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促红细胞生成素(EPO)对叶酸在Caco-2细胞中跨膜转运的影响被引量：2: 2014年; 目的采用人结肠腺癌细胞系（human colon adenocarcinoma cell line）Caco-2单细胞层模型观察促红细胞生成素（erythropoietin，EP0）对叶酸跨膜转运的影响。方法采用Caco-2单层细胞模型，观察不同剂量EPO（0．3、1、3U／mL）处理对叶酸在摄取与外排双向转运方面的影响。通过realtime-PCR与Westernblot观察EPO处理对质子偶联的叶酸转运体（protoncoupledfolatetransporter，PCFT）、还原叶酸载体（reducedfolatecarrier，RFC）以及多药耐药相关蛋白2（muhidrugresistance-associatedprotein2，MRP2）表达的影响。结果EPO在剂量0．3～3U／mL范围内可剂量依赖地增加叶酸在摄取方向的转运，增幅分别为31．6％、61．5％和120．5％。高剂量EPO（3U／mL）对叶酸在外排方向的转运也具有促进作用，增幅为56．9％，而中低剂量EPO（1、0．3U／mL）对叶酸外排无明显作用。叶酸转运体PCFT、RFC及MRP2均受EPO影响而表达上调，并呈剂量依赖和时间依赖关系。结论EP0可上调叶酸的摄取并呈剂量依赖关系，高剂量EPO对叶酸的摄取与外排具有双向促进作用。; 言君凯靳桂英李豪男杨青; 关键词：叶酸 CACO-2细胞

siRNA干扰Caco-2细胞鞘磷脂合酶2(SMS2)基因对药物转运体的影响: 2014年; 目的研究鞘磷脂合酶2(sphingomyelin synthase 2,SMS2)缺损对人结肠癌细胞(colon cancer cell,Caco-2)中药物转运体P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的表达与功能的影响。方法 SMS2特异性siRNA转染至Caco-2细胞。采用RT-PCR和real-time PCR检测SMS2-特异性siRNA的干扰效率;采用Western blot法检测siRNA转染后P-gp和MRP2蛋白表达的变化;采用胞内蓄积试验,通过HPLC检测P-gp及MRP2专一性底物罗丹明123及普伐他汀的蓄积含量,分析下调SMS2水平对Caco-2细胞中P-gp及MRP2功能的影响。结果应用siRNA下调SMS2水平后,P-gp和MRP2的蛋白质水平均显著下调;胞内蓄积实验结果显示罗丹明123及普伐他汀的蓄积量明显增加,说明P-gp和MRP2的外排功能减弱。结论SMS2基因表达下调对Caco-2细胞中P-gp和MRP2的表达以及功能均有显著影响。; 靳桂英杨青; 关键词：SIRNA干扰

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靳桂英