陈久洲
- 作品数：78 被引量：30H指数：4
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院知识创新工程天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 5-氨基乙酰丙酸生产菌株及其构建方法和应用
- 本发明公开了通过增强5‑氨基乙酰丙酸生产菌株中丙氨酸:乙醛酸转氨酶的活性或在5‑氨基乙酰丙酸生产菌株中导入外源性的丙氨酸:乙醛酸转氨酶来构建ALA高产菌株的方法。本发明还公开了利用所述方法构建的ALA高产菌株和利用所述菌...
- 郑平陈久洲周文娟孙际宾马延和
- L-谷氨酸生产关键技术创新与产业化应用被引量：3
- 2022年
- L-谷氨酸是目前产量最大的氨基酸品种,也是我国生产规模最大的生物发酵产品。随着合成生物技术以及新型生产装备和技术的发展,国内L-谷氨酸菌种和生产技术近年来取得了明显的提升。本文从L-谷氨酸产业的现状分析和关键技术创新需求的角度出发,概述了L-谷氨酸菌种和生产技术的研究进展,介绍了近年来L-谷氨酸生产关键技术的创新开发和产业应用的进展。
- 李学朋陈久洲张东旭李树标王小平吕金东周敬许志颖郑平郑平
- 关键词：L-谷氨酸谷氨酸棒杆菌氨基酸生产
- 丙酮酸脱氢酶的突变体及其用于生产L-氨基酸的方法
- 本发明提供的丙酮酸脱氢酶突变体，其在氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的基础上，且其217位突变为丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、脯氨酸中的任一个。所述突变体可以提高菌株L‑氨基酸的产量和转化率，且在提高产量的同时...
- 郑平陈久洲孙际宾蔡柠匀郭轩周文娟刘岯刘娇马延和
- 文献传递
- 5-氨基乙酰丙酸合成酶突变体及其宿主细胞和应用
- 本发明提供一种5‑氨基乙酰丙酸合成酶(ALA合成酶)，所述ALA合成酶的氨基酸序列在对应于SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的部分氨基酸残基发生了突变。本发明的ALA合成酶显著提高了活性和ALA的产量。同时，本发明还提...
- 郑平赵晶谭子瑊陈久洲孙际宾马延和
- 琥珀酸脱氢酶或琥珀酰辅酶A合成酶缺失促进大肠杆菌积累5-氨基乙酰丙酸被引量：4
- 2013年
- 5-氨基乙酰丙酸(ALA)是生物体内四吡咯类化合物的合成前体,在农业及医药领域应用广泛,是极具开发价值的高附加值生物基化学品。目前利用外源C4途径的重组大肠杆菌发酵生产ALA的研究主要利用LB培养基并添加葡萄糖和琥珀酸、甘氨酸等合成前体,成本较高。琥珀酸在C4途径中以琥珀酰辅酶A的形式直接参与ALA的合成。文中在以葡萄糖为主要碳源的无机盐培养基中研究了琥珀酰辅酶A下游代谢途径琥珀酸脱氢酶编码基因sdhAB和琥珀酰辅酶A合成酶编码基因sucCD缺失对ALA积累的影响。与仅表达异源ALA合成酶的对照菌株相比,sdhAB和sucCD缺失菌株ALA的产量分别提高了25.59%和12.40%,且ALA的积累不依赖于琥珀酸的添加和LB培养基的使用,从而大幅降低了生产成本,显示出良好的工业应用前景。
- 蒲伟陈久洲孙村民陈宁孙际宾郑平马延和
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸琥珀酸脱氢酶大肠杆菌基因敲除
- 丙酮酸羧化酶基因启动子的突变体及其应用
- 本发明公开一种谷氨酸棒杆菌丙酮酸羧化酶基因启动子的突变体及其应用。所述突变体比野生型启动子具有提高的启动子活性。由此可以用于增强目的基因表达，例如将其与丙酮酸羧化酶基因可操作地连接，增强了丙酮酸羧化酶的表达强度，由此提高...
