丁利平
- 作品数：13 被引量：21H指数：3
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- 三氯乙烯染毒L02细胞后Foxp3和GATA3基因mRNA表达水平改变被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨三氯乙烯(TCE)染毒L02细胞后Foxp3和GATA3基因mRNA表达水平改变。方法:培养L02细胞,用TCE进行染毒,3个实验组TCE剂量分别是0.25、0.5和1.0 mmol/L,染毒时间12 h,另设1个对照组不染毒TCE。染毒结束后提取细胞总RNA,用实时荧光定量PCR测定Foxp3和GATA3的mRNA表达水平。结果:低剂量TCE0.25 mmol/L组Foxp3 mRNA表达水平与对照组比较升高(P<0.05),中剂量和高剂量组(TCE0.5和1.0 mmol/L)Foxp3mRNA表达水平与对照组比较显著升高(P<0.01);同样,TCE 0.25、0.5和1.0 mmol/L实验组GATA3 mRNA表达水平与对照组比较都明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:三氯乙烯染毒L02细胞后可引起免疫相关基因Foxp3和GATA3 mRNA表达水平升高,提示三氯乙烯导致机体细胞改变可能与免疫基因有关。
- 周丽徐新云丁利平李学余刘月峰史才枫
- 关键词：三氯乙烯FOXP3GATA3
- 三聚氰胺亚急性染毒对实验动物膀胱和尿液的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨三聚氰胺亚急性经口染毒对大鼠膀胱和尿液指标的影响。方法:用三聚氰胺对SD大鼠进行亚急性经口染毒试验,雌雄大鼠分别设1个对照组和3个实验组,每组10只大鼠,每天经口灌胃染毒三聚氰胺1次,染毒时间28 d,试验结束时收集动物尿液,用尿液分析仪检测pH值、尿比重、尿胆原、胆红素、尿蛋白、酮体,对实验动物膀胱进行病理学检查。结果:三聚氰胺染毒大鼠28天后,高剂量组膀胱组织均可见粘膜下水肿、血管扩张,局部可见黏膜上皮脱落,部分膀胱组织可见膀胱内沉积物;中剂量组无明显改变,6例膀胱组织可见膀胱内沉积物。低剂量组无明显改变。实验组和对照组动物的尿液检查结果无明显差异。结论:三聚氰胺染毒对大鼠膀胱有一定影响,对尿液指标无明显改变。
- 黄新凤徐新云李学余袁建辉周丽丁利平刘月峰
- 关键词：三聚氰胺膀胱尿液
- 氯化镉对大鼠肾上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶表达及其磷酸化的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 探讨氯化镉染毒大鼠正常肾上皮（normal rat kidney epithelial,NRK）细胞对丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）表达及其磷酸化水平的影响.方法 应用不同剂量（0、1、5、10、20、40 μmol/L）氯化镉染毒NRK细胞24 h和同一剂量氯化镉（10 μmol/L）于不同时间（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h）染毒NRK肾细胞.采用蛋白免疫印迹法检测氯化镉染毒后NRK细胞中MAPK表达水平,并用磷酸化抗体检测MAPK磷酸化水平.结果 不同氯化镉剂量和不同染毒时间染毒NRK细胞,发现MAPK表达无明显改变,但MAPK磷酸化蛋白表达量较对照组升高.氯化镉浓度在10 μmol/L时p-ERK1/2表达明显,表达量为1. 00±0.06;20 μmol/L和40 μmol/L剂量组表达量分别为2.58±0.11、2.76±0.23,比10 μmol/L组高1.58倍和1.76倍,差异有统计学意义（F=827.70,P＜0.01）;氯化镉浓度为20 μmol/L（2.47±0.20）和40 μmol/L（3.73±0.25）时p-p38MAPK表达量比对照组（1.00±0.02）高1.47倍和2.73倍,差异有统计学意义（F=280.06,P＜0.01）.p-ERK1/2和p-p38MAPK表达量与氯化镉浓度存在剂量-效应关系（p-ERK1/2相关系数为r=0.919,t=4.69,P=0.009;p-p38MAPK相关系数为r=0.945,t=5.79,P=0.004）.MAPK磷酸化蛋白表达水平也与染毒时间相关,p-ERK1/2在染毒1 h（1.26±0.11）时表达明显,染毒4 h（1.51±0.07）和8 h（3.53±0.23）时表达量是对照组（1.00±0.02）的1.5倍和3.5倍,差异有统计学意义（F=427.82,P＜0.001）;p-p38MAPK在染毒1 h（1.31±0.07）时表达也明显增加,染毒4 h（3.53±0.32）和8 h（4.41±0.38）时表达水平是对照组（1.00±0.03）的3.5倍和4.4倍,差异有统计学意义（F=280.06,P＜0.001）.结论 氯化镉染毒NRK细胞可引起MAPK蛋白磷酸化水平明显升高,可能与MAPK的激活有关.
