郑江花 作品数:23 被引量:55 H指数:4 供职机构: 复旦大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市自然科学基金 上海市卫生局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
结核性胸膜炎患者胸腔积液分枝杆菌检测结果分析 被引量:4 2016年 目的 :通过分析结核性胸膜炎患者胸腔积液分枝杆菌检测结果,探讨提高其阳性检出率的方法。方法 :采集267例临床诊断为结核性胸膜炎患者的胸腔积液,离心后弃上清,用氢氧化钠(Na OH)消化处理,磷酸盐缓冲液(PBS)中和离心,取沉淀涂片抗酸染色镜检,接种MGIT960系统培养管和罗氏培养基,分析培养和涂片镜检结果 ,采用χ~2检验比较抗酸杆菌涂片与分枝杆菌培养阳性率的差异,BACTEC MGIT 960系统与罗氏培养阳性率的差异。结果:267例结核性胸膜炎患者胸腔积液经消化处理后,抗酸杆菌涂片阳性者81例,阳性率为30.6%,涂片1~8条/300个视野至1+以下者占涂片阳性的97.5%。罗氏培养233例,培养阳性39例,阳性率为16.7%,培养1+以下者为97.4%。MGIT960系统培养221例,培养阳性72例,阳性率为32.6%。消化后涂片法阳性率高于罗氏培养法(χ~2=7.92,P〈0.01),MGIT960系统培养阳性率高于罗氏培养阳性率(χ~2=11.30,P〈0.01);MGIT960系统培养阳性率高于消化后涂片法(χ~2=0.31,P〉0.05)。结论:结核性胸膜炎患者胸腔积液中抗酸杆菌菌量少。胸腔积液经消化集菌可显著提高抗酸杆菌涂片阳性率。相比罗氏培养,MGIT 960系统能显著提高分枝杆菌培养的阳性率。 钱雪琴 朱文芳 郑江花 卢水华 宋言峥关键词:结核性胸膜炎 胸腔积液 BACTEC MGIT 抗酸杆菌 肺炎嗜衣原体CPAF重组蛋白致小鼠肺组织炎症及对炎症细胞因子的影响 被引量:10 2011年 目的:研究肺炎嗜衣原体(Chlamydophila pneumoniae,Cpn)蛋白酶样活性因子(CPAF)的181400aa基因(CPAFm)的重组蛋白在BALB/c小鼠体内引起的肺部炎症改变及对炎症细胞因子TNF-α和IL-6的水平的影响,为进一步探索CPAF在Cpn感染中的致病作用提供实验依据。方法:将纯化的CPAFm重组蛋白于鼻内或尾静脉注射BALB/c小鼠,HE染色观察肺组织病理形态学改变,计小鼠外周血与支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluids,BALF)中白细胞总数,ELISA方法检测血清和BALF中的TNFα-和IL-6的水平。结果:实验组BALB/c小鼠的肺组织出现中性粒细胞、淋巴细胞等炎症细胞浸润,对照组与正常组BALB/c小鼠肺组织未见明显病理改变。鼻内滴入重组蛋白实验组BALB/c小鼠BALF中白细胞总数明显高于GST对照组(P〈0.05)、PBS对照组(P〈0.05)和正常组(P〈0.01);鼻内滴入和尾静脉注射重组蛋白实验组BALF中炎症因子IL-6、TNF-α的水平明显高于GST、PBS对照组与正常组(均P〈0.01);鼻内滴入重组蛋白实验组外周血中炎症因子IL-6和TNF-α水平显著高于GST、PBS对照组和正常组(P〈0.05);尾静脉注射重组蛋白实验组外周血中炎症因子IL-6的水平明显高于相应的对照组(均P〈0.01)。结论:CPAFm重组蛋白有致病性,能引起BALB/c小鼠肺组织的炎症损伤和炎症因子TNF-α、IL-6的水平的升高,肺损伤与BALB/c小鼠体内炎症细胞增多和炎症因子TNF-α、IL-6的水平的升高相关。 王华丽 吴移谋 郑江花 朱翠明 李忠玉 周洲 余敏君关键词:肺炎嗜衣原体 重组蛋白 炎症细胞因子 肺炎嗜衣原体CPAF诱导THP-1细胞产生前炎症细胞因子和凋亡 被引量:1 2010年 目的 研究肺炎嗜衣原体(Chlamydophila pneumoniae,Cpn)衣原体蛋白酶样活性因子(Chlamydial protease-like activity factor,CPAF)能否在体外诱导人单核细胞THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,为进一步探索Cpn感染宿主致病的分子机制提供实验依据.方法 将Cpn CPAF全基因克隆于pGEX6p-2载体上,在大肠杆菌(E coli)中诱导表达重组蛋白,经去内毒素纯化柱和琼脂糖凝胶FF获得纯化且无脂多糖(LPS)污染的重组蛋白GST-CPAF.以不同浓度的该蛋白作用于THP-1,ELISA检测TNF-α吨和IL-6水平.MTT法检测经该蛋白处理后THP-1的增生或抑制作用,用Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Armexin V-FITC-PI染色法检测细胞凋亡情况.