- 孙际宾刘娇郑平石拓周文娟陈久洲郭轩马延和
- 具有启动子活性的多核苷酸及其用途和生产目标化合物的方法
- 本公开属于生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种具有启动子活性的多核苷酸，包含具有启动子活性的多核苷酸的转录表达盒、重组表达载体、重组宿主细胞，以及调控目标基因转录的方法、制备蛋白的方法和生产目标化合物的方法。本公开中...
- 郑平陈久洲黄婧文孙际宾周文娟王钰马延和
- 一种转录调控因子LysG的突变体及其应用
- 本公开属于基因工程与分子生物学领域，涉及一种转录调控因子LysG的突变体、编码突变体的多核苷酸、核酸构建体、重组表达载体、重组宿主细胞、生物传感器及用途，调控目标基因表达的方法、生产碱性氨基酸的方法、碱性氨基酸高产菌株和...
- 郑平陈久洲孙际宾蒲伟蔡柠匀周文娟王钰马延和
- 谷氨酸棒杆菌乙酰羟酸合酶的高效表达调控及应用
- 2024年
- 谷氨酸棒杆菌是支链氨基酸工业生产的主力菌,乙酰羟酸合酶(acetohydroxyacid synthase,AHAS)是支链氨基酸合成的关键酶,强化AHAS的表达是提高菌种水平的关键手段。然而目前还未实现高效调控AHAS,本研究首先基于前期开发的靶基因表达调控报告系统,从6个组成型强启动子中筛选乙酰羟酸合酶编码基因ilvBN的高效表达启动子,成功获得P_(gpmA*)启动子,表达强度是PilvBN天然启动子的23.3倍。其次,在P_(gpmA*)启动子基础上,构建并通过平板荧光成像初步筛选了3种人工合成核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)文库,发现“R(9)N(6)”为优势的突变文库,通过进一步的孔板复筛,成功获得36个不同的强度增强的RBS突变体,最高强度可达天然启动子PilvBN的62.3倍。最后,选择P_(gpmA*)启动子分别组合3种RBS(野生型、RBS18和RBS36)调控ilvBNS155F的表达生产L-缬氨酸,L-缬氨酸产量随着表达调控元件强度的增强而提高,分别为1.17、1.38、2.29 g/L。在RBS18调控的基础上进一步组合ilvC过表达,L-缬氨酸产量可达7.57g/L。本研究获得的AHAS表达调控元件库,可为改造AHAS生产L-缬氨酸等支链氨基酸提供丰富元件,并为其他关键酶的表达调控提供思路和方法借鉴。
- 乔倩倩宁舒展王瑞瑞郑宇路福平陈久洲刘娇刘娇
- 关键词：谷氨酸棒杆菌支链氨基酸
- 大肠杆菌细胞外膜渗透性与脂多糖结构的关系(英文)被引量：8
- 2011年
- 细胞外膜是大肠杆菌的半透膜屏障,其主要成分是脂多糖。选取并构造共9种具有不同脂多糖结构的大肠杆菌,用于考察脂多糖结构对细胞外膜渗透性的影响。从9种菌株中提取出脂多糖和类脂A,并且用薄层层析色谱和离子源质谱来鉴定其结构。用N-苯基-1-萘胺作为荧光探针来测定细胞外膜渗透性大小。野生型大肠杆菌表现出最小的渗透性,因敲除或表达某些基因而导致脂多糖结构改变的突变株均表现出较高的渗透性。脂多糖上的磷酸基团、脂肪酸链和多糖链的改变都影响了大肠杆菌的渗透性,其中多糖链长度的改变对渗透性影响最大,其次是脂肪酸链的数目变化。实验结果表明渗透性和脂多糖的结构具有较强的相关性。
- 马鹏胡晓清陈久洲王小元
- 关键词：脂多糖类脂A大肠杆菌
