黄智华
- 作品数：9 被引量：46H指数：4
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省重大科技项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 基因重组蛛丝蛋白仿生纤维的制备研究被引量：1
- 2009年
- 以甲酸为溶剂,制备质量浓度为70 g/mL基因重组蛛丝蛋白纺丝液.分别以甲醇、硫酸铵为凝固浴,经一段拉伸、二段拉伸制备仿生纤维,分析仿生纤维的水溶性、密度、比强度等物理和机械特性,并考察加入高分子材料聚乙烯醇及纤维后处理对纤维性能结构的影响.
- 姚清华黄智华黄曦陈登龙李敏
- 关键词：仿生湿法纺丝力学性能
- 蜘蛛拖丝蛋白基因的构建及在大肠杆菌中的表达被引量：31
- 2002年
- 蜘蛛大壶腹线产生的拖丝是非常优良的纤维蛋白 ,具有独特的强度和弹性。基于拖丝蛋白高度重复序列和部分cDNA序列 ,合成蜘蛛拖丝蛋白基因单体 ,通过头尾相连的构建策略 ,得到拖丝蛋白多聚体 ,与原核高效表达载体pET30a(+)连接 ,转化大肠杆菌BLR(DE3) ,用IPTG诱导表达。表达产物经His .Bind树脂金属螯合亲和层析一步纯化 ,纯度达 90 %以上 ,表达量为 2 0mg L。SDS PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为 37kD 。
- 李敏章文贤黄智华黄建坤
- 关键词：蜘蛛大肠杆菌
- 蜘蛛丝的分子结构与力学性能研究被引量：7
- 2003年
- 蜘蛛丝尤其是蜘蛛大囊状腺产生的拖丝 ,具有独特的机械性能 ,是自然界颇具应用潜力的生物材料。现代分子生物学技术使蜘蛛丝蛋白基因得以克隆 ,通过高分子物理化学手段方法的利用 ,有利于揭示蜘蛛丝蛋白质序列、分子结构、以及分子结构和力学性能之间的关系。对不同种类蜘蛛丝蛋白的深入研究 ,将为基因工程方法人工合成并改造蜘蛛丝成为可能。
- 黄智华李敏
- 关键词：蜘蛛丝分子结构力学性能
- RGD蛛丝蛋白基因工程菌高密度发酵条件的研究被引量：15
- 2005年
- 蜘蛛丝因其独特的机械特性,成为自然界性能优良的天然蛋白质纤维。基因工程技术是获取蛛丝蛋白的有效途径。为规模化制备重组RGD-蛛丝蛋白基因工程菌pN SR-16表达产物,通过摇瓶培养确定pN SR-16生长和表达的最优化条件,并在此基础上进行分批补料高密度培养。控制碳源、氮源的流加,发酵液溶解氧浓度和菌体比生长速率,使pN SR-16最终发酵菌体OD600达到57.15,重组丝蛋白表达产物占总蛋白量的20.8%。
- 李敏涂桂云黄智华黄曦
- 关键词：工程菌高密度发酵
- 制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白的分离纯化方法
- 本发明涉及制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白(简称蛛丝蛋白)工程菌表达目的蛋白质的分离纯化，得到高纯度可利用的蛛丝蛋白的方法。其特征是工程菌细胞首先用1/15M磷酸盐缓冲液(pH7.0)洗涤菌体，离心后，以1∶5比例加入50mM...
- 李敏黄智华章文贤涂桂云
- 文献传递
- 制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白的分离纯化方法
- 本发明涉及制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白(简称蛛丝蛋白)工程菌表达目的蛋白质的分离纯化，得到高纯度可利用的蛛丝蛋白的方法。其特征是工程菌细胞首先用1/15M磷酸盐缓冲液(pH7.0)洗涤菌体，离心后，以1∶5比例加入50mM...
- 李敏黄智华章文贤涂桂云
- 文献传递
- 组织工程新材料蜘蛛拖丝蛋白的重组培养被引量：9
- 2003年
- 目的通过对重组蜘蛛拖丝蛋白基因工程菌pNS2生长的培养基进行优化,为获取大量蜘蛛拖丝蛋白提供条件。方法采用单因子试验和正交试验对培养基进行优化。结果获得优化的培养基组成:葡萄糖5.0g/L、蛋白胨5.0g/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)15.0g/L、微量元素母液15.0g/L、硫酸镁(MgSO4)0.8g/L、柠檬酸1.7g/L。培养基优化后,工程菌的生长量提高了60.6%。结论优化的培养基为基因工程菌pNS2大规模生产蜘蛛拖丝蛋白奠定了基础。
- 章文贤李敏涂桂云黄智华
- 关键词：培养基正交试验生物医学工程
- 蛛丝蛋白工程菌高密度发酵、表达产物纯化与湿法纺丝
- 蜘蛛丝尤其是由蜘蛛大囊状腺产生的拖丝,具有质地轻、富有弹性、强度高等优良的特性,作为生物材料具有广泛的应用前景,基因工程技术为大规模生产蛛丝蛋白提供了可能途径.该论文研究了重组蛛丝蛋白工程菌的发酵培养与重组蛛丝蛋白的纯化...
- 黄智华
- 关键词：高密度发酵纯化纺丝
- 文献传递
- 蜘蛛拖丝蛋白基因亚克隆与全序列测序对其结构与功能了解的意义被引量：4
- 2004年
- 目的:了解蜘蛛拖丝蛋白基因的结构,利用基因工程技术制备人工蛛丝纤维,开发具有独特的机械特性和良好生物相容性的新型蜘蛛丝纤维生物材料。方法:通过结合限制性内切酶消化和超声波机械剪切蜘蛛拖丝蛋白全基因克隆ScosDS-1DNA,制备的DNA片段分别与载体pUC19连接,构建了4个拖丝蛋白基因亚克隆文库。筛选、鉴定亚克隆文库的重组子,选取大小合适的重组子进行测序。结果:筛选的重组子数目超过400个,成功完成的测序反应数近500次,总读长已为ScosDS-1全长的5倍。结论:初步进行了ScosDS-1全序列拼接,以进一步了解拖丝蛋白基因的结构与功能,为合理的设计化合成基因,人工仿制蛛丝纤维奠定了基础。
- 黄建坤黄智华李敏
- 关键词：亚克隆基因工程生物材料基因结构
