丁红晖杨东亮
- 关键词：基因免疫基因枪
- 可生物素化sH-2D^d-HBs复合物的构建及鉴定被引量：4
- 2004年
- 目的 构建可生物素化sH-2Dd-HBs复合物。方法 采用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠脾细胞中克隆出H-2Dd基因的胞外区和β2m基因,将前者拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列(BSP)后,分别装入pET-28a(+)高效表达载体,诱导表达后纯化目的蛋白。将上述过程制备的sH-2Dd-BSP作为重链,β2m作为轻链,与H-2Dd限制性9肽(HBs 201～209氨基酸)在体外稀释复性。结果 原核表达载体pET-sH-2Dd-BSP和pET-2 m的测序结果与GeneBank所公布的序列一致。对表达产物进行纯化与复性,利用仅识别完整构象的单克隆抗体对复性后产物进行检测,证明成功构建了可生物素化sH-2Dd-HBs复合物。结论 获得可生物素化sH-2Dd-HBs复合物,为进一步利用亲和素在体外构建H-2Dd-HBs四聚体(Tetram-er),深入研究HBV感染过程中特异性CTL应答和效应机制奠定了实验基础。
- 吴珺郝友华丁红晖龚非力杨东亮
- 关键词：Β2微球蛋白复性
- 老年慢性丙型肝炎患者抗病毒疗效及影响因素分析被引量：2
- 2013年
- 目的探讨老年慢性丙型肝炎患者抗病毒疗效的影响因素。方法回顾性分析48例慢性丙型肝炎患者的临床资料，16例年龄I〉60岁患者为老年组，32例年龄〈60岁患者为中青年组。均给予干扰素联合利巴韦林联合抗病毒治疗，记录2组患者病毒学应答、生化学应答及不良反应发生情况，分析影响抗病毒疗效的可能因素。结果老年组达快速病毒学应答（RVR）、早期病毒学应答（EVR）、持续病毒学应答（SVR）者分别占93．75％（15／16）、100．00％（16／16）、50．00％（8／16），中青年组达RVR、EVR、SVR者分别占90．63％（29／32）、100．00％（32／32）、78．13％（25／32），2组达SVR情况比较差异有统计学意义（P〈0．05）。老年组中发生乏力、中性粒细胞减少和贫血的患者比例均明显高于中青年组[93．75％（15／16）比59．38％（19／32），87．50％（14／16）比53．13％（17／32），56．25％（9／16）比21．88％（7／32）]，2组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。2组生化学应答和其他不良反应发生情况比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。中青年患者和使用长效干扰素联合利巴韦林抗病毒治疗的患者中达到SVR者明显多于老年患者和使用普通干扰素联合利巴韦林抗病毒治疗的患者[78．12％（25／32）比50．00％（8／16），80．00％（28／35）比38．46％（5／13）]（P〈0．05）。结论老年慢性丙型肝炎患者SVR率明显下降，不良反应的发生率高。年龄和治疗方案的选择与慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗效果有关。
- 李媛王久君刘倩高珊白佳郝友华丁红晖赵西平
- 关键词：慢性丙型肝炎老年疗效
- 耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性与金属β-内酰胺酶的关系被引量：20
- 2007年
- 目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性与金属β-内酰胺酶(MBLs)的关系。方法2-巯基丙酸协同试验筛选产MBLs菌株;PCR扩增和克隆含有MBLs基因的Ⅰ型整合子,Southern印迹分析MBLs基因的定位;随机引物多态性DNA(RAPD)分析分离株的同源性。结果128株亚胺培南耐药株对阿米卡星、头孢他啶和环丙沙星的耐药率(31.9%、43.6%和61.0%),显著高于亚胺培南敏感株(9.8%、13.9%和24.3%)(P<0.01);分别有6株(4.7%)或9株(7.1%)产VIM-2或IMP-1型MBLs;VIM-2基因位于染色体上的Ⅰ型整合子结构,而IMP-1基因位于23kb的质粒上;RAPD显示8株产IMP-1型MBLs菌株有相同的带谱。结论产VIM-2和IMP-1型MBLs铜绿假单胞菌可导致医院感染。
- 雷延昌张正茂丁红晖杨东亮孙自镛申正义
- 关键词：铜绿假单胞菌耐药性金属Β-内酰胺酶
- HBc-HLA-A＊ 1101-β2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的制备HBc-HLA-A ＊ 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A ＊ 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽（乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96）的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力。结果Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11^＋供者的抗原特异性CTL结合。结论成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞。
- 郝友华杨新星丁红晖宋娜朱帆喻植群杨东亮
- 关键词：四聚体
- 慢加急性肝衰竭患者外周血NK细胞频率与功能的变化
- 目的分析慢加急性肝衰竭患者NK细胞及其亚型频率、细胞功能的变化情况。方法收集32例健康个体和18例慢加急性肝衰竭患者治疗过程中外周血单个核细胞。采用流式细胞术检测NK(CD3-CD56+)细胞频率,CD56dimNK细胞...
