陈艳丽
- 作品数：13 被引量：53H指数：5
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技创新人才工程项目河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 二甲双胍对K562细胞增殖、凋亡及糖酵解的影响被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨二甲双胍对K562细胞增殖、凋亡及糖酵解的影响及其可能的作用机制。方法:采用不同浓度二甲双胍(终浓度0、5、10、20和30 mmol/L)作用于K562细胞,分别培养24、48和72 h,倒置光学显微镜下观察细胞生长,应用CCK-8检测细胞活力,筛选出合适的二甲双胍处理浓度(终浓度0、10、20和30 mmol/L)及最佳作用时间(48 h)进行后续实验。应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,葡萄糖和乳酸试剂盒检测葡萄糖消耗和乳酸分泌,采用荧光定量PCR检测糖酵解相关基因表达,采用Western blot法检测蛋白表达。结果:与对照组比较,随着二甲双胍浓度的升高,K562细胞皱缩、密度减小、死亡增多;二甲双胍抑制K562细胞增殖,且呈剂量依赖性(r=0.92),72 h时30 mmol/L组细胞相对存活率低至19.84%。二甲双胍处理K562细胞48 h,0、10、20、30 mmol/L组细胞凋亡比例分别为5.14%、12.19%、26.29%和35.5%。与对照组比较,二甲双胍处理的K562细胞呈现葡萄糖消耗和乳酸分泌均明显减少(P<0.05),且呈剂量依赖性(分别为r=0.94,r=0.93)。二甲双胍抑制K562细胞糖酵解相关基因GLUT1、LDHA、ALDOA、PDK1、PGK1基因的表达(P<0.05),且随着二甲双胍浓度升高,基因表达量减少,呈剂量依赖性(分别为r=0.83,r=0.80,r=0.72,r=0.76,r=0.73)。二甲双胍抑制K562细胞P-Akt、P-S6、GLUT1、LDHA蛋白的表达(P<0.05),呈剂量依赖性(分别为r=0.80,r=0.92,r=0.83,r=0.92)。结论:二甲双胍可通过抑制糖酵解能量代谢,抑制K562细胞生长和增殖,促进K562细胞凋亡,PI3K/Akt/m TOR通路可能是二甲双胍作用K562细胞的分子机制之一。
- 陈惠丽马平陈艳丽孙玲邢莹王峰王芳曹伟杰黄玉敏张荣辉
- 关键词：二甲双胍K562细胞细胞增殖细胞凋亡糖酵解
- 砷剂对准难治性白血病MDR1、Bcl-2基因编码蛋白p170、p26水平的影响
- ：观察三氧化二砷(As2O3)对难治性白血病患者骨髓单个核细胞MDR1、Bcl-2基因编码蛋白p170、p26表达水平的影响,初步探讨其逆转白血病细胞耐药的作用机制. 方法：搜集符合纳入标准的难治性白血病患者46例...
- 石琳程志吴艺吕殿亮冯磊马秋玲韦润红陈艳丽刘现辉赵法荣
- 关键词：难治性白血病雄黄中药药理
- siRNA对HL-60细胞c—myc蛋白表达的影响
- 2009年
- 目的研究小于扰RNA（siRNA）对白血病细胞c—myc蛋白表达的影响，探寻白血病基因治疗的新方法。方法应用针对c—myc的siRNA转染HL-60细胞，分别收集转染后24、48和72h细胞及对照组细胞，提取细胞总蛋白，用Western blotting方法检测c—myc蛋白的表达晴况。结果与对照组相比，转染c—myc siRNA后，细胞c—myc蛋白表达水平明显下降，且c—myc蛋白含量随作用时间的延长而逐渐降低，转染24h后c—myc蛋白含量下降约42％，48h下降66％，72h下降78％；单因素方差分析显示与对照组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论c—myc siRNA能降低HL-60细胞c—myc蛋白的表达，其作用具有序列特异性和时间依赖性，有望成为白血病靶向基因治疗的新工具。
- 陈艳丽孙玲刘延方
- 关键词：白血病HL-60细胞
