高鹏
- 作品数：21 被引量：43H指数：4
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
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- 重组腺病毒载体对大鼠胶质瘤细胞转染效率的影响
- 2013年
- 目的研究转染复数(MOI)和转染时间对重组腺病毒载体转染大鼠胶质瘤细胞转染效率的影响。方法体外培养大鼠胶质瘤细胞(C6细胞),用携带有rHSG基因的重组腺病毒载体(Adv-rHSG-GFP)转染C6细胞。根据MOI将细胞分为:A组MOI=0、B组MOI=10、C组MOI=50、D组MOI=80、E组MOI=100,转染Adv-rHSG-GFP 24h后分别收集每组细胞,采用Western Blot和免疫细胞化学法检测rHSG蛋白的表达,并通过流式细胞仪和倒置荧光显微镜观察GFP阳性表达来评价重组腺病毒载体的转染效率。用MOI为100的Adv-rHSG-GFP转染C6细胞不同时间后(12、24、36和48h),同法收集细胞并检测rHSG蛋白的表达及评价重组腺病毒载体的转染效率。结果 Adv-rHSG-GFP转染C6细胞24h后,rHSG蛋白的相对表达量和绿色荧光蛋白表达随MOI值的增高而增多;用MOI为100的Adv-rHSG-GFP转染C6细胞后,12h即可观察到绿色荧光蛋白的表达,且在24h内随时间的变化而增高,在24~36h绿色荧光蛋白表达无变化,48h有所降低(P<0.01);rHSG蛋白相对表达量在12~48h内随时间的变化而增高,于48h达到最大值(P<0.01)。结论重组腺病毒载体能够有效转染C6细胞,且在MOI值为100,24h时有最高转染效率。
- 高鹏张春赵巍沈冰
- 关键词：腺病毒转染
- 细粒棘球蚴原头节3种重组抗原的双向电泳定位分析被引量：1
- 2013年
- 目的利用已有的细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)原头节3种重组抗原rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29获得特异性抗体,以识别双向电泳图谱中相应的蛋白位点。方法十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)初步分离细粒棘球蚴原头节蛋白,预判断蛋白分布情况。应用双向电泳技术分离原头节蛋白,PDquest软件分析原头节的蛋白质数量、相对分子质量(Mr)和等电点(IP)。用原头节的3种重组蛋白rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29分别免疫新西兰家兔,制备血清,纯化抗体。蛋白质印迹(Western blotting)鉴定特异性抗体对原头节双向电泳图谱中相应蛋白的识别。结果SDS-PAGE结果显示,细粒棘球蚴原头节蛋白主要分布于Mr18 000～90 000区域。双向电泳分离出240个蛋白位点,为Mr15 790～117 050,IP为4.0～9.5,其中85.8%(206/240)蛋白等电点为5～9。Western blotting结果显示,rEg14-3-3特异性抗体可识别细粒棘球蚴原头节双向电泳图谱中约为Mr33 000、IP为4.86的14-3-3蛋白位点,rEgZW-5特异性抗体可识别约为Mr23 000、IP为4.98的ZW-5蛋白位点,rEgP-29特异性抗体可识别约为Mr29 000、IP为5.65的P-29蛋白位点。结论细粒棘球蚴原头节的3种重组抗原rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29的抗体可识别双向电泳图谱中相应的蛋白位点。
- 朱明星李君良巨艳高鹏赵巍
- 关键词：细粒棘球蚴原头节重组抗原双向电泳
- 细粒棘球绦虫(中国大陆株)谷胱甘肽s-转移酶重组蛋白(rEgGST)的免疫保护性研究被引量：5
- 2011年
- 目的应用细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原GST重组蛋白进行动物免疫,探讨GST免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法 ICR小鼠随机分为蛋白免疫组和对照组,每隔2周皮下免疫1次,在第3次免疫后4周,用Eg原头蚴进行攻击感染,感染后20周剖杀小鼠,检获棘球蚴包囊,计算免疫保护力,并用ELISA法测定血清中IgG及其亚型和IgE水平。结果与佐剂对照组比较,蛋白免疫组小鼠的免疫保护力为89.39%;与免疫前比较,免疫后和攻击感染后蛋白免疫组小鼠血清IgG及其亚型和IgE均有不同成程度的升高(P<0.05)。结论 rEgGST能诱导小鼠产生部分免疫保护力,表明rEgGST是具有发展前途的抗包虫病候选疫苗。
- 高鹏雄英杜娟李居怡王娅娜李宗吉赵巍
- 关键词：细粒棘球蚴谷胱甘肽S-转移酶免疫保护力
- Alg13突变致痫小鼠的繁育及鉴定
- 2022年
