金辉
- 作品数：26 被引量：70H指数：5
- 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省高等教育教学改革研究项目河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学交通运输工程更多>>
- 纯合子胃壁细胞特异性表达SV40T抗原转基因小鼠品系的建立
- 2010年
- 目的:建立稳定遗传的纯合子SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠品系。方法:通过定量PCR法比较已知杂合子小鼠和未知阳性小鼠中外源基因的起始模板量来确定小鼠的基因型,并通过测交的方法来验证试验结果。结果:用定量PCR法选育出15只纯合子小鼠,经测交验证它们与野生型小鼠交配所生的后代均为阳性,证明了定量PCR的结果是正确的。通过纯合子之间的全同胞交配建立了6个独立的纯合子品系。结论:定量PCR具有省时、省力及高通量等优点,能够很好地应用于筛选纯合子转基因动物。
- 郜十伟刘书漫陈辉李倩茹金辉张钦宪
- 关键词：转基因胃壁细胞
- RNA干扰与肿瘤基因治疗
- 2005年
- RNA干扰(RNAi)为高效特异的基因干扰方法,其主要参与成分为小干扰RNA (siRNA),可特异性抑制mRNA表达。RNAi已广泛用于多种疾病治疗,尤其在肿瘤治疗方面具有独特的优势,为肿瘤的基因治疗提供了新思路。
- 李军扩金辉丁一
- 关键词：RNA双链信号传递基因疗法肿瘤
- 羊心脏蒲肯野纤维和蒲肯野纤维-心肌束连接观察被引量：3
- 2007年
- 目的:观察羊心脏蒲肯野纤维的演化过程和蒲肯野纤维与心肌束连接及其演化关系。方法:12只山羊取心脏后,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察。结果:正常成体羊心室肌层内蒲肯野纤维,按组成细胞的演化程度不同分为6级。蒲肯野纤维-心肌束的连接方式随连接所在部位、蒲肯野纤维的演化程度而不同。结论:正常成体羊心室肌层内的蒲肯野纤维为束细胞和(或)心肌细胞组成的动态结构。蒲肯野纤维与心肌束有多种连接方式,但均反映2者存在演化关系。
- 史学义邢文英金辉张娓张钦宪乐晓萍
- 关键词：心脏传导系统
- 动脉粥样硬化血管的病理学研究被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨动脉粥样硬化的发生机制。方法:对7例动脉粥样硬化标本和6例成人尸检动脉标本,采用福尔马林固定,常规石蜡切片,苏木素-伊红染色,并采用光学显微镜进行观察。结果:动脉粥样硬化可分为弥漫性病变和局灶性病变。弥漫性病变血管与正常成人大动脉相比较,各层组织内有核细胞明显减少。弥漫性病变发病部位常为随机性,常涉及血管壁全层;局灶性病变以泡沫细胞克隆为特征,呈局部性。结论:动脉粥样硬化的弥漫性病变是长期血流动力学异常累积作用的结果,反复附壁血栓形成也促进弥漫性病变的进程。动脉粥样硬化的局灶性病变是在弥漫性病变基础上,成血管干细胞-内膜细胞-平滑肌细胞演化受阻,其过度性细胞的退行性克隆所致,局灶性病变的演化结果又使弥漫性病变进一步扩大、加重。
- 李红军韩金红邢文英金辉高福莲史学义
- 关键词：动脉粥样硬化病理学血管
- 组织学数字切片的制作及应用被引量：8
- 2015年
- 组织学是研究机体微细结构及其相关功能的科学。显微镜观察玻璃切片是实验课授课的重要内容,2005年我校投资建立了集数码显微镜、语音交流系统、图像处理系统、应用软件系统为一体的显微数码互动实验室,取得了良好的教学效果[1]。在此基础上,为了克服玻璃切片的局限性[2],进一步推进数字化实验教学,2012年我们将传统的玻璃组织切片转换为数字切片,并应用于日常组织学实验教学中,为进一步提高教学质量提供了保证。
- 邢文英刘莉金辉冯若丁一
- 关键词：组织学实验教学应用软件系统数码显微镜数码互动实验室显微镜观察
- 混合血清孵育的肺腺癌组织双向蛋白印迹图谱的建立被引量：1
- 2014年
- 目的:建立混合血清孵育的肺腺癌组织双向蛋白印迹图谱。方法:收集2例肺腺癌患者的手术标本,提取癌组织可溶性总蛋白并双向凝胶电泳分离,将蛋白转移到硝酸纤维素膜上,然后分别与4例肺腺癌患者的混合血清和4例良性肺部疾病患者(对照)的混合血清孵育2 h,再加入二抗羊抗人IgG反应2 h,DAB显色。结果:分别建立了肺腺癌混合血清和对照混合血清孵育的肺腺癌组织双向蛋白印迹图谱,两个图谱之间存在明显差异。结论:利用混合血清孵育的肺腺癌组织总蛋白能建立良好的双向蛋白印迹图谱,这为进一步鉴定肺腺癌肿瘤相关抗原奠定了基础。
- 杨继要冯若金辉孙芸丁一
- 关键词：肺腺癌混合血清
- 以“动态”的观念进行肾上腺组织学教学
- 2018年
