赵铭 作品数:10 被引量:56 H指数:4 供职机构: 解放军第309医院 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
应用多重聚合酶链反应技术快速鉴定牛分支杆菌卡介苗株 被引量:4 2003年 目的 建立快速鉴定牛分支杆菌卡介苗 (BCG)菌株的方法。方法 依据最近研究发现的牛分支杆菌BCG菌株不存在命名为缺失区 1(deletedregion 1,RD1)的基因区 ,而其他牛分支杆菌菌株和其他结核分支杆菌复合群 (MTC)菌种 (结核分支杆菌、非洲分支杆菌和田鼠分支杆菌 )存在RD1基因区的遗传学信息 ,应用多重聚合酶链反应 (PCR)检测RD1基因区存在与否 ,以鉴别BCG菌株与其他牛分支杆菌菌株及其他MTC菌种。结果 所试 5株BCG疫苗生产用标准菌株和近期国内发生的 1例小儿BCG接种后全身播散性感染致死病例的 2株BCG分离菌株 ,均缺失RD1基因区 ;其他牛分支杆菌菌株 ,包括 3株牛分支杆菌标准菌株、5株分别从结核病牛或鹿分离的牛分支杆菌菌株 ,1株从结核病患者痰标本分离的牛分支杆菌菌株 ,以及其他MTC菌种 ,包括结核分支杆菌H3 7Rv和H3 7Ra标准菌株、48株从结核病患者痰标本分离的结核分支杆菌菌株、3株非洲分支杆菌标准菌株 ,均存在RD1区。结论 多重PCR技术用于牛分支杆菌BCG菌株的鉴定简便、快速、特异 ,适于在临床实验室应用。 李国利 陈保文 庄玉辉 王国治 赵铭 沈小兵 孙桂芝关键词:结核分支杆菌 BCG 多重聚合酶链反应 卡介苗 结核病 16S~23SrDNA内转录间隔区序列分析及其在分支杆菌鉴定中的应用价值 被引量:28 2002年 目的 研究 16S~ 2 3SrDNA内转录间隔区 (internaltranscribedspacer,ITS)序列在分支杆菌鉴定中的应用价值。方法 应用PCR 直接测序法对 2 2种 30株分支杆菌参考菌株和 16株分支杆菌临床分离菌株 16S~ 2 3SrDNAITS测序。对所测定序列以及GenBank所报道的有关序列用Clustal程序 (MegAlignPackage [WindowsVersion 4 0 1];DNASTAR ,Madson ,Wis)处理分析 ,计算种间相似性 ,用PHYLIPPackage构建分支杆菌菌种聚类分析树状谱。结果 除结核分支杆菌复合群 (MTC)菌种 (结核分支杆菌、牛分支杆菌、非洲分支杆菌和田鼠分支杆菌 ) 16S~ 2 3SrDNAITS序列完全一致外 ,其它分支杆菌菌种间核苷酸排列顺序及长度变异较大 ,种间相似性为 30 4 %~ 86 5 % ,聚类分析树状谱能将各分支杆菌菌种相分离。结果表明 16S~ 2 3SrDNAITS序列分析能将MTC与非结核分支杆菌 (NTM)相鉴别 ,能将NTM鉴定至种的水平。结论 16S~ 2 3SrDNAITS可做为分支杆菌鉴定的靶基因。 李国利 庄玉辉 赵铭 王国治 范以虎 陈保文 胡忠义关键词:分支杆菌 内转录间隔区 聚合酶链反应 NTM 结核病 无反应性结核病2例尸检报道 被引量:4 1998年 无反应性结核病属于暴发性结核性败血症,是一种最严重的特殊类型的血行结核病〔1〕。临床难以诊断,现将我院经尸检确诊的2例报道如下,并结合文献予以分析。1病历及尸检摘要例1,患者,男性,51岁。1994年12月19日入院。入院前2个月发热,午后明显,体温... 姚光大 韩永 王一平 张敦熔 赵铭 王仲元关键词:结核 病理学 免疫抑制 尸检 无反应性 16S-23S rDNA翻译间隔区序列分析及其在分支杆菌鉴定中的应用价值 <正> 目的 研究16S-23S rDNA翻译间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)序列在分支杆菌鉴定中的应用价值。 方法 应用PCR直接测序法对22种37株分支杆菌参考菌株和16株分支... 李国利 庄玉辉 赵铭 范以虎 王国治 陈保文 胡忠义文献传递 聚合酶链反应-微孔板杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌 被引量:5 2002年 目的评价聚合酶链反应 (PCR) -微孔板杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌的价值。