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MyD88在OK-432诱导树突状细胞成熟中的作用被引量：2: 2010年; 目的探讨小鼠骨髓树突状细胞(DCs)髓性分化蛋白88(MyD88)在OK-432诱导DCs成熟中的作用机制。方法分离小鼠骨髓单核细胞(BMMCs),在含10%胎牛血清、重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)的培养体系中诱导培养,所得的细胞即为DCs。于培养的第5天,将细胞分为3组:对照组不加OK-432和MyD88 si RNA;OK-432组加入终浓度为5μg/mL的OK-432;RNA干扰组加入MyD88 si RNA12 h后,再加入5μg/mL OK-432刺激。半定量RT-PCR法检测DCs中MyD88的表达;ELISA法检测各组DCs分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-12的能力;MTT法检测DCs体外刺激同种混合淋巴细胞增殖的免疫活性。结果OK-432组DCs的MyD88高表达、TNF-α和IL-12释放明显增加并能诱导较强混合淋巴细胞反应,而用MyD88 si RNA干扰后以上效应均降低(P<0.05)。结论靶向MyD88 si RNA可明显抑制小鼠DCs中MyD88的表达和OK-432诱导的DCs成熟,表明MyD88介导OK-432诱导的DCs成熟。; 倪秀雄刘丽燕刘永建曾真袁明洲陈玄; 关键词：小分子干扰免疫耐受

OK-432增强脐血树突状细胞瘤苗抗胃癌作用的实验研究被引量：1: 2008年; 目的:用脐血浆代替胎牛血清,观察OK-432对脐血来源的树突状细胞(DCs)功能的影响,探讨制备高效抗肿瘤DCs疫苗的优化方案。方法:分离脐血单个核细胞并在含10%同源脐血浆、GM-CSF和IL-4的培养体系中诱导培养,部分加入肿瘤冻融抗原和/或OK-432冲击,MTT法检测DCs体外刺激同种混合淋巴细胞增殖的免疫活性,LDH法检测DCs诱导的CTL对不同靶细胞的细胞毒作用。结果:收集第9 d的各组DCs,肿瘤冻融抗原冲击后的DCs呈成熟形态,能呈递胃癌相关抗原给淋巴细胞刺激其增殖并诱导对胃癌细胞株特异的CTL毒性。OK-432联合肿瘤冻融抗原冲击能增强其抗原呈递功能,诱导更强的混合淋巴细胞增殖反应及针对胃癌细胞株的强烈CTL杀伤效应。结论:该DCs培养方案具有培养时间短、细胞因子消耗少、试剂简单等优点,可用于制备DCs肿瘤疫苗,有临床应用价值。; 倪秀雄陈玄张文豪; 关键词：树突细胞胎血 OK-432

沙培林在制备脐血树突状细胞瘤苗中的应用: 目的用脐血浆代替胎牛血清，减少体外诱导培养树突状细胞(Dendriticcells，DCs)所需的细胞因子，观察沙培林对脐血来源的DC功能的影响，探讨制备高效抗肿瘤DC疫苗的优化方案，为以后应用于临床抗肿瘤治疗打下基础。...; 陈玄; 关键词：树突状细胞抗肿瘤疫苗胃癌细胞肿瘤治疗; 文献传递

脐血浆培养的脐血树突状细胞对胃癌细胞的特异杀伤作用被引量：5: 2009年; 目的尝试用脐血浆代替胎牛血清培养脐血树突状细胞(DCs),并使之负载胃癌抗原,观察其对胃癌细胞的特异杀伤作用。方法分离脐血单个核细胞(CBMCs)并在含10%同源脐血浆的培养体系中诱导培养,部分细胞加入胃癌冻融抗原冲击。流式细胞仪检测细胞表面抗原CD1a和CD83表达,MTT法检测DCs体外刺激淋巴细胞增殖活性,LDH法检测DCs诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTLs)对胃癌及肝癌细胞的细胞毒作用。结果CBMCs能分化为表型正常的未成熟DCs,并进而吞噬胃癌细胞冻融抗原成熟,刺激淋巴细胞增殖并诱导对胃癌细胞株特异的CTLs毒性。结论脐血浆培养的脐血DCs能有效捕获胃癌冻融抗原,激发针对胃癌细胞的特异杀伤效应。本实验采用的DCs制备方法具有方法简单、成本较低、瘤苗制备时间较短等优点。; 陈玄倪秀雄张文豪; 关键词：脐血浆树突状细胞胃癌瘤苗

常用辅助生殖技术对子代小鼠糖脂代谢功能的影响及其机制研究: 1、ART对子代小鼠一般生长情况的影响　　目的：　　对移植、超排、体外受精、卵母细胞体外成熟等最常用辅助生殖技术(Assisted reproductive technology，ART)的子代小鼠进行长期观察，分析比较...; 陈玄; 关键词：辅助生殖技术糖脂代谢表观遗传印迹基因; 文献传递

沙培林诱导脐血树突状细胞的成熟被引量：7: 2006年; 目的改进体外诱导脐血树突状细胞(DC)成熟的方案,为后期制备临床使用的抗肿瘤DC疫苗提供新的技术路线。方法分离脐血单个核细胞(CBMC)并在含10%同源脐血浆、重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白细胞介素-4(rhIL-4)的培养体系中诱导培养,部分加入肿瘤冻融抗原和/或沙培林(OK-432)冲击,光镜和电镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测培养前后各组细胞表面抗原CD1a和CD83的表达情况。结果培养过程中,细胞形态发生明显变化,呈现典型的DC形态。收集第9天各组DC,细胞表面均高度表达CD1a和CD83,与贴壁分离的CBMC比较有统计学意义,肿瘤冻融抗原冲击后,DC表面CD1a和CD83的表达上调,沙培林进一步刺激后,CD1a和CD83表达率显著升高。结论诱导脐带血来源的前体细胞分化为未成熟DC的途径相对简便;沙培林能促进肿瘤冻融抗原冲击后的脐血DC进一步成熟。; 倪秀雄陈玄张文豪; 关键词：树突细胞胎血

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陈玄