赵艳芳
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- RUNX2对BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:研究和确认RUNX2在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:通过Western blot、RT-PCR、荧光素酶活性分析检测BMP9对RUNX2表达的影响;分别在过表达RUNX2和RNA干扰抑制RUNX2表达的情况下,利用碱性磷酸酶(ALP)活性测定和染色、钙盐沉积实验,免疫细胞化学和裸鼠皮下异位成骨实验分析RUNX2对于BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化的影响。结果:BMP9可以促进RUNX2的表达;RUNX2体外可促进BMP9诱导的C3H10T1/2的ALP活性和钙盐沉积,却抑制了OCN表达,RUNX2还可促进BMP9诱导的裸鼠皮下异位成骨;而在降低RUNX2表达后,BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性、钙盐沉积、OCN表达和裸鼠皮下异位成骨均受到抑制。结论:RUNX2可以促进BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化。
- 赵艳芳宋涛刘跃亮罗进勇
- 关键词：间充质干细胞RUNX2成骨分化
- cAMP-PKA-CREB信号通路在骨形态发生蛋白9诱导小鼠间充质干细胞成骨分化中的作用被引量：4
- 2014年
- 目的探讨cAMP-PKA-CREB信号通路在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成骨分化过程中的作用及其机制。方法将C3H10T1/2细胞分别加入不同浓度的cAMP-PKA-CREB信号通路抑制剂H89(1、2.5、5和10μmol/L),检测其对碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响;通过ALP定量和钙盐沉积试验分别检测H89对BMP9诱导C3H10T1/2细胞早期和晚期成骨分化的影响;经Western blot法检测H89对C3H10T1/2细胞中磷酸化CREB、骨钙素(Osteocalcin,OCN)和成骨关键转录因子Runx2表达水平的影响;通过Wentern blot及荧光素酶活性的检测,观察H89对经典信号通路BMPs-smad1/5/8的影响。结果随着H89浓度的增加,对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞ALP的抑制作用明显增强(P<0.05),且呈剂量依赖性;ALP定量和钙盐沉积试验结果表明,H89可明显抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞早期及晚期成骨分化;H89可显著抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中磷酸化CREB、OCN及Runx2蛋白的表达(P<0.05),与AdBMP9组比较,H89对经典BMPs-smad1/5/8信号通路无明显影响(P>0.05)。结论阻断cAMP-PKA-CREB信号通路可抑制BMP9诱导的MSCs C3H10T1/2的成骨分化,为BMP9的临床应用奠定了理论基础。
- 宋涛刘跃亮赵艳芳王文娟徐静罗进勇
- 关键词：信号通路间充质干细胞分化
- 人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润中双氢青蒿素抑制作用的研究
- 2012年
- 目的:研究双氢青蒿素(Dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润的影响并对其机制进行探讨。方法:通过划痕愈合试验、Transwell穿梭试验、人工基质胶浸润试验,检测DHA对143B细胞的转移迁徙能力的影响;Western Bloting检测与人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润密切相关的两种蛋白:基质金属蛋白酶(Matrix Metal Proteinase 9,MMP-9)和血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF),经DHA作用后表达的影响。结果:划痕愈合试验、Transwell穿梭试验和基质胶侵袭试验结果均呈现阳性,表明DHA可有效地抑制人骨肉瘤细胞143B的转移与浸润;Western Bloting结果显示MMP-9和VEGF的表达受到明显抑制,抑制效果随着其浓度增大和时间延长而增加。结论:双氢青蒿素具有明显的抑制人骨肉瘤细胞143B的转移和浸润的作用,可能与双氢青蒿素能抑制MMP-9和VEGF表达有关。
- 刘跃亮赵艳芳张彦曾照芳
- 关键词：双氢青蒿素MMP-9VEGF
- BMP9经JNK激酶途径调控间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化被引量：2
- 2013年
- 为了证实JNK激酶在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用,利用重组腺病毒将BMP9导入间充质干细胞C3H10T1/2.通过碱性磷酸酶(ALP)活性测定、钙盐沉积实验、荧光素酶报告基因检测、Western印迹和组织化学染色等方法,检测BMP9是否可经JNK激酶途径调控间充质干细胞C3H10T1/2向成骨分化.动物实验验证在RNA沉默JNK蛋白激酶后,对BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2向成骨分化的影响.结果发现,BMP9可以增强JNK激酶的磷酸化;利用JNK抑制剂SP600125抑制JNK激酶活性后,BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2的早期成骨指标ALP活性和晚期指标钙盐沉积均受到抑制,而且经典SMAD信号的活化也相应受到抑制;RNA干扰沉默JNK基因表达后,同样也可抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性和裸鼠皮下异位成骨.因此表明,BMP9可活化JNK激酶途径从而诱导间充质干细胞C3H10T1/2向成骨分化.
- 赵艳芳刘跃亮宋涛罗进勇
- 关键词：间充质干细胞成骨分化
- JNK激酶途径调控BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化
- 目的:前期研究发现骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein，BMP9)有较强的诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSCs)向成骨分化的潜力，但是其具体的作用机制还...
- 赵艳芳
- 关键词：间充质干细胞成骨分化分子机制
- bFGF2抑制BMP9诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2向成骨细胞分化被引量：3
- 2013年
- 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)对于骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响,并探讨其机制。方法用BMP9和FGF2重组腺病毒感染C3H10T1/2细胞,测定成骨早期标志物碱性磷酸酶(ALP)活性变化,茜素红S染色观察成骨晚期标志物钙盐沉积,p12SBE-luc荧光素酶报告基因活性检测,Western blot检测经典信号通路smad1/5/8和成骨关键转录因子RUNX2的变化,以及晚期成骨标志物骨钙素(OCN)的表达。结果 FGF2抑制了BMP9诱导的早期成骨指标ALP和晚期成骨指标钙盐沉积和骨钙素的表达,抑制了经典的BMPs-Smad信号通路,抑制了成骨关键的转录因子Runx2的表达。结论 FGF2可抑制BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化。
- 宋涛赵艳芳刘跃亮徐静王文娟罗进勇
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子间充质干细胞成骨分化
