赵健 作品数:6 被引量:5 H指数:1 供职机构: 安徽医科大学 更多>> 发文基金: 安徽省自然科学基金 安徽省高校省级自然科学研究项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人通用转录因子GTFIIF2表达与定位 2014年 目的构建不同标签的人通用转录因子IIF多肽2(GTFIIF2)表达载体,观察其细胞内的表达和定位。方法设计GTFIIF2的引物,以全长cDNA序列为模板,利用聚合酶链式反应技术扩增GTFIIF2全长序列,构建pcDNA3.1-FLAG-GTFIIF2和pCDGFP-GTFIIF2质粒,利用Western blot法和免疫荧光法检测其在细胞表达与定位;构建GST-GTFIIF2质粒,转化到BL21菌株,用IPTG诱导剂诱导融合蛋白表达,用SDS-PAGE分析诱导表达情况。结果免疫荧光法检测GTFIIF2蛋白集中分布在COS7细胞核中,在细胞质没有分布;pcDNA3.1-FLAG-GTFIIF2和pCDGFP-GTFIIF2质粒能够在HEK293T细胞中有效表达;GST-GTFIIF2在BL21菌株中很好的诱导表达。结论 GTFIIF2在COS7细胞、HEK293T细胞和BL21感受态细胞中能有效表达,为更好地了解GTFIIF2蛋白在细胞内的功能提供一定的研究基础。 赵健 耿慧武 乔正 李春雨 李克娟 刘晓颖 范礼斌关键词:基因表达 蛋白定位 BL21 人MRG15在哺乳动物细胞中表达与定位的初步研究 2013年 目的研究细胞周期调控蛋白(MRG15)在哺乳动物细胞中的表达与定位。方法以含人MRG15全长cDNA序列的质粒为模板,PCR扩增,构建MRG15真核表达载体,分别利用Western blot法和免疫荧光法检测其在哺乳动物细胞株中的表达与定位。结果 Western blot法检测结果表明MRG15在哺乳动物细胞中能有效地表达,免疫荧光法结果显示MRG15主要分布在细胞核。结论 MRG15蛋白主要在细胞核中表达,为进一步了解MRG15的功能奠定了一定基础。 姜天鹏 潘林鑫 赵健 乔正 李春雨 张珊静 李克娟 范礼斌关键词:蛋白表达 免疫荧光 GTFIIF2蛋白与CLIC1蛋白的相互作用 目的:此文研究人通用转录因子IIF多肽2蛋白(GTFIIF2蛋白)与胞内氯离子通道1蛋白(CLIC1蛋白)的相互作用,构建质粒 pCDNA3.1-FLAG-GTFIIF2、pCDGFP-GTFIIF2和pGEX-5X-3... 赵健关键词:共定位 相互作用 文献传递 ERp29与β-catenin在结直肠腺瘤癌变过程中的表达及其相关性 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是全球消化系统最常见的恶性肿瘤之一,并且发病率和死亡率还在继续上升。结直肠癌的发生、发展是多基因参与的漫长的复杂病理过程,目前其分子机制尚不十分清楚,信号转导调控的紊... 赵健关键词:结直肠腺瘤 癌变过程 Β-连环蛋白 加速康复外科理念在腹腔镜袖状胃切除术中的应用与思考 目的 探讨加速康复外科理念(ERAS)在腹腔镜袖状胃切除手术中的有效性与安全性。 方法 回顾性分析2018年1月-2020年8月在安徽医科大学第一附属医院胃肠外科(腔镜病区)经过严格手术指征筛选后接受手术治疗的30... 赵健关键词:肥胖症 加速康复外科 人RACK1蛋白在HEK-293T和BL21细胞中的表达及COS7细胞的定位 被引量:5 2014年 目的构建可以表达有活性的蛋白激酶C受体(RACK1)的重组质粒,检测其在细胞内的表达与定位情况。方法设计上下游引物,以RACK1全长cDNA序列为模板,PCR扩增出RACK1序列,分别构建到载体pcDNA3.1和pGEX-5X-3。转染pcDNA3.1-FLAG-RACK1到人胚胎肾细胞(HEK-293T)和非洲绿猴肾成纤维细胞(COS7细胞),转化pGEX-5X-3-RACK1到大肠杆菌BL21感受态细胞中表达,Western blot法和考马斯亮蓝染色法检测RACK1表达情况,免疫荧光法研究其细胞内定位。结果成功构建了pcDNA3.1-FLAG-RACK1和GEX-5X-3-RACK1重组质粒。Western blot证明了其在HEK-293T细胞中的表达,考马斯亮蓝染色显示其在BL21菌株也能大量表达,免疫荧光显示RACK1在COS7的细胞核与细胞质中均有分布。结论人RACK1在HEK-293T细胞和BL21菌株中均能有效表达,在COS7细胞的胞质、胞核均有分布,为进一步研究人RACK1基因的功能奠定了基础。 乔正 赵健 潘林鑫 李春雨 徐雪琴 刘晓颖 范礼斌关键词:RACK1 基因表达 细胞定位 BL21