丁云菲
- 作品数：11 被引量：52H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院成都地奥科学基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌研究进展被引量：2
- 1999年
- 丁云菲李安明
- 关键词：幽门螺杆菌
- 巴斯德毕赤酵母研究进展被引量：21
- 2003年
- 巴斯德毕赤酵母以其独特的生物学和遗传学特征成为当今一种诱人的外源基因表达系统,已成功地表达了各种类型的外源蛋白。本文综述了巴斯德毕赤酵母的一些特征及其作为外源基因表达系统,实现高表达的策略。
- 丁云菲刘勇戴长柏
- 关键词：巴斯德毕赤酵母基因表达系统
- 基因疫苗研究进展被引量：4
- 2001年
- 随着免疫学 ,分子生物学的进展以及对发病机理的深入理解 ,大量疾病可能被接种疫苗所控制 ,大量新的方法被用于开发更为安全有效的疫苗。这些方法包括亚单位疫苗、基因修饰活疫苗以及最近的基因疫苗。
- 丁云菲戴长柏
- 关键词：基因疫苗免疫技术
- 幽门螺杆菌的分离与特性研究被引量：1
- 2002年
- 目的 分离一株幽门螺杆菌 ,研究它的生物学特性及免疫原性 ,同时比较几种检测手段的优势。方法 采用厌氧微生物培养技术及PCR检测方法分离、初步鉴定幽门螺杆菌。重点对其中一株菌HP -WGM做各项生理生化实验 ,ELISA试验分析。结果 从 10 6位患者中分离鉴定得到 4 0株疑似幽门螺杆菌。HP -WGM菌株革兰氏染色阴性、杆状、稍弯曲、菌体的一端着生数根带鞘鞭毛。该菌脲酶、触酶、氧化酶均为阳性 ,不还原硝酸盐 ,H2 S的生成试验阴性 ,其生长耐受 3 5 %NaCl、l%甘氨酸 ,水解淀粉 ,不液化明胶。该菌有一定的免疫原性。结论 HP -WGM菌株可作为一种抗原用于检测幽门螺杆菌的感染程度。对于疾病的确诊 ,应采用至少 2种以上的检测手段 ;用于科学研究时 ,细菌培养、鉴定的方法才是最为可靠的手段。
- 丁云菲李安明李德华陈德高戴长柏
- 关键词：幽门螺杆菌细菌培养
- 幽门螺杆菌在胃和口腔中感染的检测被引量：3
- 2002年
- 目的 :检测在胃和口腔样品中幽门螺杆菌的感染。方法 :采用脲酶实验及 PCR方法检测幽门螺杆菌。结果 :脲酶试验检测不到幽门螺杆菌在口腔中的感染 ,而使用 PCR却有很高的检出率。使用同种引物 PCR对胃粘膜样品和口腔样品的培养液进行检测 ,胃中的检出率不如口腔中的高。结论 :两种检测方法 ,以 PCR更为特异、灵敏。口腔是幽门螺杆菌的重要寄居场所。
- 丁云菲肖晓蓉李安明戴长柏
- 关键词：幽门螺杆菌幽门螺杆菌感染口腔聚合酶链反应
- 戊型肝炎病毒ORF2编码多肽抗原的表达及其特性研究被引量：6
- 2004年
- 迄今所发现的唯一的戊型肝炎病毒 (HEV)中和表位定位于开放读码框架 2 (ORF2 )编码蛋白的第 5 78和第 6 0 7氨基酸(aa)之间的区域。将对应于此区域的基因片段通过一段柔性的甘氨酸铰链与乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg)基因的 3’端相连 ,构建成HBV/HEV融合基因。该融合基因在毕赤酵母细胞内的表达产物为分子量约 2 9kDa的融合蛋白 ,具有组装成嵌合病毒样颗粒 (VLP)的能力。此嵌合VLP具有与HBsAgVLP相似的特性且保留了天然HBV/HEV双重抗原性。对此嵌合VLP特性的初步研究提示其可能具有HBV/HEV双价重组疫苗的潜在应用前景。
- 谢天宏李洪钊张光明冮宏映孙强明丁云菲马雁冰孙茂盛
- 关键词：戊型肝炎病毒中和表位
- 分泌型乙型肝炎病毒包膜M蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：9
- 2002年
- 将乙肝病毒包膜中蛋白M基因插入酵母整合型表达质粒pAO818的醇氧化酶 (AOX1)启动子下游 ,构建携带 8拷贝M表达盒的重组载体 ,经电穿孔转化SMD116 8菌株和G4 18筛选 ,得到了高效分泌表达M蛋白的毕赤酵母菌株 ,表达量超过 5 0mg L .经初步纯化 ,对表达产物的性质鉴定表明 ,重组蛋白具有preS2和S抗原性 ,可以形成颗粒 ,并具有一定程度的糖基化 .所构建的稳定重组菌株和所得到的重组蛋白颗粒 ,为进一步研究新一代的疫苗提供了必要的材料 .
