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DDX46基因慢病毒载体的构建及其在人膀胱癌细胞中的表达被引量：3: 2018年; 目的构建DDX46基因低表达慢病毒载体,并检测其在人膀胱癌细胞中的表达效果,为DDX46基因在人膀胱癌细胞中的研究奠定基础。方法应用实时荧光定量检测5637细胞和T24细胞中DDX46 m RNA表达水平,以寻找合适的细胞系进行实验。分别以DDX46基因序列和普适型阴性序列为模板,设计合成靶点序列,并合成寡核苷酸双链,定向克隆到慢病毒质粒GV115,合成重组质粒sh DDX46和sh RNA,分别称之为实验组和对照组。将不同重组质粒与pHelper 1.0和pHelper 2.0分别转染293T细胞以包装成慢病毒颗粒后感染5637细胞和T24细胞。应用实时荧光PCR定量检测重组慢病毒感染5637细胞和T24细胞后DDX46 m RNA表达水平,判断其干扰效率。结果 5637细胞和T24细胞均高丰度表达DDX46m RNA,其结果(用ΔCt值表示)分别为(6.53±0.08)和(8.48±0.11);重组慢病毒感染膀胱癌细胞后,在5637细胞中,实验组DDX46 m RNA的表达水平(用ΔCt值表示)为(0.32±0.01),低于对照组(1.00±0.10),差异有统计学意义(P<0.05),其敲减效率为67.70%;在T24细胞中,实验组DDX46 m RNA的表达水平(用ΔCt值表示)为(0.11±0.01),低于对照组(1.00±0.03),差异有统计学意义(P<0.05),其敲减效率为89.00%。结论成功构建DDX46基因低表达慢病毒载体,为研究DDX46基因在膀胱癌细胞中的作用奠定了基础。; 刘熹张冲黄邓高曹卉高元慧张淑芳彭大为; 关键词：短发夹RNA 慢病毒载体人膀胱癌细胞

MYH9-RD孕妇患者的诊断和临床特点分析: 2011年; 目的:对1例MYH9-RD孕妇患者进行诊断及临床特点分析以探讨其致病机制。方法:对此患者进行详细的临床体征筛查,包括白内障、神经性耳聋、异常出血、肾损害等检查及其他并发症调查等和实验室检查;分别采用自动血细胞计数仪法和手工法计数血小板数量,应用染色体核型分析技术进行细胞学诊断,应用光学显微镜和电子显微镜观察中性粒细胞包涵体和血小板的形态特点和超微结构特点,同时临床体征和实验室评估等。结果:患者具有典型的血小板减少、巨大血小板和粒细胞包涵体三联症,外周血染色体核型分析正常,患者机数血小板数明显低于镜数血小板数(P<0.01),电镜下可见清晰的巨大血小板和包涵体的超微结构。此外,正常对照者血小板数量、形态和结构均正常,而且中性粒细胞中未见包涵体。临床表型高度复杂,伴有青光眼、转氨酶升高、血脂升高、哮喘、鼻炎等多种疾病。结论:通过临床表现和实验室特点分析,该患者MYH9-RD诊断成立,且临床表型复杂多样。此外,为了正确反映巨大血小板患者的血小板数量,应使用人工计数法而不是细胞自动计数仪法来计数血小板的数量。; 张淑芳王顺兰张应爱肖敬川黄邓高; 关键词：染色体核型分析形态和超微结构

两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的比较: 2021年; 背景:干细胞是再生医学研究的热点,影响干细胞生物学特性的因素很多,其中供体年龄是重要的影响因素之一。目的:观察两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的变化,筛选最佳种子细胞来源。方法:以4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞为研究对象,分别选取第3代细胞和第10代细胞,观察细胞形态,绘制细胞增殖曲线,检测细胞表面抗原、细胞周期、细胞凋亡情况,然后进行成骨诱导分化茜素红染色和成脂诱导分化油红O染色以及细胞衰老β-半乳糖苷酶染色等。结果与结论:①4月龄和12月龄细胞均呈漩涡状贴壁生长,表面标志物CD29、CD44和CD90表达均为阳性,CD8a、CD45和HLA-DR表达均为阴性;②4月龄和12月龄第3代细胞增殖能力均较强;第10代细胞,与4月龄相比,12月龄G0/G1期百分比增高(P<0.001),早期凋亡增加(P<0.001),而S期和G2/M期百分比显著下降(P<0.001);③4月龄和12月龄第3代细胞的体外诱导分化能力无显著性差异;12月龄第10代细胞的钙化结节率和脂滴率与4月龄相比显著降低(P<0.001);④4月龄和12月龄第3代细胞β-半乳糖苷酶几乎不表达;12月龄第10代细胞β-半乳糖苷酶阳性细胞与4月龄相比显著增加(P<0.001),且细胞形态变得更加扁平和肥大、折光性弱;⑤结果表明,4月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞具有更强的增殖和分化能力,且细胞衰老活性更低,提示4月龄更适合用于自体移植的种子细胞。; 高元慧向杨曹卉王顺兰郑琳麟何浩伟张应爱张淑芳黄邓高; 关键词：干细胞脂肪间充质干细胞年龄分化衰老