- 组织学是研究机体微细结构及其相关功能的科学，是一门形态学课程，主要以描述的方法进行教学。本系对甲状腺、血管内皮、肝、肾等方面的内容开展了动态观念的教学，以肾上腺为例，表述动态观念教学的具体实施。早在1866年，Arnold已根据肾上腺皮质各区域细胞的形态学特征，将肾上腺皮质分为球状带、束状带和网状带，该命名法至今仍在应用[1]。
- 邢文英冯若金辉黄忻丁一
- 关键词：组织学教学肾上腺皮质形态学特征微细结构动态观
- p38在二硫苏糖醇与顺铂诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的作用
- 2008年
- 将人食管癌Eca109细胞分为七组,其中三组分别加二硫苏糖醇(DTT,Ds)、顺铂(Cs)及二药联合(Ds+Cs)处理细胞,另三组则先用磷酸化p38特异性抑制剂SB203580孵育,再分别加Ds、Cs及Ds+Cs处理细胞,未加药组作为对照(C′)。采用流式细胞仪技术检测细胞凋亡率。结果与C′比较,各组均存在明显差异(P均<0·01);SB203580孵育细胞后,与相应组别比较,Ds、Cs、Ds+Cs凋亡率均明显下降(P均<0·01)。证实p38MAPK在Ds和Cs诱导食管癌Eca109细胞凋亡中被显著激活,p38MAPK的激活可能是多种上游凋亡信号传导必经的共同通路。
- 冯若刘国红金辉邢文英张钦宪
- 关键词：P38凋亡顺铂DTT
- SV40T抗原胃壁细胞特异性表达载体的构建与鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的:构建在胃壁细胞中特异性表达SV40T抗原的真核表达裁体并进行鉴定.方法:采用酚-氯仿法从昆明小鼠肝细胞中提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增H^+/K^+ATPaseβ亚基启动子,产物命名为HK.将PCR产物纯化回收后与pMT18-T载体相连,并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1(-)/HK;从含SV40T基因片段的质粒p LITAg中酶切回收SV40T基因,与pcDNA3.1(-)/HK相连,构建胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV,并测序鉴定.结果:pcDNA3.1(-)/HKSV用XbaⅠ、BarnHⅠ双酶切可得到1kb H^+/K^+ATPaseβ亚基启动子,2.7 kb SV40T基因与5.4 kb pcDNA3.1(-)载体3条DNA条带.用XbaⅠ、KpnⅠ双酶切电泳,可见到约3.7与5.4 kb的两条DNA条带;用BamHⅠ单酶切电泳,可见到2.7与6.4 kb的2条DNA条带;用EcoRⅠ单酶切,只见到约9.1 kb的1条DNA条带,酶切电泳结果均与设计一致.测序结果显示,H^+/K^+ATPaseβ亚基启动子与SV40T基因成功构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体中.结论:构建在胃壁细胞中特异性表达SV40T基因的真核表达载体,为进一步转基因小鼠及胃癌动物模型的建立提供了稳定、可靠的分子工具.
- 陈辉侯艺芳乐晓平金辉马慧洁张钦宪
- 关键词：T抗原真核表达
- SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠的建立被引量：8
- 2008年
- 目的构建胃壁细胞定位表达SV40T的真核表达载体并制备转基因小鼠动物模型,为研究胃癌发病机制提供动物模型。方法从构建的胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV中酶切回收3.8kb的基因片段H+-K+ATPaseβpromoter/SV40T,通过显微注射的方法制备转基因小鼠,PCR和Southern blotting检测阳性转基因小鼠并建系繁殖,RT-PCR检测基因的表达情况。结果将422枚注射过的受精卵移植给16只假孕雌鼠,共生出77只仔鼠,移植成功率为18.2%。在出生的77只仔鼠中,2#、4#、8#、16#、24#、51#、57#、61#、68#、73#经PCR检测为阳性首建鼠。除68#不育外,其他9个品系首建鼠共生出99只F1代鼠。8#品系23只F1代尚未发现阳性鼠,另8个品系F1代经PCR和Southern blotting检测发现31只阳性鼠,阳性率为40.8%(31/76)。RT-PCR检测F1代阳性鼠均仅在胃组织中有SV40T基因的表达,而在心、肝、肾、肺、食道、肠、骨骼肌等组织中均不表达。不育首建鼠处死解剖发现胃组织有肿瘤存在。结论建立了胃壁细胞定位表达SV40T基因的转基因小鼠动物模型。
- 陈辉金辉杜春艳顾鹏宇王纯耀张钦宪高翔
- 关键词：SV40T抗原SOUTHERNBLOTTING转基因小鼠
