贾汝静
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：北京大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 神经纤毛蛋白-1的原核表达及兔抗小鼠神经纤毛蛋白-1抗体免疫学活性的研究
- 2007年
- 目的:在原核系统中分段表达神经纤毛蛋白-1(Nrp1);将纯化的蛋白免疫家兔后获得特异的抗体,并将其应用于检测组织和细胞中Nrp1分子的表达。方法:提取BALB/c胎鼠脑组织总RNA,通过RT-PCR分段扩增获得Nrp1基因片段,将PCR产物插入表达载体pET28a(+),获得含5个Nrp1基因片段的重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达并纯化;将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔获得针对目的蛋白的特异性多克隆抗体;利用Nrp1特异性多抗检测胎鼠脑组织和HeLa细胞中Nrp1的表达。结果:在原核系统中分段表达了Nrp1蛋白,通过Ni-NTA纯化了Nrp1蛋白片段;纯化的Nrp1蛋白免疫新西兰大白兔获得了具有免疫活性的多抗;兔抗小鼠Nrp1特异性多抗可用于检测组织、真核细胞中Nrp1的表达。结论:应用原核系统成功地表达了Nrp1蛋白,兔抗小鼠Nrp1特异性多抗可用于免疫学检测Nrp1分子的表达。
- 王文玲于洁薄洪贾汝静袁志宏黄前荣赵金存王炜高晓明
- 关键词：神经纤毛蛋白-1蛋白表达抗体免疫学
- SARS冠状病毒刺突蛋白450-650片段抗原性及受体结合能力的研究
- 目的:SARS冠状病毒(SARS-CoV)刺突(S)蛋白在病毒与细胞表面受体血管紧张素酶2(ACE2)的结合过程中起关键作用。其受体结合结构域(RBM)位于424-494位氨基酸,并折叠成两个反向β片层(β5和β6)。我...
- 赵金存袁志宏贾汝静赵振东徐晓军吕平张岩高晓明
- 关键词：SARS冠状病毒刺突蛋白B细胞表位
- 文献传递
- SARS冠状病毒NS融合蛋白的重组表达纯化与免疫学性质分析(英文)被引量：1
- 2005年
- 刺突蛋白(S)和核心蛋白(N)是SARS冠状病毒的主要结构蛋白.在病毒细胞受体结合和病毒包装过程起重要作用.重组融合表达这2种蛋白具有较高的诊断学价值.对SARS病毒N蛋白和S蛋白氨基酸序列进行计算机分析,选择含有优势抗原表位的N蛋白1～227位氨基酸片段和S蛋白450～650位氨基酸片段,采用序列重叠延伸策略(sequenceoverlappingextension,SOE)构建编码N1227LinkerS450650新型融合蛋白的基因片段,导入原核表达载体,实现融合蛋白在大肠杆菌的高效表达.利用组氨酸标签亲和层析的方法纯化,获得高纯度的融合蛋白.对该融合蛋白的结构特征模拟分析的结果显示,其免疫化学性质均无显著改变.采用ELISA和Western印迹方法对其识别SARS冠状病毒特异性抗体的能力进行初步鉴定,显示该融合蛋白具有较好的抗原性和特异性,可有效特异性地检测恢复期SARS病人血清中抗SARS冠状病毒结构蛋白的抗体,可以作为SARS冠状病毒感染的辅助诊断手段.
- 贾汝静袁志宏赵金存王炜赵振东高晓明徐晓军
- 关键词：SARS冠状病毒组氨酸标签抗原性酶联免疫吸附实验
