高骏
- 作品数：55 被引量：106H指数：5
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：上海市农科院青年科技发展基金上海市“科技创新行动计划”上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 犬细小病毒时间分辨荧光免疫法的建立及初步应用
- 2021年
- 随着人们物质生活水平不断提升,宠物犬的养殖数量不断增加,由犬细小病毒(CPV)引起的疾病的发病率也呈升高趋势。CPV是我国出入境口岸宠物检疫的重要病原之一,为提高检疫效率和准确率,本研究建立了犬细小病毒时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法。本研究主要选用犬细小病毒特异性单克隆抗体(MAb)4C11和7D5分别作为包被抗体和检测抗体,检测抗体用镧系元素中的铕(Eu3+)标记,制备出双抗体夹心TRFIA分析法。结果显示,该方法灵敏度可达0.79 ng/m L;CPV标准品回收率为96.48%~105.17%,同步检测CCV、CDV、CAV-1、CPIV标准品,结果均为阴性;重复性检测发现批内和批间变异系数分别为4.78%~6.03%和4.23%~6.42%;4℃可保存6个月以上,37℃可保存7 d以上。临床检测结果与PCR方法一致。结果表明,该方法具有灵敏度高、稳定性好、特异性强、重复性好、操作便捷,受本底因素影响少等优点,适用于CPV的快速检测。且读卡方式多样,满足了不同实验条件的要求,具有较高的临床实用价值和推广价值。
- 李红刘成倩孙凤萍高骏陆娜云梁洪宇刘惠莉易建中
- 关键词：犬细小病毒
- 家禽新城疫病毒检测方法比较研究
- 蒋凤英王英高骏孙凤萍胡建华李春华金佩芳姚东侠
- 该项目组在检测家禽新城疫病毒（NDV）泄殖腔棉拭样品中，将传统的病毒分离及鉴定的方法与快速单抗夹心ELISA方法相结合，建立了二步法检测方法。该方法与传统的检测方法相比，可明显降低检测成本，缩短检测时间，可及时得到检测结...
- 关键词：
- 关键词：家禽新城疫病毒
- 鸭瘟病毒间接ELISA方法的建立
- 2018年
- 通过SPF鸡胚进行鸭瘟病毒培养和增殖,采用反复冻融后离心-0.22μm滤膜过滤-差速离心-蔗糖密度梯度离心法(sucrose-density-gradient-centrifugation,SDGC),纯化后病毒粒子作为ELISA包被抗原,从而建立了鸭瘟病毒间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。经对不同血清样品的检测,表明此方法具有操作简便、敏感性高、特异性好的优点,特别适用于大批鸭群的抗体检测和流行病学调查,为合理免疫和疫病预防提供有效的技术手段。
- 孙凤萍高骏李红刘成倩易建中姚慧娟
- 关键词：鸭瘟病毒间接ELISA
- Ⅰ型鸭肝炎病毒间接ELISA方法的建立被引量：4
- 2011年
- 采用Ⅰ型鸭肝炎病毒通过SPF鸡胚进行病毒培养和增殖,反复冻融后离心-0.22μm滤膜过滤-差速离心-蔗糖密度梯度离心法纯化后作为ELISA包被抗原,建立了鸭病毒性肝炎-Ⅰ型病毒全病毒间接ELISA诊断方法。试验表明:此方法具有敏感性高、特异性好的优点,为快速诊断鸭病毒性肝炎-Ⅰ型病毒感染提供了一条方便的途径。
- 孙凤萍高骏胡建华王胜昌高诚
- 关键词：鸭病毒性肝炎间接ELISA
- 鸡蛋溶菌酶单克隆抗体的制备与鉴定
- 2021年