- 刘倩李媛白佳许婷赵雪琪郝友华丁红晖朱帆赵西平
- 丙型病毒性肝炎肝硬化患者抗病毒疗效及影响因素分析被引量：3
- 2013年
- 目的研究丙型病毒性肝炎肝硬化患者抗病毒治疗耐受及应答情况，探讨丙型肝炎抗病毒疗效的影响因素。方法收集慢性丙型肝炎患者52例，其中肝硬化患者13例，非肝硬化患者39例，均给予干扰素（IFN）联合利巴韦林抗病毒治疗后，观察两组患者病毒学应答、生化学应答及不良反应发生情况。结果，丙型肝炎肝硬化组平均年龄为（58．31±8．72）岁，非肝硬化组平均年龄为（36．95±15．30），两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。肝硬化患者快速病毒学应答率（RVR）、早期病毒学应答率（EVR）和持续病毒学应答率（SVR）分别为84．62％、100．00％和53．85％，非肝硬化患者RVR、EVR和SVR分别为92．31％、100．00％和71．79％，两组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。两组生化学应答比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。肝硬化组患者中性粒细胞减少、血小板减少和贫血的发生率均明显高于非肝硬化组，两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。肝硬化组患者中有2例出现白蛋白下降和腹水，其中1例中断治疗。老年（年龄≥60岁）和采用普通IFN联合利巴韦林抗病毒治疗的患者获得SVR率明显低于中青年患者（年龄〈60岁）和采用长效IFN联合利巴韦林抗病毒治疗的患者（P〈0．05）。基因1型患者的SVR率低于非基因1型，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论代偿期丙型病毒性肝炎肝硬化患者多能耐受抗病毒治疗，且远期疗效较好。
- 李媛王久君刘倩高珊白佳郝友华丁红晖赵西平
- 关键词：慢性丙型肝炎肝硬化抗病毒治疗
- 生物素化sH-2K^d-HBc复合物单体的构建及纯化被引量：1
- 2006年
- 目的构建及纯化生物素化的sH-2Kd-HBc复合物。方法以原核表达的sH-2Kd-BSP为重链,β2m为轻链,分别纯化后与H-2Kd限制性9肽(HBc131~139)在体外采用稀释法进行共折叠复性,然后在B irA酶作用下,对折叠产物进行生物素化,形成了生物素化的H-2Kd-HBc复合物。通过凝胶过滤层析法进一步纯化生物素化的复合物单体。结果原核表达质粒pET-H-2Kd-BSP的测序结果与GenBank所公布的序列一致。利用辣根过氧化物酶标记的亲和素对折叠复性及生物素化后的复合物进行检测,证明成功获得了生物素化的sH-2Kd-HBc复合物。结论获得了纯化的生物素化sH-2Kd-HBc复合物单体,为进一步在体外构建sH-2Kd-抗原肽四聚体及制备人工抗原提呈细胞,深入研究HBV感染过程中特异性CTL应答和效应机制奠定了基础。
- 宋娜郝友华张正茂吴珺杨新星丁红晖杨东亮
- 关键词：免疫应答
- 白介素-10对HBV复制子在Balb/C小鼠体内复制影响初步研究
- <正>研究背景:免疫分子IL-10是一种具有免疫调节作用的效应细胞因子,在机体的抗炎和抗纤维化过程中发挥重要作用;近来研究发现该分子与病毒感染的持续与清除也密切相关。然而IL-10分子对HBV感染后持续的影响及机制,目前...
- 郝友华徐春利朱帆丁红晖赵西平杨东亮
- 文献传递