海口地区α地中海贫血缺失型基因类型分析被引量：1: 2013年; 目的探讨海口地区α地中海贫血的发病率及分析缺失型基因的类型。方法对具有α地中海贫血高风险的278人使用裂口PCR(gap-PCR)法进行缺失型基因的检测。结果 278人中检出α地中海贫血111人,发病率为39.93%。α地中海贫血缺失型基因类型分布为东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)28例,东南亚缺失型纯合子(--SEA/--SEA)4例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)23例,右缺失型纯合子(-α3.7/-α3.7)4例,左缺失型杂合子(-α4.2/αα)17例,左缺失型纯合子(-α4.2/-α4.2)2例,血红蛋白H病21例,3.7\4.2双重杂合子(-α3.7/-α4.2)4例,α地中海贫血复β地中海贫血8例。结论α地中海贫血是最常见、危害最大的单基因遗传病,在海口地区属于高发病区,做好α地中海贫血基因类型的诊断对于优生优育起到极其重要的指导意义,提高整体人类出生素质。; 陈扬王婵黄邓高冯女张淑芳

MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的定位和本质鉴定: 目的：检测和分析非肌性肌球蛋白重链II A(NMMHC-ⅡA)在MYH9-RD患者中性粒细胞胞浆中的定位及表达，以确定包涵体的构成本质。方法：应用间接免疫荧光技术,观察MYH9-RD患者及正常对照者NMMHC—ⅡA在胞浆...; 张淑芳王顺兰张应爱黄邓高; 关键词：荧光免疫测定

人脂肪间充质干细胞体外高效扩增新方法: 目的：运用低强度脉冲场超声(LIPUS)刺激促进人脂肪间充质干细胞(hASCs)增殖，为临床干细胞体外高效增殖提供新方法.方法：通过LIPUS体外刺激hASCs细胞生长，采用Scepter 2.0手持细胞计数器进行细胞计...; 黄邓高; 关键词：细胞增殖

一种负压式微量液体吸引装置: 本实用新型公开了一种负压式微量液体吸引装置，包括连通管道，连通管道的端部上设置有氧气扩散器，氧气扩散器上拆卸式设置有排水软管和吸引软管，吸引软管端部上拆卸式设置有移液头；通过连通管道、氧气扩散器、排水软管、吸引软管和移液...; 黄邓高高元慧曹卉张淑芳郑琳麟何浩伟肖敬川周君霞张应爱王婵王顺兰

一种防误伤导尿管: 本实用新型公开了一种防误伤导尿管，具体涉及医疗器械技术领域，包括气囊导尿管和安全件，气囊导尿管的引流腔开设有安全引流孔，安全引流孔和引流孔分别位于气囊两侧，且安全引流孔相较于引流孔远离引流腔的插入端，液体能够通过安全引流...; 陈扬王婵黄邓高张淑芳

海洋生物提取物中抗皮肤光老化活性成分的研究进展被引量：1: 2021年; 海洋生物是海洋资源的重要组成部分,具有抗菌、抗氧化、抗炎及光保护等生物活性,在医用护肤品和药物的生产中有重要的贡献。长期紫外线照射是皮肤外源性老化的主要原因。紫外线照射可损伤表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞,引起皮肤萎缩、皱纹及皮肤肿瘤等。海洋生物中有众多光保护物质,包括类菌孢素氨基酸、硫酸多糖、类胡萝卜素和多酚类物质等,这些物质在皮肤护理、化妆品和医药产品中有很大的开发潜力。本文综述了近年来海洋生物中的光保护物质及其在皮肤光老化中的应用进展。; 林飞燕黄邓高殷晓静; 关键词：海洋生物光老化生物活性类胡萝卜素

低强度脉冲超声增强人外周血淋巴细胞增殖及抗癌活性的实验研究被引量：1: 2020年; 目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人外周血淋巴细胞(HPBL)增殖和抗肿瘤效应的影响。方法采用Ficoll梯度离心法分离HPBL;将LIUPS强度0设为对照组,10 mW/cm^2组、20 mW/cm^2组、30 mW/cm^2组、40 mW/cm^2组、50 mW/cm^2组为刺激组刺激HPBL增殖,每天一次,每次刺激10 min,连续刺激2 d。CCK-8法检测各组细胞增殖活性;酶联免疫吸附法检测抗肿瘤因子[γ干扰素(INF-γ)、白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)]表达情况;采用共培养HPBL与人肺巨细胞癌95D细胞检测其抗肿瘤活性。结果 LIPUS刺激HPBL2 d共2次后,30 mW/cm^2组的细胞增殖能力增强,与对照组和其他强度刺激组比较,细胞数量和细胞团块数量均增多。CCK-8检测结果显示,30 mW/cm^2组光密度值与对照组、20 mW/cm^2组、40 mW/cm^2组、50 mW/cm^2组比较差异均有统计学意义(P=0.032、0.027、0.027、0.001)。抗肿瘤因子检测显示,30 mW/cm^2组INF-γ、IL-2、TNF-α和GM-CSF分别为(39.66±8.30)ng/L、(619.84±125.94)ρg/ml、(461.29±14.08)ng/L、(108.11±2.07)ng/L,均高于对照组[(24.40±6.84)ng/L、(279.56±128.18)ρg/ml、(417.17±21.44)ng/L和(96.53±1.56)ng/L]和50 mW/cm^2组[(16.52±0.87)ng/L、(141.00±93.71)ρg/ml、(171.96±9.46)ng/L、(72.56±8.95)ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.01)。共培养实验显示,30 mW/cm^2组人肺巨细胞癌95D细胞杀伤率为51.11%±5.21%,显著高于对照组(42.86%±0.55%)和50 mW/cm^2组(42.00%±3.67%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 LIPUS刺激可提高HPBL的增殖活性和杀伤率。; 黄邓高高元慧曹卉郑琳麟文小红符先先张淑芳; 关键词：细胞增殖

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黄邓高

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