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基于ITS2序列的杜仲及其主要混伪品的鉴定被引量：7: 2013年; 目的分析杜仲及其混伪品的ITS2条形码序列,探讨杜仲及其混伪品鉴定的新方法,为杜绝市售商品药材混乱现象提供技术支撑。方法提取样品DNA,利用PCR方法对样品进行核基因ITS2片段扩增,采用DNA克隆测序技术对ITS2基因进行双向测序,所得序列经Seqman程序拼接后,用软件MEGA4.1进行相关数据分析,并构建邻接(Nighbor-joining,NJ)树。利用网站已建立的ITS2数据库预测ITS2二级结构。结果杜仲种内最大K2P遗传距离远远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离;由构建的系统聚类树图可以看出,不同来源的杜仲样品聚成一支,表现为单性系,并与其他混伪品明显分开;比较ITS2二级结构发现,杜仲与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以有效地鉴别杜仲及其混伪品,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据。; 彭梓朱金国谭建锡王利兵; 关键词：混伪品 ITS2 DNA克隆

肺炎克雷伯菌的脂肪酸气相色谱鉴定研究: 2014年; 目的研究建立肺炎克雷伯菌的脂肪酸气相色谱鉴定技术,用于辅助药敏试验、临床用药.方法选择细菌培养时间24 h、脂肪酸提取细菌取样量为30～ 40 mg、优化气相色谱条件,对肺炎克雷伯菌进行脂肪酸鉴定,分析15例阳性、30例阴性临床样本.结果与MIDI数据库匹配结果表明,本方法准确鉴定出肺炎克雷伯菌标准菌株以及临床分离菌株,并且可以鉴定到细菌亚种.结论建立的鉴定方法操作简单、鉴定特异性好、重复性佳,对于辅助药敏试验、临床用药具有指导意义,为脂肪酸鉴定临床病原菌提供了技术基础.; 姚碧容钟昊谭建锡

变性高效液相色谱技术在大豆品种鉴定中的应用被引量：1: 2015年; 单核苷酸多态性(SNPs)和插入-删除标记(In Del)在基因组中广泛分布,日益成为主要作物的重要遗传标记。利用变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测大豆品种的SNP和In Del的多态性,可为大豆种质的品种鉴定提供一种新型的快速检测方法。基于公共数据库中的大豆基因信息,筛选了3条DNA序列作为目标分析片段,以大豆种质粤夏119作为参比基因型,利用DHPLC技术平台对10份大豆品种进行了鉴定。结果表明:混合参比DNA后的大豆样本产生DHPLC谱图均具有多态性,谱型与测序基因型一一对应。综合3条目标片段的DHPLC特征谱图可以区分所有大豆品种。试验结果验证了DHPLC应用于大豆品种鉴定的可行性和可靠性。由于DHPLC分辨率高、快速、操作简单、安全等优点,在大豆的品种鉴定中具有良好的应用前景。; 彭梓谭建锡周慧平袁小雅朱金国王利兵; 关键词：SNP INDEL 大豆变性高效液相色谱技术

基于ITS序列的PCR方法鉴定杂交水稻致病菌Pseudomonas syringae pv.syringae: P.syringae pv.syringae的寄主范围很广,其中包括禾本科的水稻,引起水稻细菌性褐斑病,病斑主要发生在叶片上,叶鞘、穗茎及谷粒均可受害.目前国内对于该病菌的研究大多是针对因其引起的梨花枯、梨树芽枯以及叶斑...; 朱金国龚强莫瑾彭梓钟文英谭建锡; 关键词：杂交水稻致病菌聚合酶链反应; 文献传递

出口茶叶生产加工中有害微生物危害分析被引量：7: 2014年; 阐述我国茶叶的对外贸易、茶叶的消费方式等,对各相关的茶叶有害微生物的危害和危害的程度进行了分析,从茶叶的各工艺过程分析茶叶中有害微生物的污染和危害,提出防治茶叶中有害微生物的措施。; 朱金国莫瑾谭建锡彭梓龚强李拥军李巍; 关键词：茶叶有害微生物危害分析