- 徐新云柯跃斌丁利平袁建辉周丽李学余刘月峰
- 关键词：氯化镉P38丝裂原活化蛋白激酶类JNK丝裂原活化蛋白激酶类氧化磷酸化
- 氯化镉对大鼠肾细胞内MAPK基因mRNA表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察不同浓度氯化镉(CdCl2)对大鼠肾(NRK)细胞MAPK基因mRNA表达的影响。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度CdCl2(0、2.5、5.0、10.0、20.0和40.0μmol/L)染毒24h后对NRK细胞存活率的影响;应用带有SYBRGreenⅠ的实时荧光定量PCR技术观察不同浓度CdCl2(0、2.5、5.0和10.0μmol/L)对NRK细胞内MAPK基因(ERK1/2、p38MAPK、JNK1/2)mRNA表达的影响。结果以阴性对照组(CdCl20μmol/L)NRK细胞存活率为100%,各染毒组(CdCl25.0、10.0、20.0和40.0μmol/L)NRK细胞存活率分别为72.28%、39.95%、15.66%、10.39%,且与对照组之间差异有统计学意义(P<0.01),并存在剂量—效应关系;经CdCl2染毒后,各实验组(CdCl22.5、5.0和10.0μmol/L)NRK细胞的ERK1/2、p38MAPK、JNK1/2基因的mRNA的相对表达量均低于阴性对照组(P<0.05或P<0.01)。结论CdCl2可能引起NRK细胞内MAPK基因mRNA的表达水平发生改变。
- 胡富勇徐新云周丽柯跃斌石年丁利平袁建辉黄海燕
- 关键词：镉丝裂素活化蛋白激酶实时荧光定量聚合酶链反应
- 氯化镉对NRK肾细胞DNA损伤及细胞凋亡作用被引量：7
- 2009年
- 目的观察氯化镉对大鼠肾细胞(NRK)DNA损伤和细胞凋亡的影响。方法用不同浓度氯化镉(0,2.5,5,10,20μmol/L)染毒NRK细胞12 h,应用Hoechst/PI双荧光活性染色检测镉致NRK细胞的凋亡率;单细胞凝胶电泳法检测镉对NRK细胞DNA的损伤。结果Hoechst/PI双染检测2.5,5,10和20μmol/L镉染毒组的细胞凋亡率分别为5.9%,12.4%,24.6%和46.2%,与对照组比较明显升高。单细胞凝胶电泳检测5,10和20μmol/L染镉组的尾部DNA含量和尾长,比对照组明显增加,且各染镉组与尾部DNA含量和尾长存在剂量-效应关系。结论氯化镉可诱发大鼠NRK细胞凋亡,DNA损伤是镉致NRK细胞凋亡的主要原因。
- 徐新云丁利平李学余周丽袁建辉黄海燕
- 关键词：镉DNA损伤细胞凋亡单细胞凝胶电泳
- MAPK抑制剂对镉诱导凋亡基因表达影响
- 2009年
- 目的观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂PD98059对氯化镉(CdCl2)诱导大鼠肾上皮细胞(NRK)凋亡基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达的影响。方法应用流式细胞仪测定CdCl2染毒6 h的NRK细胞凋亡作用;用MAPK抑制剂PD98059预先处理NRK细胞1 h后,用不同浓度镉染毒,运用实时荧光定量PCR技术,检测NRK肾细胞内凋亡基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达水平。结果NRK细胞的凋亡率与CdCl2染毒存在剂量-效应关系;2.5,5,10μmol/L镉染毒使Bcl-2 mRNA的表达水平分别下降至对照组的72%,53%和37%,而Caspase-3 mRNA表达水平上升为对照组的125%,153%和175%。在细胞培养基中预先加入PD98059然后用镉染毒,PD98059可明显阻止镉引起的Bcl-2 mRNA表达水平下降以及Caspase-3 mRNA表达水平升高。结论MAPK抑制剂PD98059对镉引起凋亡基因Bcl-2和Caspase-3的表达水平改变具有明显干预作用,提示MAPK信号调节可能参与镉诱导的细胞凋亡过程。
- 徐新云胡富勇柯跃斌周丽丁利平袁建辉黄海燕
- 关键词：镉细胞凋亡