结果 制备的莺组蛋白GST-CPAF以时间和剂量依赖方式刺激THP-1分泌TNF-α和IL-6,并以剂量依赖方式抑制THP-1增殖;当GST-CPAF刺激THP-1细胞24 h后,能诱导细胞调亡.结论 制备的Cpn重组蛋白GST-CPAF能诱导THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,可能是Cpn致病机制中的一个因素. 胡旃 吴移谋 陈虹亮 郑江花 周洲 唐国芳关键词:肺炎嗜衣原体 THP-1 前炎症细胞因子 细胞凋亡 前列腺癌差异表达基因的筛选及相互作用的生物信息学分析 被引量:4 2017年 背景与目的:基因芯片技术是利用杂交测序方法,可大规模高通量地检测不同组织、细胞中的基因表达水平的技术。该研究采用基因芯片技术筛选前列腺癌及前列腺炎症穿刺组织中差异表达的基因并对其进行生物学信息分析。方法:采用美国Affymetrix Human U133 plus 2.0基因表达谱芯片,按一步法分别抽提恶性程度较高的前列腺癌及前列腺炎症组织的总RNA,并分离纯化这两种组织的m RNA。经逆转录合成掺入生物素标记的c DNA合成探针,与芯片杂交和严格洗片后,用荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像。用生物信息学方法分析前列腺癌及前列腺炎症组织中差异表达基因。结果:按照表达差异倍数大于等于2,P<0.05的筛选条件,筛选出差异基因1 819条,其中上调表达基因1 025条和下调表达基因794条。采用GO富集分析发现这些差异基因主要涉及细胞周期、分子代谢等分子功能以及生物学过程;KEGG信号通路分析发现,这些差异基因主要涉及嘌呤核苷酸代谢等代谢通路。STING在线工具分析对差异基因编码的蛋白质间的相互作用进行分析,结果发现这些基因编码的蛋白间的相互作用主要集中在TPX2、ANLN、NUSAP1、MELK、DLGAP5、KIF11、TOP2A及RRM2等20个关键节点基因。最后对重要节点基因进行文献挖掘,发现CEP55和ANLN基因可能与前列腺癌的发生和转移有关。结论:在前列腺癌的发生、发展中,促使细胞进入增殖周期的相关基因的活化、代谢相关酶类基因活性的异常、细胞黏附功能相关基因的抑制以及细胞移行相关基因的激活等因素发挥了重要的作用。系统的分析这些基因发现,CEP55和ANLN基因与前列腺癌的发生和预后关系密切,为下一步研究实验提供有价值的线索。进一步研究相关差异基因将有望发现新的早期诊断指标,为建立个体化治疗方案和预后评估系统提供帮助。 夏前林 单孟林 丁滔 朱延军 侯君 郑江花关键词:前列腺癌 基因芯片 差异基因 生物信息学 寨卡病毒病的流行及防控现状 被引量:6 2017年 1947年寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)首次分离自乌干达寨卡森林中的恒河猴,1948年初,人们从当地非洲伊蚊体内分离出ZIKV,血清学研究证实,人类也会被感染。1952年Dick等报道ZIKV通过小鼠脑内传代可产生小鼠适应株,仅7日龄以下的幼鼠能被感染,且感染重复性不好,但2周龄小鼠即使采用大剂量病毒也不能被感染。 汪邦芳 郑江花 兰俊 卢洪洲关键词:防控措施 2006至2008年间某医院感染病原菌谱及其耐药性分析 2009年 目的了解、分析桌医院在2006-2008年间临床分离病原菌的分布及其耐药情况。方法对2006-2008年期间某医院临床微生物室分离到的病原菌,用K-B琼脂扩散法药敏试验的抑茵圈直径输入计算机,采用WHONET5.3软件进行统计分析,根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)2006年标准判定其耐药性。结果在此3年间革兰阳性菌检出构成比稍有上升趋势,而革兰阴性菌略有下降趋势;葡萄球菌属对青霉素的耐药率超过93.0%,对红霉素、阿奇霉素的耐药率超过53.2%;凝固酶阴性葡萄球菌对苯唑西林的耐药率超过73.8%,明显高于金黄色葡萄球菌;肠球菌属对万古霉素的耐药率为1.0%;大肠埃希菌及克雷伯菌属对氨苄西林耐药率均很高;革兰阴性菌对亚胺培南及美罗培南开始出现耐药。结论某医院于2006-2008年间检出病原菌存在严重耐药,及时监测病原菌变化及其耐药趋势以指导临床用药非常重要。 郑江花 肖勇健关键词:病原菌 耐药性 人咽拭子中肺炎嗜衣原体基因型的初步鉴定 被引量:2 2012年 目的了解中国咽部感染患者肺炎嗜衣原体(Cpn)的基因型。方法从中国不同城市收集疑为Cpn感染患者的咽拭子标本465份,巢式PCR扩增Cpn主要外膜蛋白基因(ompA)片段,其中包括4个变异区,对所得58份阳性标本进行ompA基因序列测序,对照Cpn参考株基因,根据同源性对这些临床株基因进行分型。