金辉
- 作品数：7 被引量：8H指数：1
- 供职机构：广西科学院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家科技支撑计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究被引量：6
- 2011年
- 将已克隆的碱性α-淀粉酶基因信号肽编码序列去除,用PCR的方法加入酶切位点,然后与表达载体pHIS1525连接转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-JH,并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌YYBm1原生质体,获得基因工程菌YYBm1-pHIS1525-JH。SDS-PAGE分析表明该基因在巨大芽孢杆菌中得到了有效表达。酶学性质研究表明,该酶的最适温度与pH值分别为60℃与pH8.5,在pH7.0-10.5之间具有较好的稳定性,Km值为1.94 mg/mL,酶活力可达2 516.5 U。
- 金辉廖思明王青艳刘筱梦黄日波
- 关键词：巨大芽孢杆菌基因表达酶学性质
- 一种不依赖钙离子的酸性α淀粉酶基因的克隆表达被引量：1
- 2010年
- 以产酸性淀粉酶菌株Bacillus sp.CN7的基因组DNA为模板,PCR扩增到α淀粉酶成熟肽基因,将该基因插入表达质粒pSE380中,构建重组质粒pSE380-cn7a。将重组质粒导入到Escherichia coli JM109中,IPTG诱导表达。重组酶经Sephacryl S300、Ni-NTA纯化后测定其酶学性质。重组酶CN7A的最适温度为65°C,最适pH为5.5?6.0,对可溶性淀粉的Km值为3.784g/L,最大反应速度为101.2mg/(L·min),该酶的热稳定性不依赖钙离子。
- 杨键王青艳金辉秦艳王成华黄日波
- 关键词：克隆表达PKA
- Anoxybacillus sp α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达
- α-淀粉酶(EC3.2.1.1)能够以淀粉做为底物，从淀粉内部水解1，4-α-D葡萄糖苷键，因此也被叫做1，4-α-D-葡萄糖苷水解酶，它被广泛应用于发酵、淀粉糖生产、造纸、纺织等行业，具有很大的经济价值。
本实验...
- 金辉
- 关键词：ANOXYBACILLUSΑ-淀粉酶巨大芽孢杆菌产酶条件
- 文献传递
- 淀粉结合域与α-淀粉酶的融合表达及其酶学性质被引量：1
- 2010年
- 利用RT-PCR从Rhizopus oryzaeGX-08总RNA中克隆到糖化酶的淀粉结合域(SBD)基因(sbd),将该基因片段插入α-淀粉酶(CN7A)基因cn7a的5′端构建融合表达质粒pSE-sbdcn7a。嵌合酶SBD-CN7A在Escherichia coliJM109表达,并经Ni-NTA、Sephacryl S300纯化。酶学性质研究表明:嵌合酶在最适作用条件方面与原始酶并无明显差别;在以生玉米粉为底物时,其比酶活提高了8.7倍,而以可溶性淀粉为底物时其比酶活是原始酶的1.8倍,Km也从3.784 g/L降低为2.234 g/L;嵌合酶在65℃下的半衰期从10 min缩短为4 min。结果表明,淀粉结合域SBD的融合赋予了α-淀粉酶CN7A水解生淀粉的能力。
- 杨键金辉王青艳黄日波
- 关键词：热稳定性
- 一种淀粉质与糖蜜混合发酵产高浓度乙醇的方法
- 本发明公开了一种淀粉质和糖蜜混合原料发酵产高浓度乙醇的方法，淀粉质原料加水搅拌定容，经低温液化和同步糖化发酵，并通过分批或者连续流加的补料方式加入糖蜜原料混合发酵，淀粉质原料与糖蜜的混合比为1∶2～8∶1(W/V)，发酵...
- 申乃坤黄日波王青艳陈东黄志民黎贞崇秦艳廖思明王成华陆雁金辉
- 一种淀粉质与糖蜜混合发酵产高浓度乙醇的方法
- 本发明公开了一种淀粉质和糖蜜混合原料发酵产高浓度乙醇的方法，淀粉质原料加水搅拌定容，经低温液化和同步糖化发酵，并通过分批或者连续流加的补料方式加入糖蜜原料混合发酵，淀粉质原料与糖蜜的混合比为1∶2～8∶1(W/V)，发酵...
- 申乃坤黄日波王青艳陈东黄志民黎贞崇秦艳廖思明王成华陆雁金辉
- 文献传递
- 耐温耐酸α-淀粉酶高产菌株的选育及其淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达研究
- 王青艳廖思明王成华申乃坤秦艳谢能中朱婧朱绮霞杜其石金辉
- 课题的来源与背景：课题来源：该课题来源于广西自然基金课题“耐温耐酸α-淀粉酶高产菌株的选育及其淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达研究（2010GXNSFD013030）”。课题背景：α-淀粉酶能从淀粉分子的内部任意切开α-...
- 关键词：
- 关键词：淀粉酶枯草芽孢杆菌