- p38MAPK和ERK1/2对镉诱导NRK肾细胞c-myc与c-fos基因mRNA表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和细胞外信号调节激酶(ERK)1/2抑制剂对镉染毒NRK肾细胞后原癌基因c-myc与c-fos表达的影响。方法用不同剂量CdCl2(0、2.5、5.0、10.0μmol/L)染毒大鼠NRK细胞12h,p38MAPK抑制剂SB20358010.0μmol/L和ERK1/2抑制剂PD9805910μmol/L预处理NRK细胞0.5h后,再加入10.0μmol/L CdCl2染毒细胞,用流式细胞技术检测细胞凋亡率,SYBRGreenI荧光定量PCR检测c-myc与c-fos mRNA表达。结果流式细胞仪检测NRK细胞染镉后细胞凋亡率随染毒剂量增加而增加;p38MAPK抑制剂SB203580+10.0μmol/L CdCl2组与单独染镉组比较,细胞凋亡率显著下降;但ERK1/2抑制剂PD98058+10.0μmol/LCdCl2组与单独染镉组比较,细胞凋亡率显著升高。实时荧光定量PCR检测NRK细胞染镉后c-myc和c-fosmRNA表达明显增强;单独用SB203580和PD98058刺激NRK细胞后c-myc和c-fos mRNA表达与对照组比较,差异无统计学意义,但SB203580和PD98058预处理NRK细胞0.5h后加入10.0μmol/L CdCl2与单纯10.0μmol/L染镉组比较,c-myc和c-fos mRNA表达显著降低。结论MAPK信号转导通路可能在镉诱导原癌基因c-myc和c-fos表达中发挥作用。
- 丁利平徐新云罗振国李学余
- 关键词：氯化镉MAPK
- p38MAPK和ERK1/2抑制剂对镉诱导肾细胞凋亡基因表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨p38MAPK和ERK1/2抑制剂对镉诱导NRK肾细胞凋亡基因bcl-2、bax和caspase-3mRNA表达影响。方法用不同剂量CdCl2(0,2.5,5,10μmol/L)染毒大鼠NRK细胞12h,p38MAPK抑制剂SB20358010μmol/L和ERK1/2抑制剂PD9805910μmol/L预处理NRK细胞0.5h后再加入10μmol/L CdCl2染毒细胞,用MTT方法检测细胞存活率,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测bcl-2、bax和caspase-3的mRNA表达。结果NRK细胞染镉后细胞存活率随染毒剂量增加而下降;p38MAPK抑制剂和ERK1/2抑制剂加入组比单纯染镉组的细胞存活率升高。实时荧光定量PCR检测NRK细胞染镉后bax基因和caspase-3基因表达比对照组明显增强,而bcl-2基因表达显著降低。加入p38MAPK抑制剂SB203580后,bcl-2基因表达比单纯染镉10μmol/L组明显升高,但bax基因和caspase-3基因表达比单纯染镉10μmol/L组明显下降。加入ERK1/2抑制剂PD98059,也出现bcl-2基因表达增加,bax基因和caspase-3基因表达下降。结论MAPK信号传导通路可能在镉诱导凋亡基因表达中发挥作用。
- 丁利平徐新云李学余周丽
- 关键词：镉MAPK凋亡基因实时荧光定量PCR
- MAPK抑制剂对氯化镉诱导凋亡基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达的影响
- 目的观察MAPK抑制剂PD98059对CdCl诱导NRK肾细胞内凋亡基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达的影响。方法应用流式细胞仪测定CdCl染毒6h的NRK细胞凋亡作用:用MAPK抑制剂PD98059预先处...
- 徐新云胡富勇周丽袁建辉丁利平黄海燕
- 关键词：镉
- 文献传递
- 三聚氰胺对大鼠肾脏病理改变和凋亡基因表达水平的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨三聚氰胺染毒大鼠肾脏的病理改变和凋亡基因bcl-2、bax和Caspase-3mRNA表达水平的变化.方法 用三聚氰胺对SD大鼠进行亚急性经口染毒,设1个对照组和3个实验组,每组雌雄大鼠各10只.雌雄大鼠分别进行染毒,雌性大鼠3组染毒剂量分别为150、300、600mg/kg,雄性大鼠3组染毒剂量分别为200、400、800 mg/kg.每天经口灌胃染毒1次,共28 d.实验结束时取大鼠肾脏组织进行病理学检查,并用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测肾组织凋亡基因bcl-2、bax和Caspase-3基因的mRNA表达水平.结果 低剂量组、中剂量组、高剂量组雌雄动物共发现11例、13例、16例肾小管透明管型.与对照组比较,各剂量组雄性大鼠和雌性大鼠bcl-2 mRNA表达水平下降20.58%～49.51%,bax升高44.66%～300.96%,Caspase-3升高64.76%～360.75%,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.结论 三聚氰胺亚急性染毒可导致大鼠肾脏病理损害,引起肾组织凋亡基因表达水平发生改变.
- 周丽徐新云柯跃斌丁利平李学余刘月峰
- 关键词：三聚氰胺毒性试验肾小管
