阎一林
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 供职机构：俄勒冈州立大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金苏州市科技计划项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 膜铁转运蛋白1突变斑马鱼骨形态及骨钙素的变化被引量：2
- 2013年
- 目的观察膜铁转运蛋白1(ferroportin1,FPN1)突变斑马鱼(铁过载动物模型)骨发育及骨量变化,初步了解铁过载状况对骨代谢的影响。方法分别对受精后36和48h的突变体(weh)和野生型(WT)斑马鱼进行邻联茴香胺血液染色,观察weh及WT血红蛋白量的变化,比较铁过载状况;对受精后第14天的weh和WT进行阿尔辛蓝/茜素红染色,比较骨形态差异;分别提取受精后第5天和第7天的weh和WT总RNA,采用实时定量PCR方法检测骨钙素(BGP)的基因表达,比较骨代谢差异。结果邻联茴香胺血液染色后,与WT相比,weh在受精后36h未能着色,48h后轻微着色;对受精后第14天斑马鱼进行阿尔辛蓝/茜素红染色并与WT比较结果显示,weh茜素红着色较浅且肋骨及尾鳍未发育;与WT相比,受精后第5天和第7天weh骨钙素表达量较低(P<0.05)。结论 FPN1突变斑马鱼体内铁代谢异常,同时骨量减低,骨发育迟缓。
- 陈斌李光飞阎一林王晗林华徐又佳
- 关键词：斑马鱼骨钙素
- 铁过载对斑马鱼成骨影响的机制被引量：5
- 2016年
- 目的通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼,通过比较筛选出铁过载对于成骨影响的通道,通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用。方法通过在斑马鱼高铁环境下生存,造成斑马鱼铁过载,在4天后提取其RNA和野生型斑马鱼提取的RNA进行高通量转录组测序比较,筛选出成骨Bmp2通道,并用定量QPCR验证。在体实验中将Runx2a标记的转基因斑马鱼在高铁环境下与正常环境在第九天进行比较,观察其荧光的变化;离体实验中,用Bmp2a带标签的c DNA和Runx2a带标签的c DNA的细胞进行转染,进行荧光素酶报告基因实验,然后用铁干预,观察其变化。结果通过高通量转录组测序发现高铁对于Bmp2抑制,并用定量验证发现铁过载后Runx2a,Runx2b,sp7等成骨基因均下调,观察发现Runx2a标记的转基因斑马鱼高铁环境下与正常环境相比基因表达明显下调,在细胞转染实验中,荧光素酶报告基因Runx2a在Bmp2a转染下大幅升高,转染铁后Runx2a下降。结论通过高通量转录组测序,我们发现铁过载对于BMP2的抑制影响,运用在体以及离体的一系列实验证实铁过载对Bmp2的抑制作用从而导致成骨代谢的异常。
- 姜宇阎一林朱国兴徐又佳
- 关键词：转基因鱼
- 铁过载通过骨形成蛋白-2影响斑马鱼的成骨
- 2016年
- 我们利用枸橼酸铁铵（FAC）造成高铁环境,将斑马鱼生活在高铁环境造成其铁过载的模型[1],通过实验证实铁过载对骨形态发生蛋白（BMP）-2通道的抑制作用.一、材料与方法1．材料：聚合酶链反应（PCR）基因扩增仪，MicroCL17离心机；StepOnePlus荧光定量PCR仪；GL212pro凝胶成像系统；SZ61体视显微镜。
- 姜宇阎一林朱国兴徐又佳
- 关键词：骨形成蛋白-2铁过载斑马鱼骨形态发生蛋白成骨聚合酶链反应
- 高铁环境对斑马鱼骨形成的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察高铁环境对斑马鱼骨形成的影响,探讨铁过载对骨代谢影响的机制。方法以受精后第2天斑马鱼幼鱼为模型,用不同浓度枸橼酸铁铵(FAC)(0、25、50、100、200μg/mL)干预斑马鱼,受精第6天进行茜素红染色并统计骨矿化面积。在200μg/mL FAC干预6 d基础上,停止添加FAC,加入100μmol/L去铁胺(DFO),第10天行茜素红染色,统计斑马鱼椎体个数,并用实时定量PCR方法检测骨钙素(BGP)基因表达变化。结果不同浓度FAC处理后,斑马鱼骨矿化面积成剂量依赖性降低,100及200μg/mL FAC组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);100μmol/L DFO加入200μg/mL FAC干预组后,斑马鱼椎体个数较未加入DFO组增加,但仍低于对照组(P<0.05);加入100μmol/L DFO组骨钙素(BGP)表达量较未加入DFO组上调,差异有统计学意义(P<0.05),但仍低于正常对照组(P<0.05)。结论高铁环境抑制斑马鱼骨形成。
- 陈斌刘晨李光飞柏林阎一林王晗林华徐又佳
- 关键词：斑马鱼铁骨形成