方法 :应用结核病细菌学涂片、培养常规检测方法及PCR -微孔板杂交技术检测 138例结核病患者痰标本 ,4 2例非结核呼吸系统疾病患者痰标本。结果 :用常规细菌学方法检测临床标本中结核杆菌敏感度为 37% (5 1/ 138) ,用PCR-微孔板杂交技术检测敏感度为 5 6 % (77/ 138) ,高于常规检测法 19%。用PCR -微孔板杂交技术检测临床标本特异性为 10 0 %。结论 :PCR -微孔板杂交技术将PCR扩增、核酸杂交的技术及酶免技术相结合 ,简便、快速、敏感度高、特异性强 ,是结核病辅助诊断的有效方法之一。 赵铭 李国利 庄玉辉 王巍 徐淼关键词:结核分枝杆菌 聚合酶链反应 微孔板杂交 荧光探针杂交技术检测临床标本内结核分支杆菌的价值 被引量:8 2003年 目的 评价聚合酶链反应 (PCR)荧光探针杂交技术 (TaqMan技术 )检测临床标本中结核分支杆菌的应用价值。方法 应用细菌学方法(涂片镜检和培养 )及TaqMan法检测 1 3 3份结核病患者痰标本 ,5 3份非结核呼吸系疾病患者痰标本。结果 细菌学方法检测结核病患者临床标本中结核分支杆菌阳性率为 3 6.1 % ,TaqMan法阳性率为 61 .7% ,高于细菌学检测法 ,经统计学处理 ,两者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,用TaqMan法检测临床标本特异性为 96.2 %。 结论 TaqMan技术将PCR扩增、荧光探针杂交及检测一体化 ,在单一管内完成 ,具有简便、快速、防污染、敏感性及特异性较高等优点 ,是结核病辅助诊断的有效方法之一。 李国利 赵铭 王巍 夏懿 沈建伟 夏湘萱 庄玉辉 常京元关键词:结核分支杆菌 聚合酶链反应 一期病灶清除人工关节置换治疗晚期活动性全膝关节结核(感染学组) 关长勇 黄迅悟 孙继桐 余方圆 彭伟 冯会成 赵铭 孟祥亮聚合酶链反应分子灯塔法检测结核分枝杆菌 被引量:9 2001年 目的 评价聚合酶链反应 (PCR )分子灯塔法检测临床标本中结核分枝杆菌 (结核菌 )的应用价值。方法 应用涂片镜检法、培养法及PCR分子灯塔法检测 142份结核病患者痰标本 ,42份非结核呼吸系疾病患者痰标本。结果 涂片镜检法检测结核病患者临床标本中结核菌阳性率为 35 .2 % (5 0 / 142 ) ,培养法阳性率为 35 .9% (5 1/ 142 ) ,PCR分子灯塔法阳性率为 44 .4% (6 3/ 142 )。用PCR分子灯塔法检测临床标本特异性为 10 0 %。结论 PCR分子灯塔法是一种全新的PCR分子杂交模式 ,PCR扩增、荧光探针杂交、检测一体化 ,在单一管内完成 ,其简便、快速、防污染 ,敏感性较高、特异性强 。 李国利 赵铭 庄玉辉 王巍 夏湘萱 徐淼 戴海峰 方翔关键词:结核分枝杆菌 聚合酶链反应 应用多重PCR技术快速鉴定牛分支杆菌卡介苗株 <正> 目的:建立快速鉴定牛分支杆菌卡介苗(Bacillus Calmette Guerin,BCG)菌株的方法。方法:依据最近研究发现的牛分支杆菌BCG菌株不存在命名为缺失区1(deleted region 1,RD1... 李国利 陈保文 庄玉辉 王国治 赵铭 沈小兵 孙桂芝文献传递 应用多重PCR技术快速鉴定牛分支杆菌卡介苗株 2003年 目的:建立快速鉴定牛分支杆菌卡介苗(Bacillus Calmette Guerin,BCG)菌株的方法.方法:依据最近研究发现的牛分支杆菌BCG菌株不存在命名为缺失区1(deleted region 1,RD1)的基因区,而其它牛分支杆菌菌株和其它结核分支杆菌复合群(MTC)菌种(结核分支杆菌、非洲分支杆菌和田鼠分支杆菌)存在RD1基因区的遗传学信息,应用多重聚合酶链反应(PCR)检测RD1基因区存在与否,鉴别BCG菌株与其它牛分支杆菌菌株及其它MTC菌种.RD1区编码约9.5kbDNA片段,至少含8个开放阅读框架.…… 李国利 陈保文 庄玉辉 王国治 赵铭 沈小兵 孙桂芝