兰花5种病毒可视化基因芯片检测方法建立被引量：6: 2017年; 为建立运用可视基因芯片技术快速、准确检测兰花病毒的方法,选择黄瓜花叶病毒、齿舌兰环斑病毒、建兰花叶病毒编码外壳蛋白(coat protein,CP)基因、辣椒褪绿病毒编码核衣壳蛋白N基因、落葵皱纹花叶病毒编码CI蛋白基因为目标基因,设计引物和探针(5'标记一段poly T)。利用多重RT-PCR方法进行病毒核酸扩增,将扩增产物与固定于芯片的特异性探针杂交,经清洗、可视化显色后进行结果分析。在优化的检测条件下,本研究筛选出2组多重引物组合Cm(F2-R2a)、Ba(F1-R1);Or(F1-R1)、Cy(F2-R2)和Ca(F1-R1),5条特异性探针。所建立的可视基因芯片具有较好的特异性和重复性,可检测出病毒阳性质粒的量为不低于10~3拷贝·μL^(-1)。; 谭建锡周慧平莫瑾朱金国朱金国吴志鹏; 关键词：兰花病毒

MALDI-TOF-MS鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌的方法研究被引量：3: 2014年; 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对3株水稻细菌性叶鞘褐腐病菌(Pseudomonas fuscovaginae)标准菌株进行蛋白质指纹图谱分析,将不同培养基、不同培养时间和不同样品处理方法等条件下所收集到的质谱峰进行比较,筛选出最佳实验方法,收集20张参考图谱与水稻常见病原细菌质谱峰进行比较,建立该病菌的蛋白质指纹图谱。结果显示用金氏B培养基分离纯化后经提取处理法进行MALDI-TOF-MS分析为最佳的实验方法。该方法对检测与鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌具有较高的灵敏度和重复性,且分析过程简单快速,有一定的应用价值。; 黄迎波周慧平莫瑾谭建锡彭梓朱金国唐连飞; 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱蛋白质指纹图谱

不同探针结构对应用微阵列技术检测兰花病毒结果的影响: 2016年; 根据黄瓜花叶病毒(CMV)、齿舌兰环斑病毒(ORSV)、建兰花叶病毒(Cym MV)、辣椒褪绿病毒(Ca CV)和落葵皱纹花叶病毒(Ba RMV)等5种危害较大的兰花病毒多重RT-PCR扩增产物序列,分别设计了5′端不同poly(d T)长短的探针,分别是:带poly(d T)15 spacer结构、带poly(d T)5 spacer结构、不带poly(d T)spacer结构,比较了3种探针紫外交联后的杂交效果。结果表明:5′端带poly(d T)15结构的探针杂交效率最高,而5′端不带poly(d T)结构的探针杂交效果极差,提示在探针设计时应选择在5′端带poly(d T)15结构以便获得更好的杂交效果。; 谭建锡吴志鹏周慧平莫瑾彭梓黄迎波朱金国; 关键词：兰花病毒微阵列技术杂交

指数富集的配体系统进化技术研究进展及在食品检测中的应用被引量：4: 2016年; 核酸适配体是指能以极高的亲和力和特异性与靶分子结合的寡核苷酸序列,可识别的靶分子范围非常广,并均可通过指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术筛选得到。近年来,在传统SELEX技术的基础上,新的SELEX技术不断出现。这些新技术的出现,在不断完善SELEX技术的同时,也极大地推动了适配体技术在各学科领域中的发展及应用。本文对核酸适配体的筛选方法进行了总结,并介绍了其在食品检测领域的应用现状和发展方向,为核酸适配体的筛选与应用提供了参考。; 谭建锡陈盼莫瑾彭梓朱金国; 关键词：核酸适配体食品检测

奶粉中阴沟肠杆菌实时荧光PCR快速检测方法建立被引量：3: 2016年; 为建立快速有效的阴沟肠杆菌检测方法,根据Genbank中的阴沟肠杆菌Amp C酶基因序列设计引物和探针,建立了奶粉中阴沟肠杆菌实时荧光PCR快速检测方法。结果显示,该方法只对阴沟肠杆菌Amp C酶基因呈阳性反应,而对其他常见非阳性菌株基因组DNA均呈阴性反应,检测限为20 CFU/m L,对人工污染的奶粉样品检测验证了方法的实用性。建立的实时荧光PCR方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测奶粉中污染的阴沟肠杆菌。; 周慧平唐连飞蔡文杰谭建锡朱中武禹思宇; 关键词：阴沟肠杆菌 AMPC酶实时荧光PCR

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