- C-myc小干扰RNA对HL-60细胞凋亡的影响被引量：7
- 2006年
- 目的:研究c-myc小干扰RNA对白血病细胞凋亡的影响,探寻白血病基因治疗的新方法。方法:应用针对c-myc的小干扰RNA转染HL-60细胞48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态学变化,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA梯形带和流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡。结果:c-myc小干扰RNA作用后,HL-60细胞生长受抑,可见细胞核固缩,胞桨内出现凋亡小体。阴性对照组和空白对照组没有明显变化。DNA电泳干扰组出现典型的梯状条形带,对照组未出现明显凋亡梯形带。流式细胞仪分析干扰组细胞凋亡率可达26.21±0.75%,明显高于阴性对照组的4.58±0.48%和空白对照组的3.76±0.30%。结论:c-myc小干扰RNA对HL-60细胞有明显的抑制作用,可抑制细胞增殖,导致细胞凋亡,有望成为白血病靶向基因治疗的新工具。
- 陈艳丽刘延方岳保红赵小强马鸿雁孙玲
- 关键词：C-MYCSIRNAHL-60细胞凋亡
- RNA干扰对白血病细胞系HL-60增生的影响被引量：1
- 2006年
- 目的研究针对c-myc基因的小分子干扰RNA片断(siRNA)对白血病细胞系HL-60细胞增生的影响,探讨应用siRNA进行白血病基因治疗的可能性。方法制备特异性对应c-myc基因的siRNA转染HL-60细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞增生状态,流式细胞仪进行细胞周期分析。结果siRNA转染HL-60细胞后,细胞生长受抑,增生能力减弱,其增生抑制作用于转染后48h、72h最明显,增生抑制率分别为53.2%和51.5%;S期细胞比值由(56.1±4.7)%降至(17.8±3.2)%,细胞阻滞在G0/G1期。结论针对c-myc基因的siRNA对HL-60细胞增生有明显抑制作用,有望为白血病治疗提供新的途径。
- 孙玲赵小强岳保红陈艳丽刘小转
- 关键词：C-MYC基因
- 中西医结合治疗重型再生障碍性贫血26例被引量：3
- 2009年
- 目的:观察多种药物联合治疗重型再生障碍性贫血的疗效及中西医结合治疗重型再生障碍性贫血的效果。方法:联合应用抗淋巴细胞球蛋白和环孢素及中药治疗重型再生障碍性贫血,从患者临床表现及血常规、骨髓象变化观察治疗效果。结果:治疗总有效率达89%,显著高于单用环孢素或抗淋巴细胞球蛋白治疗,且取得临床缓解的时间明显缩短。结论:中西医结合方法治疗再生障碍性贫血有较好的疗效。
- 陈艳丽程志韦润红吴艺冯磊石琳马秋玲陈疏敏刘现辉
- 关键词：重型再生障碍性贫血抗淋巴细胞球蛋白环孢素
- 核干细胞因子基因在急性白血病细胞表达的检测和意义被引量：17
- 2006年
- 目的检测核干细胞因子(Nucleostemin,NS)基因在急性白血病细胞的表达情况,探讨NS基因与急性白血病发病机制之间的关系。方法从NS基因的3个变异体中筛选出共同序列设计特异性引物,应用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)对白血病细胞系K562、HL60和急性粒细胞白血病(M1、M2a和M3),急性单核细胞白血病(M5a和M5b),急性淋巴细胞白血病(ALL)进行NS基因表达水平的检测,以健康人和良性贫血患者骨髓单个核细胞作为对照。PCR产物片段为418bp。结果K562、HL60明显高表达NS基因,它与内参相比灰度值分别为0·735±0·260、0·449±0·190;急性白血病病例有相似的结果。M1+M2a、M3、M5a、M5b、ALL的灰度值分别为0·687±0·210、0·408±0·160、0·866±0·270、0·448±0·190、0·403±0·190;对照组健康人和良性贫血不表达或极微弱表达NS基因;同一细胞类型白血病,细胞分化停滞在早期阶段的表达NS基因的水平明显高于细胞分化停滞在后期的白血病,如K562高于HL60;M1、M2a高于M3;M5a高于M5b(P<0·01)。结论NS基因在急性白血病细胞中呈高表达状态,这与白血病的发生、发展有一定关联;不同分化阶段的白血病细胞表达NS基因水平存在着差异。NS基因在急性白血病细胞的表达情况也显示了癌细胞和干细胞在某些方面的相似性,可能是一个潜在的基因治疗靶位。
