邓海华
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 供职机构：南京农业大学生命科学学院微生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学更多>>
- 假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析
- 通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanin...
- 邓海华曹慧李晓丹王世明崔中利李顺鹏
- 关键词：转座子标签法同源重组基因敲入单胞菌
- 文献传递
- PNP降解相关基因温敏突变株的分离及其特性研究被引量：1
- 2007年
- 通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变株中得到1株温度敏感型突变株MT54。根据转座子上的已知序列设计引物以MT54基因组DNA为模板进行PCR扩增,证实MT54的染色体中有转座子插入。MT54在30℃条件下能够以对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)为唯一碳源生长,但在37℃不能生长。格里斯试色剂法检测NO_2^-的生成情况进一步证明了MT54的这种特性。通过30℃和37℃两种温度条件下MT54和原始出发菌株DLL-E4对PNP和对苯二酚降解情况的比较,推测温敏突变位点可能发生在与PNP降解相关的基因中。
- 邓海华李晓丹曹慧王世明黄婷婷崔中利
- 关键词：对硝基苯酚对苯二酚
- 趋化信号转导基因cheA突变对Pseudomonas putida DLL-1甲基对硫磷的趋化性及原位降解的影响被引量：3
- 2007年
- Pseudomonas putida DLL-1是一株甲基对硫磷（MP）高效降解菌株,同时对MP具有趋化性.cheA基因是菌株趋化信号转导过程中负责编码组氨酸激酶的基因,为了研究菌株趋化性在农药原位降解中的作用,通过基因打靶的方式使P.putida DLL-1染色体上单拷贝的cheA基因失活,成功地获得了MP的趋化突变株P.putida DAK,突变株与野生菌株生长能力没有显著差异.通过土壤盆钵试验（MP浓度为50mg/kg）,发现在灭菌与未灭菌土壤中趋化突变株对MP的降解能力低于原始出发菌株DLL-1约20%～30%,说明菌株DLL-1趋化性的丧失会减慢其对农药的降解,趋化性在农药的原位降解过程中发挥重要作用.
- 文阳蒋建东邓海华蓝鸿李顺鹏
- 关键词：趋化性农药降解PUTIDADLL-1甲基对硫磷
- Pseudomonas putida DLL-E4对硝基苯酚降解相关基因的克隆及其功能分析
- 本实验室刘智博士从长期施用甲基对硫磷的污染土壤中分离得到一株能以对硝基苯酚为唯一碳源生长的甲基对硫磷降解菌Pseudomonas putida DLL-E4。通过转座子标签法获得了10 余株失去降解对硝基苯酚功能的插入突...
- 邓海华
- 关键词：对硝基苯酚对苯二酚转座子标签法
- 文献传递
- 假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析被引量：1
- 2008年
- 通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine, Phe)为唯一碳源生长。SEFA-PCR扩增转座子侧翼序列发现其与已报道的尿黑酸1,2-双加氧酶基因hmgA的同源性为92%。将hmgA定向克隆至表达载体pET-29a中,转化至Escherichia coli BL21,经IPTG诱导后可表达分子量约为48kD的蛋白;诱导后转化子粗酶液对尿黑酸有很好的降解效果。将hmgA连入自杀性载体pEX19Gm,通过同源重组整合至M18染色体中,使其恢复了DLL-E4利用Phe的能力,证实了HmgA是尿黑酸苯环裂解酶。
- 沈文静邓海华曹慧李晓丹王世明崔中利李顺鹏
- 关键词：转座子标签法同源重组基因敲入
