蔡文萍
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 抗冻蛋白应用前景及基因工程表达研究进展
- 2012年
- 抗冻蛋白(antifreeze protein,AFP)又称为热滞蛋白,是一类抑制冰晶生长的蛋白,它具有三个基本特征:热滞效应(thermal hysteresis activity,THA)、冰晶形态效应和重结晶抑制效应(frecrystallization inhibition,RI),抗冻蛋白是一类广泛存在于鱼类、植物、真菌、昆虫中的蛋白,不同生物的AFPs的化学结构、理化性质、空间构型各不相同,并且同类生物之间的AFPs同源性也不高,不存在相似性序列或结构模式,说明它们可能是在不同的有机体中独立进化而来,没有共同的演化规律。随着研究的深入,抗冻蛋白可广泛应用于医学农学食品工业等领域,起到冷冻保护剂,食品添加剂的作用,前人已经对抗冻蛋白的结构、生化性质和抗冻机制进行了阐述,研究主要对抗冻蛋白应用方面及基因工程的表达作了系统综述,为抗冻蛋白的深入研究奠定基础。
- 蔡文萍马纪
- 关键词：抗冻蛋白基因工程
- 荒漠甲虫小胸鳖甲抗冻蛋白的酵母表达及应用被引量：2
- 2015年
- 昆虫抗冻蛋白(Antifreeze protein,AFP)的抗冻活性很高,可应用于生物组织和细胞的低温保存。为了在酵母中表达荒漠甲虫小胸鳖甲Microdera punctipennis抗冻蛋白Mp AFP698,并确定其在低温下的保护作用,本文通过构建真核表达载体p PIC9K-Mpafp698,转化巴斯德毕赤酵母GS115,诱导表达小胸鳖甲抗冻蛋白Mp AFP698。利用免疫印迹(Western blotting)分析Mp AFP698蛋白的特异性表达,结果显示Mpafp698基因可整合到酵母基因组中并分泌表达,且酵母自身蛋白很少分泌表达。检测抗冻蛋白的低温保护作用,结果发现,小胸鳖甲抗冻蛋白可显著改善冷冻小鼠肝脏等器官的细胞形态,降低血细胞在4℃的溶血率,提高SF9细胞冻融后的存活率。本研究表明,小胸鳖甲AFP可以在毕赤酵母中分泌表达,便于纯化,有良好的低温保护效果。
- 孟闪闪蔡文萍马纪
- 关键词：抗冻蛋白巴斯德毕赤酵母血细胞
- 小胸鳖甲抗冻蛋白酵母表达条件优化及应用研究
- 抗冻蛋白（antifreeze protein, AFP）最早是1969年Devries在极区海鱼血液中被发现,是一类抑制冰晶生长的蛋白质,能以非依数性形式降低水溶液的冰点而对其熔点影响甚微,从而导致水溶液的熔点和冰点之...
- 蔡文萍
- 关键词：巴斯德毕赤酵母发酵
- 文献传递
- 聚乙二醇修饰的壳聚糖包裹DNA的转染效果研究被引量：1
- 2010年
- 目的:为探讨聚乙二醇(PEG,MW4000)修饰的壳聚糖用于包裹质粒DNA(Chi-DNA)是否能有效提高口服发送的外源基因在消化道中的表达量。方法:用PEG修饰的壳聚糖包裹不同剂量(10μg,50μg,100μg)的质粒(pCMVβ),形成壳聚糖纳米复合物,通过口服发送后经X-gal染色法检测pCMVβ在小鼠消化道内的表达效果。结果:胃酸消化实验及DNaseⅠ消化实验均表明经PEG修饰的壳聚糖纳米粒能有效地保护DNA,使其免受胃酸及DnaseⅠ的降解。同时在小鼠消化道内的表达量较修饰前明显增加,随着所发送DNA剂量的增加,表达量也相应增加,且包裹10μg质粒的DNA纳米复合物的表达量相当于100μg未修饰复合物的表达水平。结论:经PEG修饰的Chi-DNA纳米复合物有较高的基因转染效果,有望作为基因治疗中高效非病毒口服发送系统的材料。
- 蔡文萍李轶杰
- 关键词：壳聚糖口服
- 不同修饰对壳聚糖转基因效果的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨不同修饰的壳聚糖包裹的质粒(Chi-DNA)纳米复合物在口服发送中外源基因在消化道中的表达差异。方法:分别使用明胶、海藻酸钠、PEG及乙酰化修饰包裹含LacZ的质粒pCMVβ的壳聚糖纳米颗粒,通过口服发送后经X-gal染色检测目的基因在小鼠体内的表达。结果:修饰后的Chi-DNA纳米复合物都能抵抗胃酸的降解0.5h以上,其中PEG及乙酰化修饰的Chi-DNA纳米复合物在胃酸处理1h时仍有部分残留。X-gal染色显示,修饰后的Chi-DNA纳米复合物都有β半乳糖苷酶的表达,其中PEG、海藻酸钠修饰的Chi-DNA纳米复合物在鼠胃和小肠中表达量最高。结论:PEG、海藻酸钠修饰的Chi-DNA纳米复合物有望成为高效的基因治疗用非病毒口服发送系统。
- 李轶杰蔡文萍张富春
- 关键词：壳聚糖修饰纳米复合物基因转染