- 为建立一种便捷的鸡蛋溶菌酶定量测定方法,将鸡蛋溶菌酶免疫BALB∕c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2∕0骨髓瘤细胞融合,用ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,制备腹水并纯化,用间接ELISA和Western blot试验方法检测纯化抗体的特异性。结果表明:通过筛选获得1株稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞系3E4,其抗体亚型为Ig G2b,细胞培养上清和腹水效价分别达2 560和1.0×10^(6);MAb的特异性鉴定结果显示,该株细胞系所产生的抗体能够特异地与鸡蛋溶菌酶蛋白反应。该抗体的制备为鸡蛋溶菌酶检测方面的研究提供了基础。
- 李红刘成倩严华祥孙凤萍高骏姚惠娟易建中
- 关键词：鸡蛋溶菌酶单克隆抗体特异性
- 猪副粘病毒间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2007年
- 以临床分离的猪副粘病毒作为抗原,通过SPF鸡胚进行病毒培养和增殖,再经过差速离心纯化后作为ELISA包被抗原,建立了猪副粘病毒全病毒间接ELISA诊断方法。试验表明:此方法具有敏感性高、特异性好的优点,为快速诊断新型猪传染病——猪副粘病毒(PPMV)感染提供了便利的途径。
- 孙凤萍胡建华高骏吴祖立李春华邵伟娟谢建云高诚
- 一株鹅源鸭疫里默杆菌的分离及PCR鉴定被引量：1
- 2019年
- 上海某鹅场发生雏鹅急性死亡,患病鹅的临诊症状、病理变化疑似鸭疫里默杆菌感染。通过细菌分离培养获得一株细菌纯培养物,使用PCR方法以及测序鉴定该菌株为鹅源鸭疫里默杆菌。
- 刘成倩李红孙凤萍高骏姚惠娟易建中周宗清
- 关键词：鸭疫里默杆菌
- 四种常用消毒剂对猪副粘病毒的灭活效果研究被引量：1
- 2009年
- 目的观察4种化学消毒剂对猪副粘病毒的灭活效果,以便为畜牧业消毒提供参考。方法采用悬液定量杀菌试验与鸡胚感染检测方法对含碘、含氯、过氧乙酸和苯扎溴铵等4种消毒剂灭活猪副粘病毒的效果进行了实验室研究。结果以含有效碘30 mg/L的碘伏溶液,2000 mg/L过氧乙酸溶液,含有效氯25 mg/L的复方二氯异氰尿酸钠溶液以及含1000 mg/L苯扎溴铵消毒液对悬液内猪副粘病毒作用5 min以上,均可达到完全灭活。结论本试验4种常用化学消毒剂在较低浓度条件下,可以快速灭活猪副粘病毒,可用于对环境消毒和防止猪副粘病毒的传播。
- 孙凤萍高骏胡建华王胜昌冯洁吴祖立
- 关键词：化学消毒剂灭活效果
- 两株鸡新城疫病毒强毒株的分离与分子鉴定被引量：4
- 2008年
- 从上海市发病鸡群中分离到两株新城疫病毒（NDV），其MDT分别为51．2h和50．4h，ICPI分别为1．850和1．875，均为强毒株。用RT-PCR扩增F基因cDNA片段，并将其分别克隆到pGEM-Teasy载体中。序列分析结果表明，两分离株的F基因片段均为1654bp，编码551个氨基酸，其F蛋白的氨基酸序列同源性达100％，但与常见疫苗株的氨基酸同源性仅为78．3％～83．7％。F蛋白裂解位点序列均为^112 R-R-q-K-R-F^117，属于基因Ⅶ型NDV。
- 李春华蒋凤英王英胡建华邹勇孙凤萍魏晓锋高骏金佩芳
- 关键词：新城疫病毒分子鉴定基因型
- 猪圆环病毒研究进展被引量：11
- 2005年
- 近年来断奶仔猪多系统衰竭综合征(post-weaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)在全世界范围内呈不断流行和蔓延的趋势。猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2),目前已被世界各国学者确认为是引起PMWS的主要病原体,许多对PCV-2的研究也主要是针对PMWS的。本文就近年来对猪圆环病毒的病原及致病性、流性病学、诊断及防制等方面的研究进展作一综述。
- 高骏胡建华孙凤萍李春华王英蒋凤英
- 关键词：猪圆环病毒PMWSPCV断奶仔猪多系统衰竭综合征防制性病学
