陈立军 作品数:14 被引量:18 H指数:2 供职机构: 华南农业大学兽医学院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 动力工程及工程热物理 更多>>
FMDV siRNA系统的构建及特异性抑制FMDV相关基因的表达 利用RT-PCR方法分段扩增出FMDV的IRES、L、VP1、2B和3D基因,分别将这些基因克隆到pEGFP-Cl载体中,构建了5个融合表达质粒:pEGFP-IRES、pEGFP-L、pEGFP-VP1、pEGFP-2B... 陈立军 陈金顶关键词:口蹄疫病毒 RNA干扰 基因克隆 文献传递 口蹄疫病毒VP1与3ABC基因片段的克隆及表达 被引量:1 2008年 根据GenBank中注册的O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1和3ABC基因序列,设计了2对引物.采用RT-PCR方法从FMDV分离株O/HK/2001扩增得到VP1和3ABC基因.经对它们的核苷酸序列测序和同源性比较,显示与14株O型FMDV参考毒株中的O/HKN/2002同源性最高(分别为98.3%和98.6%),并且在VP1决定各种亚型FM-DV免疫原性的主要抗原决定族的144、148、154和208位关键氨基酸,比对均未发现变异.通过酶切将VP1和3ABC基因分别亚克隆到4个表达载体pET-30a、pPROEX HTb、pQE30和pQE9中构成重组表达质粒,利用IPTG诱导表达,经SDS电泳分析表明这些重组质粒在相应表达宿主菌BL21、DH5α和M15中,除pQE30-3ABC和pQE9-3ABC外均获得了表达,其中pET-30a和pPROEX HTb载体表达量较高. 索青利 赵明秋 琚春梅 陈金顶 王伟利 陈立军关键词:口蹄疫病毒 VP1基因 3ABC基因 猪瘟病毒感染对猪树突状细胞免疫学功能影响的研究 研究猪瘟病毒(CSFV)感染对树突状细胞(DC)功能的影响。将CSFV GXW-07株以MOI=1的量感染未成熟DC,流式细胞术检测显示,GXW-07株的感染不影响DC表面分子MHC-Ⅱ的表达,但可上调其表面分子CD17... 陈立军 赵明秋 琚春梅 沈海燕 康艳梅 胡永明 陈金顶文献传递 CSFV对猪树突状细胞表面分子表达的影响 本研究通过分离猪外周静脉血,用贴壁法获得单核细胞,体外联合应用重组猪源GM-CSF和IL-4诱导培养DC。用CSFV感染和灭活CSFV作用于DC,用流式细胞术检测猪DC表面MHC-Ⅱ-DR、CD1和CD172a的表达,分... 王伟芳 沈海燕 赵明秋 琚春梅 高健潜 陈立军 陈金顶关键词:猪瘟病毒 病毒感染 免疫学检验 树突状细胞 文献传递 口蹄疫病毒G-01株基因组编码区的序列分析 本研究参考GenBank中O型FMDV全基因序列,分段设计了9对引物,应用RT-pCR方法对G-01株的基因组编码区序列进行了克隆和序列测定,获得了该毒株基因组编码区的核苷酸序列(6966bp)并推导出其编码的氨基酸序列... 索青利 陈立军 黄忠强 陈金顶关键词:口蹄疫病毒 文献传递 猪瘟病毒感染对猪树突状细胞免疫学功能影响的研究 为了研究猪瘟病毒(CSFV)感染对树突状细胞(DC)功能的影响。将CSFV GXW-07株以MOI=1的量感染未成熟DC,流式细胞术检测显示,GXW-07株的感染不影响DC表面分子MHC-Ⅱ的表达,但可上调其表面分子CD... 陈立军 赵明秋 琚春梅 沈海燕 康艳梅 胡永明 陈金顶关键词:猪瘟病毒 树突状细胞 IL-10 文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对Marc-145细胞NF-κB信号通路影响的研究 本研究用PRRSV经典株GD-XH和变异的高致病性PRRSV GD08-1感染Marc-145细胞,于感染后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h收集细胞,抽取胞浆蛋白和核蛋白。取48 h核蛋白,用EMSA... 康艳梅 陈立军 沈海燕 赵明秋 琚春梅 陈金顶关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 NF-ΚB MARC-145 IΚB 文献传递 FMDV O/HK/2001株基因组编码区的基因克隆与序列分析 本研究参考GenBank中O型FMDV全基因序列,分段设计了9对引物,应用RT-PCR技术对O/HK/2001株的基因组编码区序列进行了克隆和序列测定,获得了该病毒株基因组编码区的核苷酸序列并推导出氨基酸序列.并将O/H... 索青利 陈立军 陈金顶关键词:口蹄疫病毒 基因克隆 文献传递 网络资源链接 饲料中羊源组织成分的PCR检测 被引量:1 2009年 应用Chelex-100快速提取动物基因组DNA的方法,并根据羊线粒体基因的核苷酸序列设计1对引物,通过对分离的DNA进行PCR扩增、基因克隆及核苷酸序列分析,实现了对动物源性饲料中羊组织成分的检测.结果显示,该方法对羊组织DNA检测的敏感性可达20.16 pgμ/L,当肉骨粉样品中含有质量分数为0.050%的羊源性成分时仍能检出,整个过程约需3 h. 徐艳芳 琚春梅 陈立军 赵明秋关键词:PCR检测 饲料 口蹄疫病毒VP1基因siRNA重组腺病毒的构建及其介导的RNAi抑制口蹄疫病毒复制的研究 被引量:1 2010年 本研究选择O型FMDV VP1基因上保守序列作为可能的干扰位点,合成了siRNA,将siRNA克隆到pSIREN-Shuttle中,获得siRNA重组表达载体pShuttle-VP1。用限制性内切酶PI-Sce I和I-Ceu I双酶切siRNA重组表达载体和腺病毒质粒载体pAdeno-X,利用体外连接法获得了重组质粒。经过PCR扩增、酶切鉴定及序列测定,证明成功构建了重组腺病毒质粒pAdeno-VP1。利用脂质体转染法,将Pac I线性化的重组腺病毒质粒pAdeno-VP1转染HEK293细胞,包装成重组腺病毒rAdeno-VP1。经过PCR鉴定正确后大量增殖,增殖的重组腺病毒经过浓缩、纯化得到了高滴度的病毒。用终点稀释法测定病毒滴度为2.5×109PFU/mL。将rAdeno-VP1感染IBRS-2细胞后,12 h后再加入100TCID50的FMDV O/HKN/2003。结果显示,重组腺病毒能够抑制FMDV的复制。 贾俊涛 陈立军 赵明秋 琚春梅 吕英然 陈金顶关键词:口蹄疫病毒 重组腺病毒