- 岳保红孙玲赵小强陈艳丽王清霞刘帅张钦宪
- 关键词：干细胞因子
- 阳离子脂质体VEGF反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响被引量：1
- 2005年
- 目的观察阳离子脂质体VEGF反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的作用。方法应用阳离子脂质体VEGFASODN转染HI60细胞48h后,观察细胞形态,电泳法检测DNA梯状带和流式细胞仪AnnexinVFITC/PI检测细胞凋亡。结果VEGFASODN组VEGFmRNA的表达完全抑制,VEGFMSODN组和空白对照组的VEGFmRNA的表达没有明显变化,细胞生长受抑制可见细胞固缩,DNA电泳出现典型的梯状条形带,流式细胞仪分析细胞凋亡率可达23.28%,明显高于VEGFMSODN组的8.21%和空白对照组。结论VEGFASODN可抑制白血病细胞VEGFmRNA的表达,导致白血病细胞的凋亡,VEGF基因与白血病细胞的凋亡有关。
- 王一浩孙玲褚彬马鸿雁岳保红陈艳丽赵小强刘少君
- 关键词：血管内皮生长因子反义寡核苷酸白血病凋亡
- 难治性髓系肉瘤1例的诊治体会及文献复习
- 肉瘤(myeloid sarcoma,MS)为髓系原始细胞在骨髓以外部位形成的瘤性肿物.独立的髓系肉瘤较少见,多为个案报道,本科收治1例髓系肉瘤患者,诊治过程颇为曲折。笔者认为，MS患者，尤其孤立性MS，易误诊，诊断时一...
- 陈艳丽韦润红刘现辉程志
- 关键词：髓系肉瘤疾病诊断
- T7启动子介导体外构建Nucleostem in特异性短发夹状干扰RNA被引量：4
- 2006年
- 目的体外构建合成针对Nuc leostem in(核干细胞因子,NS)基因的短发夹状干扰RNA(shRNA),用于进一步研究以该基因为靶目标、RNA干扰(RNA interference,RNA i)为手段的白血病基因治疗可行性。方法从Nuc leostem in基因的三个变异体cDNA共同序列中筛选出2个3′端为AA的21个碱基片段作为shRNA合成的对应序列,9个碱基的5′-UCUCUUGAA-3′作为Loop环。以23个碱基的5-′GGATC-CTAATACGACTCACTATA-3′作为T7启动子(T7 Promoter)序列,构建shRNA的体外合成双链DNA模板,一条链5′端无AA,顺序为启动子、shRNA正义信息链、Loop环、shRNA反义信息链,共70个碱基;另一条是该链的互补链,5′端带有AA,共72个碱基。在T7 RNA聚合酶(T7 RNA polym erase)作用下合成shRNA,纯化后通过凝胶电泳比较灰度值确定shRNA浓度;shRNA作用于HL-60细胞,通过观察细胞形态变化和NS-mRNA抑制率验证干扰效果。结果体外合成的两条shRNA电泳无降解和弥散现象,浓度分别为5.24μmol.L-1和3.35μmol.L-1;干扰HL-60细胞48 h后,细胞密度和聚集程度下降,细胞之间大小相差悬殊,经shRNA-NS-2作用的HL-60细胞一部分由圆形变成了梭形并有明显的伪足;与对照组相比NS-mRNA抑制率分别达到37.82%和71.88%。结论体外成功构建和合成了两条针对Nu-c leostem in基因的shRNA,且抑制该基因表达的作用明显,shRNA-NS-2使HL-60细胞形态发生了改变。所合成的shR-NA-NS-2可作为进一步研究该基因和探索白血病的基因治疗的工具。
- 岳保红朱晓燕孙玲赵小强陈艳丽王清霞刘帅张钦宪
- 关键词：T7启动子核干细胞因子体外构建DNA模板