- 目的对Alg13基因敲除(knockout,KO)小鼠进行繁育和鉴定,为研究Alg13在癫痫中的作用提供一种理想的动物模型。方法本研究选用C57BL/6J小鼠,分为Alg13 KO组及野生型(wildtype,WT)组,包括4周龄Alg13 KO小鼠12只(雌雄各6只,体质量6~7 g),WT小鼠12只(雌雄各6只,体质量7~8 g),8周龄Alg13 KO雄性小鼠18只(体质量21~23 g),WT雄性小鼠18只(体质量22~24 g)。使用PCR、凝胶电泳、DNA测序、TA克隆和蓝白斑筛选综合鉴定Alg13 KO小鼠基因型。免疫组织化学法和免疫印迹法对比验证Alg13 KO小鼠ALG13蛋白的缺失情况。利用同步化视频脑电系统监测Alg13 KO小鼠癫痫发作的行为学表现及脑电特征。免疫印迹分析电压门控钠离子通道α亚基1(sodium channel alpha subunit 1,SCN1A)蛋白表达情况。结果凝胶电泳、DNA测序及蓝白斑筛选结果均显示Alg13 KO小鼠中存在5个碱基的缺失。与WT组相比,免疫组织化学结果证实Alg13 KO小鼠的皮质、小脑和海马区ALG13表达量显著降低(P<0.001;P<0.05;P<0.001),且蛋白免疫印迹结果也说明Alg13 KO小鼠的皮质、小脑和海马区ALG13表达更少(P<0.001)。视频脑电结果显示:部分Alg13 KO小鼠出现频繁的自发性癫痫发作,具有典型癫痫发作的行为学表现和脑电改变;相较于WT组,所有的Alg13 KO组小鼠脑电δ和θ波能量值均显著升高(P<0.001)。Alg13 KO小鼠海马和皮质中SCN1A的表达水平显著高于WT小鼠(P<0.05;P<0.01)。结论成功繁育Alg13基因敲除小鼠模型,该模型表现出显著的癫痫易感性,可用于遗传异常导致癫痫的机制研究。
- 高鹏霍俊明郭宝瑞于宝利吴际吴际王军成马辉孙涛
- 关键词：小鼠基因敲除癫痫
- 大鼠蛛网膜下腔出血后G蛋白信号调节因子5的变化被引量：1
- 2013年
- 目的探讨大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）后G蛋白信号调节因子5（RGS5）表达变化与迟发缺血性神经功能障碍（DIND）之间的关系。方法Sprague—Dawley（SD）大鼠90只，随机分为SAH组（A组，42只）、生理盐水组（B组，42只）和健康对照组（c组，6）。A组采用枕大池二次注血法建立SAH模型，B组同法注射等量生理盐水。A、B组分别在二次注血（或生理盐水）后1、3、5、7、9、11、13d取大脑，每组每时相取6个大脑，行脑组织HE染色观察脑组织病理形态，免疫组化检测RGS5蛋白，原位杂交法检测RGS5mRNA。C组用以上同样方法观察检测。结果A组二次注血后3～11d脑组织出现局部缺血梗死的病理形态，组织结构紊乱，间质水肿，神经元变性坏死。与B、c组相比，A组3～11dRGS5蛋白及RGS5mRNA表达均增多（P〈0．05），第5天增多最明显（P〈0．05）。结论SAH后RGS5高表达与DIND的发生密切相关。
- 郭晖高鹏邹有瑞蒋树财赵巍孙涛沈冰
- GPi深部脑刺激治疗亨廷顿病一例报道并文献复习
- 2018年
- 亨廷顿病（Huntington’s disease，HD）是一种致死性常染色体显性遗传性神经退行性疾病，又称慢性进行性舞蹈病、大舞蹈病、亨廷顿舞蹈病，发病原因为第4号染色体IT15基因中CAG碱基序列重复扩展。
- 李信晓王峰刘阳刘诤曹鹏鹏高鹏孙涛
- 关键词：亨廷顿病深部脑刺激
- 重型颅脑损伤患者血浆D-二聚体的动态监测与分析被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨血浆D-二聚体含量的检测对临床诊治重型颅脑损伤患者的辅助作用。方法用乳胶免疫比浊法,对重型颅脑损伤患者入院后不同时间进行 D-二聚体检测并进行分析。结果入院当天所有颅脑损伤患者的D-二聚体均升高,3d达高峰,7d开始下降,且损伤越严重,含量越高,下降速率越慢,预后越差。结论重型颅脑损伤患者D-二聚体含量与其损伤的程度及患者的预后密切相关,可作为临床判断病情严重程度及其预后的实验室指标。
- 杨强方志豪高鹏蒋树才沈冰
- 关键词：重型颅脑损伤D-二聚体
- 宁夏回族甲硫氨酸合酶基因A2756G多态性研究
- 2010年
- 目的了解宁夏回族甲硫氨酸合酶(MS)基因A2756G的多态性的分布特点。方法通过聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析200例宁夏回族MS基因A2756G基因型。结果宁夏回族人群中AA、AG、GG基因型频率分别为0.8100、0.1750、0.0150,G突变基因频率为0.1025。与白种人群中的分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲硫氨酸合酶基因A2756G基因型在不同种族间的分布存在明显的差异。
- 王健李居怡高鹏杜娟
- 关键词：多态性回族
- 高压氧治疗重型颅脑损伤的疗效分析被引量：12
- 2014年
- 目的探讨高压氧(HBO)对重型颅脑损伤患者治疗效果。方法选取我院收治的60例重型颅脑损伤患者,分为对照组与高压氧组各30人,其中对照组患者给予常规治疗而高压氧组患者在常规治疗基础上接受HBO治疗,治疗前、治疗后1个月对两组患者作格拉斯哥评分(GCS)、3个月后作格拉斯哥预后评分(GOS),对比两组患者神经功能恢复情况。结果治疗后高压氧组患者GCS优于对照组(P<0.05),疗效明显优于对照组患者(P<0.05)。结论 HBO治疗能有效改善重型颅脑损伤患者神经功能恢复,改善患者认知、日常生活功能,促使患者康复及提高生活质量。
- 方志豪黄萍张斌杨强高鹏沈冰
- 关键词：重型颅脑损伤高压氧疗效
- 适用于大小鼠脑立体定位仪的可调式操作台
- 本实用新型公开了一种适用于大小鼠脑立体定位仪的可调式操作台，包括底座，所述底座上端表面一侧中部安装有门齿钩，底座下端安装有移动机构，移动机构上方安装有两个耳杆，两个耳杆下方的底座前后部皆安装有固定板，固定板内部皆布设有移...
- 高鹏张静马文倩钱欣刘安红李双
