韩文君
- 作品数：12 被引量：46H指数：4
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
- 发文基金：教育部“优秀青年教师资助计划”国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 褐藻胶生物转化的分子生物学基础研究Ⅰ：褐藻胶裂解酶新基因的克隆、重组表达与重组酶的初步分析;Ⅱ：假单胞菌褐藻胶生物合成操纵元全基因的克隆与序列的分析
- 该论文以环境总基因组DNA为研究切入点,首先构建了海水环境基因组DNA文库,在对己知褐藻胶裂解酶序列进行生物信息学分析的基础上设计了简并引物,建立了一个简便而有效的褐藻胶裂解酶基因PCR筛选法.通过该方法筛选得到一条褐藻...
- 韩文君
- 关键词：褐藻胶裂解酶生物转化
- 文献传递
- 海洋细菌Flammeovirga yaeyamensis MY04对多糖的降解利用及胞外琼胶酶系的研究
- 能降解多糖的高活力菌株是进行生物质能转化的理想工具,也是目前微生物资源发掘的热点之一。自江苏赣榆海泥样品中分离到1株海洋细菌,鉴定为Flammeovirga yaeyamensis,编号MY04。唯一碳源生长实验表明,M...
- 韩文君古静燕闫秋洁李俊刚顾谦群李越中吴志红
- 关键词：琼胶酶
- 文献传递
- 一株产褐藻酸多糖的海洋假单胞细菌Pseudomonas sp. QDA的筛选和鉴定被引量：11
- 2004年
- 根据已获褐藻酸多糖生物合成基因簇中褐藻胶裂解酶基因 (alg L )的序列设计特异性引物 ,利用 PCR技术从海洋微生物中筛选到 1株能够分泌胞外多糖的细菌。采用形态学观察和 1 6Sr D-NA序列分析鉴定该菌株 ,结果为假单胞属细菌 ,命名为 Pseudomonassp.QDA;系统发育树显示该菌株与 P.putida亲缘关系最近。菌株产生的胞外多糖可被褐藻胶裂解酶 (Alg L)降解 ,并在紫外 2 34nm处检测到特征性吸收 ,初步证明含有褐藻酸多糖。
- 韩文君路新枝肖琳于文功
- 关键词：PCRRDNA
- 利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株被引量：1
- 2006年
- 本文旨在以海洋细菌Pseudomonas sp．QDA褐藻多糖（alginate）生物合成操纵元中的algG基因为靶点，利用DNA重组技术改建褐藻多糖的生物合成途径，以期获得产生甘露糖醛酸的突变菌株。首先，利用PCR克隆幽G基因两侧大小分别为1．7kb和1．8kb的DNA片段作为同源片段，用编码Gm抗性的aacCl基因替换algG基因，构建成打靶载体pEX100TUDG。将打靶载体转入QDA，利用Gm抗生素和蔗糖为选择压力进行培养，通过PCR和Southern杂交验证，获得了突变菌株。^1H—NMR、PAGE和GPC分析发现，突变菌株胞外产物为多聚甘露糖醛酸。该突变菌株的获得丰富了具有较高药物开发价值的甘露糖醛酸的来源，为褐藻多糖途径工程的进一步研究提供了理论依据和技术支持。
- 沈洪波韩峰林育姿韩文君于文功
- 关键词：假单胞菌
- 褐藻胶生物转化的分子生物学基础研究——Ⅰ：褐藻胶裂解酶新基因的克隆、重组表达与重组酶的初步分析 Ⅱ：假单胞菌褐藻胶生物合成操纵元全基因的克隆与序列分析
- 褐藻胶是由α-L-古罗糖醛酸(Guluronate)和β-D-甘露糖醛酸(Mannuronate)两种糖单元连续或交替连接而成的线性多糖分子。结构不同(如，M/G比例、聚合度等)的褐藻胶及其衍生物具有不同的生物活性，已经...
