哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)是调控细胞代谢、生长和增殖等重要生命活动的蛋白激酶,mTOR异常表达在卵巢癌发生发展中起重要作用,已成为卵巢癌治疗的有效靶点。mTOR抑制剂雷帕霉素及其同系物能够抑制卵巢癌细胞生长和血管生成,并同其他抗肿瘤药物有协同作用,靶向mTOR的研究将为卵巢癌的临床治疗带来新希望。
肿瘤的发生发展涉及多个细胞信号传导通路,其中核因子-κB(Nuclear factor-kappaB,NF-κB)通路和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)通路尤为重要,已成为研究肿瘤药物治疗的新靶点。进一步探讨两信号通路间存在的交联(Cross-talk)及其对肿瘤生物学特性的影响,有助于更好地调控肿瘤细胞的恶性行为。
目的探讨小豆蔻明(Cardamonin,CAR)抑制Raptor(Regulatory associated protein of mTOR)蛋白表达而调控HepG2细胞增殖和凋亡的作用。方法生物信息学分析TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中肝癌患者RPTOR基因表达的差异及其与患者总体生存率、无进展生存期等预后指标关系;CCK-8检测细胞活力;EdU核染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot检测凋亡蛋白cleaved caspase 3、mTORC1信号通路关键蛋白mTOR、p-mTOR、S6K1、p-S6K1及mTORC1特异性结合蛋白Raptor的表达。结果RPTOR基因在肝癌组织中的表达水平高于正常组织(P<0.05),且高表达患者的总体生存率和无进展生存期显著低于低表达的患者(P<0.05);CAR抑制HepG2细胞增殖,诱导HepG2细胞凋亡,增加凋亡相关蛋白cleaved caspase3的表达;CAR降低肝癌HepG2细胞Raptor蛋白的表达,抑制mTOR、S6K1蛋白的磷酸化,但对其总蛋白的表达无明显影响。结论RPTOR基因在肝癌组织中高表达,与总体生存率和无进展生存期呈负相关;CAR可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,促进其凋亡,机制与CAR降低Raptor的表达抑制mTORC1通路活性有关。