结果从58份Cpn临床株标本中,检出CpnA、CpnB、CpnC、CpnD共4种基因型,14个基因变体,其中以C型最为常见(89.7%),其次依次为A型(5.2%)、B型(3.4%)、D型(1.7%)。结论在中国部分城市,Cpn存在CpnA、CpnB、CpnC、CpnD等4个基因型,其中以C型最为常见,呈现较大的多态性,可为其疫苗的研制提供重要的实验依据。 郑江花 刘庆中 刘佳强 刘卓然关键词:肺炎嗜衣原体 基因分型 艾滋病实验室诊断技术的应用 首先介绍中国艾滋病感染现状,并对艾滋病危险因素进行评估。接着解释输血导致HIV感染病例发生的原因,其中一个主要原因是早期感染者的漏检也是输血导致HIV感染病例发生的原因,所以HIV感染早期准确诊断非常重要。然后介绍HIV... 郑江花应用甲基化基因检测技术分析前列腺癌中HIC1的甲基化状态 被引量:4 2016年 背景与目的:癌高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)因表观遗传甲基化修饰导致其在多种癌细胞和组织中表达沉默,可能与肿瘤的发生、发展有关。而这一现象在前列腺癌研究中的报道甚少。该研究采用甲基化基因检测技术对前列腺癌中HIC1启动子进行甲基化状态分析。方法:采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)和亚硫酸盐测序PCR(bisulfate sequencing PCR,BSP)技术,对前列腺癌细胞PC3、C4-2B和正常前列腺上皮细胞Pr EC,以及前列腺癌组织标本和正常前列腺穿刺标本,进行HIC1启动子甲基化分析;并使用去DNA甲基化酶5-Aza-Cd R处理PC3、C4-2B和Pr EC,经反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分析HIC1在基因水平和蛋白质水平上的变化。结果:MSP分析结果发现,在PC3、C4-2B和Pr EC中HIC1甲基化率分别为78.23%、72.15%和10.63%,差异有统计学意义(P<0.05)。对36例人前列腺癌实体瘤和36例人前列腺正常穿刺组织进行BSP测序,统计显示,甲基化率分别是80.30%和31.56%。5-Aza-Cd R处理后的PC3、C4-2B和Pr EC经RT-PCR和Western blot分析发现,与未处理对照相比,HIC1转录水平和蛋白水平表达均显著上调。结论:在前列腺癌中,抑癌基因HIC1启动子呈高度甲基化状态并出现表达沉默或下调,可作为前列腺癌的早期预测指标和潜在的治疗靶点。 单孟林 丁滔 郑江花 程增辉 郭颖 夏前林关键词:甲基化特异性PCR 前列腺癌 甲基化 膜联蛋白A2表达下调在前列腺癌侵袭转移中作用机制的研究 被引量:1 2013年 目的探讨膜联蛋白(Annexin)A2表达下调在前列腺癌侵袭、转移中的作用机制。方法2010年1月至2012年6月我们采用蛋白质印迹法检测较高转移潜能的前列腺癌细胞C4.2B、较低转移潜能的前列腺癌细胞LNCaP和PC3中AnnexinA2表达水平。siRNA技术干扰前列腺癌PC3细胞中AnnexinA2表达后,噻唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达水平的变化,Transwell小室和划痕实验检测前列腺癌PC3细胞体外侵袭能力及迁移能力的变化。结果C4—2B细胞中AnnexinA2表达水平与内参比较的相对灰度值为0.22,明显低于LNCaP和PC3细胞的0.93和O.95,差异有统计学意义(P〈0.01)。将脂质体、AnnexinA2的siRNA干扰载体质粒和对照载体质粒分别转染到PC3细胞株,构建3个细胞株:PC3-Lip、PC3-ControlVector、PC3-ANXA2-siRNA。采用siRNA技术干扰AnnexinA2表达后,MTT法检测PC3-ANXA2-siRNA细胞生长速度快于PC3、PC3-Lip、PC3-ControlVector细胞,差异有统计学意义(P〈0.05)。流式细胞仪检测PC3-ANXA2-siRNA细胞的凋亡率为(6.2±2.6)%,与PC3的(2.3±1.9)%、PC3-Lip的(2.1±2.0)%、PC3-ControlVector的(2.0±1.8)%比较差异无统计学意义(P〉0.05)。蛋白质印迹法检测PC3-ANXA2-siRNA细胞的AnnexinA2表达水平明显降低,而MMP-2、MMP-9表达水平上调,Transwell小室和划痕实验发现PC3-ANXA2-siRNA细胞体外侵袭及迁移能力增加。结论下调AnnexinA2的表达能增加前列腺癌细胞的体外侵袭和转移能力,可能的作用机制是上调MMP.2和MMP-9的表达。 丁滔 郑江花 洪斌 何春峰关键词:前列腺癌 膜联蛋白A2 基质金属蛋白酶类