- 韩文君
- 关键词：褐藻胶裂解酶生物转化
- 一株多糖降解菌的分离、鉴定与琼脂糖降解能力被引量：11
- 2012年
- 【目的】筛选海洋来源的多糖降解菌,分析其多糖降解能力并初探机制。【方法】碘液染色法从海泥中初筛琼脂糖降解菌,唯一碳源生长法分析菌株的多糖利用能力,克隆16S rRNA基因以分析系统分类地位。用硫酸铵沉淀法制备胞外粗酶制剂,DNS-还原糖法测定琼胶酶活性,活性染色法分析胞外琼胶酶系的组成特征。分离、纯化琼脂糖的酶解产物,通过TLC测定寡糖Rf值、阳离子质谱测定分子量。【结果】分离到1株能液化琼脂糖的海洋细菌JZB09,鉴定至桃色杆菌属(Persicobacter)。JZB09能利用11种不同的多糖为唯一碳源生长,在利用琼脂糖、纤维素和木聚糖时生长较好。胞外粗酶制剂的琼胶酶活力约77.2U/mg,含有至少2条琼胶酶,大小约45kDa、70kDa。酶制剂降解琼脂糖后的产物是系列新琼寡糖,四糖是主产物,表明β-琼胶酶在胞外琼胶酶系降解琼脂糖时起关键作用。【结论】海洋细菌Persicobacter sp.JZB09是1株多能型多糖降解菌,可分泌β-琼胶酶降解琼脂糖且活性显著,具有潜在开发价值。
- 韩文君赵帅刘会会吴志红顾谦群李越中
- 关键词：琼胶酶寡糖
- 从海洋中分离的弧菌QY102褐藻胶裂解酶的纯化和性质研究被引量：13
- 2003年
- 从马尾藻 (Sargassum)表面分离到一株产生高效胞外褐藻胶裂解酶的海洋弧菌 (Vibriosp .)QY1 0 2。以褐藻胶为唯一碳源发酵培养后 ,发酵液上清通过 0 2 2 μm滤膜过滤、DEAE Sepharose离子交换和Superdex75凝胶过滤得到电泳纯的褐藻胶裂解酶。酶的性质研究表明 :其分子量约为 2 8 5kD(SDS PAGE) ,反应最适温度为 40℃ ,最适pH为 7 1 ,Ca2 +、Mg2 +对酶活有促进作用 ,而Ni2 +、Al3+、Zn2 +、Ba2 +对酶活有抑制作用。该酶的活性明显高于已报道的褐藻胶裂解酶 ,pH稳定范围广 ( 5～ 1 0 ) ,并且对聚甘露糖醛酸的活性高于对聚古罗糖醛酸的活性。
- 李京宝于文功韩峰韩文君宋凯
- 关键词：弧菌褐藻胶裂解酶纯化
- 海洋细菌Flammeovirga yaeyamensis MY04分泌型多糖降解酶的基因克隆与序列分析
- F.yaeyamensis MY04能分泌十余种多糖降解酶,包括耐热、耐碱的琼胶酶系。为发掘该菌株丰富的多糖降解酶基因资源,用pCC1FOS构建了基因组DNA文库,包装滴度是5×10CFU/ml,平均插入片段长度大于30...
- 韩文君古静燕李俊刚顾谦群吴志红李越中
- 关键词：琼胶酶基因
- 文献传递
- 一种褐藻胶裂解酶基因algL及其制备方法和应用
- 一种褐藻胶裂解酶基因algL，其特征在于它编码海洋假单胞菌QDA的褐藻胶裂解酶的基因。制备时，以简并PCR筛选法自海洋假单胞菌QDA的基因组DNA文库中克隆褐藻胶裂解酶基因algL。用本发明的褐藻胶裂解酶基因algL生产...
- 于文功韩文君韩峰路新枝宫倩红
- 文献传递
- 海洋溶胶细菌Flammeovirga sp.MY04琼胶酶(系)的研究
- 海洋细菌Flammeovirga sp.MY04能直接液化琼脂糖，生成水溶性低聚糖和寡糖，具备用于固相发酵的潜力。因此，MY04是1株高效的琼胶酶资源菌，具有良好的应用价值和开发意义。
本文先后通过MY04胞外琼胶...
- 韩文君
- 关键词：功能位点海洋细菌
- 文献传递
