蔡拓
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒载体介导HIF-1α基因修饰骨髓间质干细胞促进脑缺血大鼠的神经功能恢复被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨静脉注射低氧诱导因子(HIF-1α)修饰的骨髓间质干细胞对脑缺血大鼠神经功能恢复的影响及其可能的作用机制。方法:利用慢病毒载体介导HIF-1α基因修饰骨髓间质干细胞,获得稳定转染HIF-1α的骨髓间质干细胞,于缺血后3h经股静脉进行体内移植。在细胞移植后的1、7、14、28d进行神经功能检查,使用TTC染色观察缺血体积,分别通过TUNEL和pax6、DCX抗体免疫荧光双标分析缺血侧脑组织的神经细胞凋亡及内源性神经干细胞增殖、存活情况。结果:脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组在14d和28d大鼠神经功能评分显著低于缺血组(P<0.05),神经功能得到明显改善;脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组脑梗死灶体积小于缺血组;脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组缺血侧脑组织的神经细胞凋亡在14d和28d明显少于缺血组(P<0.05);细胞移植后7d,脑缺血BMSCs-mHIF-1α治疗组在海马区域观察到pax6/DCX细胞数量明显多于缺血组(P<0.05)。结论:静脉注射HIF-1α修饰骨髓间质干细胞能够促进脑缺血大鼠神经功能恢复;抗凋亡及激活并促进内源性神经干细胞迁移至缺血区可能是静脉注射HIF-1α修饰骨髓间质干细胞治疗脑缺血的机制。
- 叶伟标邓宇斌叶美红蔡拓
- 关键词：骨髓间质干细胞脑缺血缺氧诱导因子-1
- 缺氧诱导因子-1在缺血性脑损伤中的作用被引量：5
- 2010年
- 作为低氧反应的核转录调节因子，缺氧诱导因子-1（hypoxia—inducible factor-1，HIF-1）在缺氧时表达上调，并通过与低氧反应元件结合，调控一系列下游靶基因，如血管内皮生长因子、葡萄糖转运体、红细胞生成素等的基因表达，在血管生成、无氧代谢以及细胞存活、增殖、迁移、分化等方面起着重要作用。文章对HIF-1的结构功能、活性调节及其在急性缺血性脑损伤中的作用进行综述。
- 蔡拓周艳芳邓宇斌
- 关键词：缺氧诱导因子1脑缺血脑损伤
- HIF-1α修饰的骨髓间充质干细胞增强其抗PC12细胞缺氧损伤作用
- 2015年
- 该文探讨了HIF-1α修饰的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对缺氧损伤所致神经元样PC12细胞凋亡的作用及其可能机制。PC12细胞分别与MSCs、HIF-1α-MSCs细胞在缺氧环境下体外共培养,分为正常组、缺氧组、MSCs组及HIF-1α-MSCs组。MTT检测不同缺氧时间PC12细胞活性。HE染色观察PC12细胞形态。Hoechst 33258染色与Annexin V-FITC双染色法检测PC12细胞凋亡。RT-PCR及细胞免疫荧光检测caspase-3的m RNA及蛋白质水平。MTT结果显示,PC12细胞活性随着缺氧时间而下降,缺氧12 h细胞活性下降至45.1%。与正常组相比,缺氧组PC12细胞凋亡率明显增高,caspase-3的m RNA和蛋白质水平明显上调,两者有显著差异(P<0.05)。与缺氧组相比,MSCs组及HIF-1α-MSCs组的凋亡率降低(P<0.05),caspase-3的m RNA和蛋白质水平下调(P<0.05),且HIF-1α-MSCs组更为明显(P<0.05)。结果证明,HIF-1α修饰的MSCs能增强MSCs的抗PC12缺氧损伤作用,其机制可能与HIF-1α-MSCs降低PC12细胞caspase-3基因表达有关。
- 周艳芳蔡拓莫世静邓宇斌
- 关键词：HIF-1Α骨髓间充质干细胞PC12细胞缺氧细胞凋亡
- 慢病毒载体介导HIF-1α基因修饰骨髓间质干细胞对PC12细胞缺氧损伤影响的研究
- 骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells，BMSCs)是一种来源于骨髓的非造血干细胞。研究证实BMSCs在体外培养的条件下，能分泌血管内皮生长因子(Vascu...
- 蔡拓
- 关键词：慢病毒载体基因修饰细胞缺氧损伤
- 文献传递
- BMSCs移植后通过分泌神经营养因子对大鼠脑缺血神经功能改善的实验研究被引量：7
- 2010年
- 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植改善大鼠脑缺血后神经功能及探讨其可能机制。方法采用线栓法构建大鼠永久性脑缺血动物模型,实验动物分缺血对照组和移植治疗组(n=24/组),缺血24h后移植治疗组经尾静脉移植体外培养的同种异体骨髓间充质干细胞(2×106cells/mLPBS)。移植后14d用Nissl染色观察移植前后缺血脑组织神经元缺损变化。于移植后1、7和14d用mNSS评分检测大鼠神经功能综合评价,于移植后1、3、7和14d用ELISA方法检测缺血中心区脑组织和缺血半暗带中的海马和皮质中VEGF的表达。移植后14d用免疫荧光观察移植后缺血侧海马新生神经元的迁移。结果BMSCs移植14d后大鼠脑缺血损伤的神经功能明显改善。Nissl染色发现BMSCs移植组缺血脑组织中尼1氏体的缺损比对照组少。BMSCs移植组缺血半暗带区的海马在1和3d[(63.324±0.625)pg/mL,(60.125±1.127)pg/mL]与对照组[(31.097±0.677)pg/mL,(35.05±0.681)pg/mL]相比VEGF表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05),缺血半暗带区的皮质中VEGF的表达在BMSCs移植后7和14d[(36.945±0.625)pg/mL,(32.177±1.127)pg/mL],与对照组比[(31.219±0.677)pg/mL,(25.636±0.681)pg/mL]明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,第14天,BMSCs移植组能观察到缺血侧海马新生神经元的迁移。结论BMSCs移植后可使大鼠脑缺血损伤的神经功能显著改善,其作用机制可能为移植的BMSCs通过分泌VEGF等营养因子,促进内源性神经干细胞向脑缺血损伤区迁移,参与损伤修复从而改善脑缺血神经功能。
- 叶伟标邓宇斌王晔蔡拓周艳芳叶美红李燕
- 关键词：脑缺血血管内皮细胞生长因子