- 丁云菲刘勇刘红岩马雁冰孙强明孙茂盛戴长柏
- 关键词：分泌表达基因工程疫苗
- huIL-6-GM-CSF(9-127)融合蛋白的表达及活性测定被引量：7
- 2002年
- 目的 构建及表达具有huIL 6和huGM CSF双重生物学活性的huIL 6 GM CSF(9- 12 7)融合蛋白分子。方法 应用PCR技术对huIL 6和huGM CSF的基因分别加以改造 ,同时在二者之间加上连接肽序列 (G G S G S) 3 ,克隆PCR产物 ,并构建成pBV2 2 0 IL 6 GM CSF(9- 12 7)表达质粒 ,将表达质粒导入E .coliDH5α中 ,诱导表达融合蛋白。通过QSepharoseH .P .离子交换柱和SephacrylS 2 0 0分子筛柱二步柱纯化以获取目的蛋白。使用MTT法测量其huIL 6和huGM CSF生物学活性。结果 pUC18 IL 6 GM CSF(9- 12 7)的序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在E .coliDH5α中得到高效表达 ,表达的融合蛋白占总蛋白含量的 30 %以上 ,表达产物以包涵体的形式存在。通过QSepharoseH .P .离子交换柱和SephacrylS 2 0 0分子筛柱二步柱纯化及复性后获得目的蛋白 ,其纯度达到 96 %以上。融合蛋白具有huIL 6和huGM CSF的双重生物学活性 ,其促进huIL 6依赖细胞株B9和huGM CSF依赖细胞株TF 1增殖的比活性分别为 2 .86× 10 7U/mg和 3.33× 10 8U/mg。结论 获得了具有较高纯度和双重生物学活性的huIL 6 GM CSF(9- 12 7)
- 孙强明戴长柏李洪钊丁云菲马雁冰刘红岩徐维明
- 关键词：GM-CSF融合蛋白基因克隆白细胞介素-6
- 乙型肝炎病毒包膜M蛋白的表达与免疫原性研究
- 乙肝病毒/(HBV/)包膜蛋白由3个区域组成：与肝细胞直接作用的含有108或119个氨基酸残基的preS1，通过多聚白蛋白间接与之作用的含有55个氨基酸残基的preS2区域，和含有226个氨基酸残基的S蛋白区。许多研究证...
- 丁云菲
- 关键词：毕赤酵母表达系统M蛋白生物学性质
- 文献传递
- 幽门螺杆菌的分离、特性及其免疫研究
- 该实验的目的是根据我们现有的条件,设法分离得到幽门螺杆菌,对它进行生物学特性、分子生物学性状及免疫学特性等方面的探讨,最终为寻找预防和治疗幽门螺杆菌感染具有前景的药物,提供必要的和有价值的材料,并且为进一步研究该菌提供准...
- 丁云菲
- 关键词：幽门螺杆菌ELISAPCR口腔检出率
- 文献传递
